當(dāng)歸對(duì)X線輻射損傷小鼠造血功能恢復(fù)的影響

1、當(dāng)歸對(duì)X線輻射損傷小鼠造血功能恢復(fù)的影響 作者：李宗山，李恒元，李泉，王志強(qiáng)，邱世翠【摘要】 目的 觀察當(dāng)歸對(duì)線輻射損傷小鼠造血功能恢復(fù)的影響。方法用100%當(dāng)歸浸出液定期給小鼠灌胃，5d后，用線照射0.11 CGY，1次/d，共照射5次，檢測(cè)小鼠骨髓細(xì)胞增殖和抗體的產(chǎn)生。結(jié)果用藥組小鼠骨髓細(xì)胞增殖和抗體產(chǎn)生有顯著增強(qiáng)作用，與照射組相比均有非常顯著性差異（P0.001）。結(jié)論 當(dāng)歸有明顯抗X線輻射、促進(jìn)小鼠骨髓細(xì)胞增殖和抗體產(chǎn)生的作用。 【關(guān)鍵詞】 當(dāng)歸 骨髓細(xì)胞增殖 抗體 小鼠AbstractObjectiveTo research the effect of Angelica sinens

2、is Diels, (ASD) on hemopoietic rehabilitation of radiated mice . MethodsFilled the stomaches of the mice with 100% water extract of ASD regularly for 5 days. The mice were radiated with X-radiation with a dose of 0.11CGY once each day for 5 days. Proliferation of bone marrow cell and the production

3、of antibody were tested. ResultsThe proliferation of bone marrow cell and the production of antibody increased significantly in ASD group compared with control group (P0.001). ConclusionASD can resist X-radiation obviously and enhance bone marrow cell proliferation and the production of antibody.Key

4、 wordsAngelica sinensis Diels (ASD)； Bone marrow cell proliferation； Antibody ； Mice 當(dāng)歸，始載于神農(nóng)本草經(jīng)，列為中品，歷代本草均有收藏。當(dāng)歸使氣血各有所歸，故名。其為傘形科多年生草本植物當(dāng)歸Angelica sinensis（OIiv.）Diels 的根，主產(chǎn)于甘肅東南部岷縣（秦州）、武都、漳縣、成縣等地以及陜西、四川、湖北、云南，其中以岷縣產(chǎn)量多，質(zhì)量亦佳，均為栽培。當(dāng)歸的主要功效有補(bǔ)血活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤(rùn)腸通便。筆者主要研究了當(dāng)歸對(duì)線輻射損傷小鼠造血功能恢復(fù)的影響，以期為臨床提供理論依據(jù)。1 材料與方法1.

5、1 試劑與儀器當(dāng)歸（購于濱州醫(yī)學(xué)院附屬中藥房）200 g加水2 000 ml，溫火煎煮2 h，去渣濃縮為200ml備用。美國Multiskan產(chǎn)全自動(dòng)酶標(biāo)儀；CO2培養(yǎng)箱由美國Forma公司生產(chǎn)；美國產(chǎn)(IE.USA)冷凍離心機(jī)；超凈工作臺(tái)由蘇州凈化設(shè)備廠生產(chǎn)；日本東芝DGW-20ATOSHIBA500mA遙控胃腸機(jī)；輻射劑量測(cè)量用測(cè)試技術(shù)研究院產(chǎn)9206劑量?jī)x；LPS為美國Sigma產(chǎn)品；MTT為FLUKA公司產(chǎn)品；二甲基亞砜(DMSO)為蘇州化工研究所生產(chǎn)；RPMI-1640為美國GIBCO公司產(chǎn)品。1.2 動(dòng)物分組與給藥BALB/C小鼠 36只，體重1822 g，雌雄兼有,購于北京醫(yī)科大

6、學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。將動(dòng)物隨機(jī)分3組，每組12只。組為生理鹽水對(duì)照正常組；組為 鹽水加照射組；組為當(dāng)歸藥物加照射實(shí)驗(yàn)組。，組每天用生理鹽水灌胃，0.5 ml/次，1次/d；組每天用當(dāng)歸液灌胃，0.5 ml/次，1次/d；，組于第6天在灌胃后30 min行全身暴露射線 照射，用等效方野18 cm18 cm，焦點(diǎn)-鼠距80 cm。每天照射0.11CGY，1次/d，共照射5次。1.3 檢測(cè)指標(biāo)及方法頸椎脫臼處死小鼠，無菌操作取小鼠雙股骨骨髓細(xì)胞，調(diào)細(xì)胞濃度至5106/ml，取100 l加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，設(shè)5個(gè)復(fù)孔，置37，5% CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h，終止前5 h，摻入MTT（5 mg/ml

7、）10 l/孔，終止培養(yǎng)時(shí)離心棄上清，每孔加入100 l DMSO 溶解MTT還原產(chǎn)物甲臜（Formazan）溶解緩沖液，充分震蕩10 min，全自動(dòng)酶標(biāo)儀用560 nm波長(zhǎng)測(cè)OD值，以O(shè)D值代表骨髓細(xì)胞活性。1 本法體外B細(xì)胞產(chǎn)生分泌抗體裂解紅細(xì)胞所釋放的血紅蛋白量（以O(shè)D值表示），其結(jié)果可反應(yīng)機(jī)體體液免疫功能。實(shí)驗(yàn)第5天分別將5%的綿羊紅細(xì)胞0.2 ml注入各組小鼠腹腔內(nèi)，第11天眼球放血，頸椎脫臼致死，常規(guī)取脾臟，然后進(jìn)行脾細(xì)胞計(jì)數(shù)，調(diào)細(xì)胞濃度至1107/ml，取脾細(xì)胞1ml，110新鮮豚鼠血清（補(bǔ)體）1 ml，0.2%綿羊紅細(xì)胞（SRBC）1 ml，混勻，37水浴1 h，1 500 r

8、/m離心10 min，取上清液用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板于全自動(dòng)酶標(biāo)儀450 nm波長(zhǎng)處測(cè)A值，作為QHS反應(yīng)值。1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用組間均數(shù)差異t檢驗(yàn)的方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。2 結(jié)果當(dāng)歸對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞增殖、抗體產(chǎn)生的影響見表1。表1 當(dāng)歸對(duì)小鼠骨髓細(xì)胞增殖、抗體產(chǎn)生的影響(略)3 討論當(dāng)歸是臨床上常用的中藥，研究3證實(shí)，當(dāng)歸有明顯的抗輻射損傷作用。用當(dāng)歸對(duì)輻射損傷的家兔進(jìn)行腹腔注射，引起家兔染色體畸形變率明顯下降，連續(xù)注射9 d，家兔染色體畸變率完全恢復(fù)正常，體外用藥實(shí)驗(yàn)結(jié)果與體內(nèi)注射結(jié)果相同。對(duì)Co-射線輻射損傷后的小鼠通過腹腔給予當(dāng)歸注射液，連續(xù)給藥80 d后發(fā)現(xiàn)，受輻射損傷后的卵巢于

9、照射后第15天開始進(jìn)入恢復(fù)期，比未給當(dāng)歸的對(duì)照組顯著提前。當(dāng)歸多糖對(duì)受照小鼠的造血細(xì)胞亦有輻射防護(hù)作用，照射前注射當(dāng)歸多糖能促進(jìn)照射小鼠脾臟內(nèi)源性造血灶形成，提高受照小鼠骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)，當(dāng)歸多糖對(duì)CFV-C和CFV-S的放射敏感性影響較少，但能防止照射后效應(yīng)，能顯著促進(jìn)小鼠CFV-C和CFV-S的恢復(fù)，這可能是其抗輻射作用原理之一。水浸液灌飼小鼠，能顯著促進(jìn)血紅蛋白及紅細(xì)胞的生成，其抗貧血作用可能與所含的維生素B12、煙酸、葉酸、亞葉酸等有關(guān)。從上述實(shí)驗(yàn)中可以看出，當(dāng)歸可刺激小鼠抗體的產(chǎn)生，使抗體分泌量增加，與照射組相比有非常顯著性差異(P0.001)。當(dāng)歸對(duì)骨髓細(xì)胞增殖有明顯促進(jìn)作用，與照射組相比有非常顯著性差異(P0.001)。骨髓細(xì)胞增殖歸之于集落刺激因子(CSF)的存在4，CSF是一組在體內(nèi)外均能強(qiáng)烈刺激造血祖細(xì)胞增殖，分泌并形成細(xì)胞集落的低分子細(xì)胞因子。本研究結(jié)果表明，當(dāng)歸有明顯抗輻射的作用，調(diào)節(jié)骨髓造血和促進(jìn)抗體產(chǎn)生的作用?？诜?dāng)歸液可作為線檢查病人或接觸線者的保健飲品，有利于減輕線接觸者免疫造血功能下降的弊端，提高療效。本文為當(dāng)歸的臨床應(yīng)用提供了依據(jù)。【】