清肺消炎丸對COPD急性發(fā)作期大鼠作用機制的研究

1、    清肺消炎丸對COPD急性發(fā)作期大鼠作用機制的研究劉 偉 孫增濤 劉恩順 付 敏 關(guān) 鵬 蘇景深天津中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院(300161)關(guān)鍵詞：消肺消炎丸;COPD;實驗研究COPD是以慢性炎癥以及炎癥性損傷和修復(fù)造成氣道和血管壁重塑為基本病理特征，進而引起慢性氣流受限或受阻的一類疾病。CO P D目前居全球死亡原因的第4位。1 我國40歲以上人群COPD的總患病率達8.2%，其中男性的患病率是1 2.4%，女性是5.1%，COPD在農(nóng)村的患病率是8.8%，在城市是7.8%2。清肺消炎丸是在醫(yī)圣張仲景傷寒論“麻杏石甘湯”基礎(chǔ)上化裁，組成的中藥復(fù)方

2、制劑，經(jīng)多年臨床觀察，該藥清肺化痰、止咳平喘功效獨特，臨床應(yīng)用療效顯著，可以滿足COPD急性發(fā)作期臨床治療需要并得到臨床試驗的驗證。本研究從COPD大鼠肺組織病理、氣道和肺部炎癥、蛋白酶/抗蛋白酶失衡等指標的變化，探討清肺消炎丸治療COPD急性發(fā)作期的作用機制。1 材料與方法1.1 材料1.2 方法2 結(jié)果2.1 一般情況 正常組大鼠體肥，反映敏捷，好活動，皮毛有光澤。造模各組大鼠神情倦怠，喜蜷縮，皮毛無光澤且活動能力下降。造模各組大鼠于第三天的時候開始有咳嗽，口鼻潮濕等。在造模過程中，大鼠出現(xiàn)咳嗽，呼吸困難、喉間哮鳴音，喜靜少動，強刺激活動后可見上述喘咳癥狀加重。喂藥后，清肺消炎丸組可見氣喘

3、、咳嗽減輕，以及口鼻分泌物減少。氨茶堿組亦可見喘咳癥狀減輕。2.2 肺組織病理學(xué)觀察 正常對照組(圖4)呼吸道及肺泡結(jié)構(gòu)正常，支氣管纖毛排列整齊，肺泡結(jié)構(gòu)完整，無氣腫及少許炎癥。COPD 模型組(圖1)可見肺泡腔明顯擴大、間隔變窄、肺泡壁斷裂、擴張的肺泡融合成較大的囊腔，呈明顯的肺氣腫改變;血管腔充血，肺間質(zhì)及氣道管壁炎性細胞浸潤;肺間質(zhì)及血管旁均可見大量吞噬了煙塵顆粒的AM，部分AM崩解破壞;成纖維細胞明顯增加，可見小氣道平滑肌增殖、管腔狹窄以及血管壁增厚等結(jié)構(gòu)重塑。氨茶堿組(圖3)仍見有大量炎癥細胞的浸潤;清肺消炎丸組(圖4)用藥后可見明肺部炎癥較模型組有明顯的改善。2.3 大鼠肺組織腫瘤

4、壞死因子(TNF-) 見附表12.4 大鼠肺組織基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)的檢測結(jié)果 見附表22.6 大鼠肺組織基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和粘連蛋白(LN)蛋白的檢測結(jié)果 見表3。     3 討論COPD 是一種以中性粒細胞、巨噬細胞、T淋巴細胞(尤其是CD+8 T淋巴細胞) 在肺不同部位增加為特征的慢性炎癥性疾病。激活的炎癥細胞釋放多種遞質(zhì)，包括TNF 、IL 8、白三烯B4 (LTB4 )等。這種異常的炎癥反應(yīng)是COPD重要病理過程如細支氣管炎、肺氣腫的危險因素。炎前因子腫瘤壞死因子-(TNF-) 在COPD 氣道慢性炎癥的發(fā)生和發(fā)展中

5、的重要地位已獲得公認。它能誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)，增加氣道中性粒細胞數(shù)目，促進中性粒細胞粘附而加強異常細胞外彈性蛋白溶解活性，在COPD發(fā)生發(fā)展中起重要作用。COPD 大鼠肺組織中TNF-水平明顯高于正常對照組(P<0.05)，提示該細胞因子與COPD 氣道炎癥及其病理改變密切相關(guān)。清肺消炎丸可降低肺組織中TNF-水平，表明該藥具有一定的抑制COPD 氣道及肺部炎癥的作用?？梢哉J為清肺消炎丸通過減少肺組織中TNF-水平，進而減輕炎癥細胞的浸潤，是治療該病的有效途徑之一。MMP-9和TIMP-1 的動態(tài)平衡，目前被認為是反映氣道組織破壞與修復(fù)動態(tài)平衡的標志。MMP-9即明膠酶B，其主要作用為降解彈力

6、纖維、明膠、及、V型膠原。其參與COPD 的發(fā)病機制主要是通過破壞肺泡基質(zhì)成分，使肺泡結(jié)構(gòu)破壞，形成肺氣腫及參與氣道重塑而導(dǎo)致氣流阻塞。MMP-2即明膠酶A主要降解彈力纖維、纖維連接素及I、V、 型膠原等，MMP-2的增多使氣道結(jié)構(gòu)細胞失去正常的支撐作用。LN是基底膜透明層特異的結(jié)合蛋白，是細胞外基質(zhì)(ECM)的主要組成部分之一，其作用是固定上皮、內(nèi)皮和肌肉并支持其生長。LN 顯著增高，表明有過多的LN生成并沉積于肺組織，同時釋放入血和支氣管上皮襯液，參與上皮和內(nèi)皮細胞的修復(fù)和過度增生。細胞外基質(zhì)破壞和修復(fù)常常維持平衡，一旦平衡打破即出現(xiàn)病理狀態(tài)。本實驗本研究結(jié)果表明，COPD 大鼠模型肺組織

7、中MMP-9、MMP-2、TIMP-1及LN的水平明顯高于正常對照組(陽性細胞平均值P<0.05)，提示蛋白酶/抗蛋白酶系統(tǒng)及細胞外基質(zhì)參與了COPD病理改變。清肺消炎丸組可降低肺組織中MMP-9、MMP-2、TIMP-1及LN水平，改善MMP-9/TIMP-1比例失衡，表明該藥具有調(diào)節(jié)蛋白酶/抗蛋白酶，抑制細胞外基質(zhì)過度沉積，改善氣道重塑的作用。參考文獻1 中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會慢性阻塞性肺疾病學(xué)組.COPD診治指南(2007年修訂版)S.繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育,2007,21(2):31-42.2 ZHONG N，WANG C，RAN P，et a1.Prevalence ofchronic obst