淺論氟伐他汀對高血壓腎臟硬化大鼠炎癥因子的影響

1、淺論氟伐他汀對高血壓腎臟硬化大鼠炎癥因子的影響 作者：莫亞宏 張贏予 王羅卿 郭俊芳 王好 陳建華 張國輝【摘要】 目的： 探討氟伐他汀對高血壓大鼠腎臟皮質(zhì)炎癥因子表達(dá)的影響。方法： 給予左旋硝基精氨酸甲酯(LNAME)建立氧化亞氮缺乏性高血壓腎臟硬化大鼠模型。觀察氟伐他汀對高血壓腎臟硬化大鼠24 h尿蛋白、尿微白蛋白、組織病理學(xué)及IL6，IL1，Ang 的影響。結(jié)果： 氟伐他汀可減少高血壓腎臟硬化大鼠24 h尿蛋白、尿微白蛋白的排泄，減輕腎臟硬化，降低IL6，IL1，Ang 的分泌。結(jié)論： 氟伐他汀能改善腎臟硬化，降低炎癥因子水平是其機(jī)制之一。 【關(guān)鍵詞】 高血壓腎臟硬化； 氟伐他?。?炎癥

2、因子 Abstract Objective: To assess the inflammation occurring in the kidney of SpragueDawley rats induced by lnitroargininemethylester(LNAME)over time and investigate the effects of fluvastatin treatment.Methods： Male SpragueDawley rats were administered by LNAME to form hypertensive nephropathy,then

3、the rats were administered by fluvastatin. After 16 weeks the rats had their kidneys removed to be measured angiotensin (Ang)，interleukin6（IL6） and interleukin1（IL1）.Pathologic measurement was detected. Results： In comparison with the group of hypertensive nephropathy,the urinary of 24 hours protein

4、 and microalbunminuria were much lower in the group of fluvastatin(P0.01),and the level of Ang，IL6 and IL1 were much lower,too. Conclusion： Fluvastatnin prevents or retards hypertensioninduced renal nephropathy via inhibition of renal nephropathy fibrosis and proteinuria，the inflammation might be on

5、e of the mechanisms. Key words hypertensive nephropathy；fluvastatin；inflammatory cytokine 高血壓腎臟硬化(hypertensive nephropathy)即腎臟小動脈硬化，其主要特征是管壁增厚，管腔變窄，進(jìn)而繼發(fā)腎實(shí)質(zhì)缺血性損害。近年來，高血壓患者日益增多，在終末期腎衰竭患者中，高血壓所導(dǎo)致的終末期腎衰發(fā)生率呈上升趨勢。隨著他汀類藥物在心血管方面的廣泛應(yīng)用，其抗炎、改善內(nèi)皮功能等非降脂作用有了新的進(jìn)展，但他汀類藥物用于高血壓腎臟硬化的研究較少，機(jī)制尚不明確。本實(shí)驗(yàn)通過觀察氟伐他汀對左旋硝基精氨酸甲酯(L

6、NAME)誘導(dǎo)的高血壓腎臟硬化大鼠的尿蛋白、炎癥因子等的影響，探討其可能的作用機(jī)制。 1 材料與方法 1.1 材 料 1.2 方 法 2 結(jié) 果 2.1 各組大鼠收縮壓的變化 LNAME灌胃后，造模大鼠2周血壓即升高，到第4周時形成穩(wěn)定的高血壓模型，4周時收縮壓140 mmHg,均達(dá)到高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)。8周時正常對照組收縮壓為（102.66.48）mmHg，高血壓腎臟硬化組為（213.813.44）mmHg，氟伐他汀組為（216.611.44）mmHg，高血壓腎臟硬化組與氟伐他汀組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 16周時正常對照組收縮壓為(106.77.26)mmHg、高血壓腎臟硬化組為

7、(207.311.53)mmHg，氟伐他汀組為(199.311.61)mmHg, 高血壓腎臟硬化組與氟伐他汀組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）,氟伐他汀對血壓沒有影響，見圖1。 2.2 尿液的檢測結(jié)果 高血壓腎臟硬化組和氟伐他汀組24 h尿蛋白從第2周起即明顯增加，到第8周時達(dá)到高峰，使用氟伐他汀以后，氟伐他汀組從12周后逐步下降，到16周時，高血壓腎臟硬化組為(51.152.72)mg/d，氟伐他汀組為(37.544.79)mg/d，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.01），見圖2。 2.3 腎臟皮質(zhì)IL6，IL1，Ang的檢測結(jié)果 氟伐他汀干預(yù)8周以后測量腎皮質(zhì)中的濃度，氟伐他汀組IL6

8、濃度（415.040.76）pg/mg與高血壓腎臟硬化組（481.740.03）pg/mg比較顯著降低（P0.01）。氟伐他汀組IL1濃度（747.5132.87）pg/mg與高血壓腎臟硬化組（862.8104.37）pg/mg比較顯著降低（P0.05）。氟伐他汀組Ang濃度(33.867.82)pg/mg與高血壓腎臟硬化組（48.024.51）pg/mg比較顯著降低，（P0.01），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。 2.4 腎臟病理變化 與正常對照組相比，高血壓腎臟硬化組多數(shù)腎小球存在嚴(yán)重硬化，腎小球萎縮，囊腔縮小，球囊明顯黏連，重度系膜細(xì)胞增生，基底膜增厚明顯，單個腎小球內(nèi)細(xì)胞數(shù)增多，HE染色可見系膜

9、旁及系膜區(qū)嗜紅物質(zhì)基質(zhì)沉積，見圖4。Masson染色可見腎小球內(nèi)有較強(qiáng)的基質(zhì)膠原陽性染色(藍(lán)色)，見圖5。腎小球硬化指數(shù)評分、單個腎小球內(nèi)細(xì)胞數(shù)有統(tǒng)計學(xué)意義。氟伐他汀組與高血壓腎臟硬化組相比明顯好轉(zhuǎn)，腎小球硬化指數(shù)評分、單個腎小球內(nèi)細(xì)胞數(shù)見表1。表1 腎小球硬化指數(shù)評分、單個腎小球內(nèi)細(xì)胞數(shù) 3 討 論 NO是在血壓長期調(diào)節(jié)中起著重要作用的自由基性質(zhì)的氣體分子，給予氧化亞氮合酶(NOS)抑制劑LNAME可引起慢性高血壓和腎臟硬化,是目前普遍認(rèn)可的一種造模方法。在我們的實(shí)驗(yàn)中，給予LNAME后，大鼠血壓第2周起即明顯升高,血壓的改變可能與NO的合成減少等內(nèi)皮功能紊亂有關(guān)。因?yàn)閮?nèi)皮細(xì)胞可以維持毛細(xì)血

10、管結(jié)構(gòu)完整，同時通過自分泌和（或）旁分泌方式產(chǎn)生一系列的體液因子，如NO等，所以對腎臟的血流動力學(xué)起著重要的調(diào)節(jié)作用。伴隨著血壓升高和毛細(xì)血管結(jié)構(gòu)受損，出現(xiàn)了24 h尿蛋白和尿微白蛋白的升高，以及炎癥因子IL6，IL1升高。腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞損害是高血壓腎臟硬化的重要始動因素，一旦毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞受損后，血小板就黏附、聚集，從而形成微血栓，內(nèi)皮細(xì)胞釋放炎癥介質(zhì)IL6，IL1。而炎癥介質(zhì)之間又可相互促進(jìn)，產(chǎn)生其他的炎癥介質(zhì)，最后形成粥樣斑塊，引起高血壓腎臟硬化組腎臟血管狹窄、缺血，導(dǎo)致囊腔縮小，球囊明顯黏連，重度系膜細(xì)胞增生，腎小球嚴(yán)重硬化，腎小球硬化指數(shù)評分、單個腎小球內(nèi)細(xì)胞數(shù)明顯高于正常

11、對照組。 在我們的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)高血壓腎臟硬化組和氟伐他汀組的Ang明顯高于正常對照組，提示LNAME導(dǎo)致腎臟硬化主要與RAS的激活有關(guān)。一方面Ang可能通過腎臟局部的自分泌、旁分泌作用,使腎血管收縮，導(dǎo)致腎臟血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂甚至損傷，誘導(dǎo)腎臟局部炎癥反應(yīng)；另一方面Ang可使自由基增多，細(xì)胞增生，炎癥因子和成纖維因子增多，Ang的這種非血流動力學(xué)作用導(dǎo)致腎臟炎癥，纖維化，組織瘢痕形成，造成腎臟硬化1。 隨著羥甲基戊二酸單酰輔酶還原酶抑制劑他汀類藥物作為降血脂藥物在臨床的廣泛應(yīng)用，近年來其非調(diào)脂作用日益受到重視。在最近有9 000名心臟病和腎臟病患者參與的臨床試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)羅蘇伐他汀能對慢性腎臟病患

12、者起保護(hù)作用2。在慢性腎臟病中他汀類藥物可以抑制腎臟細(xì)胞增殖、巨噬細(xì)胞的聚集以及下調(diào)炎癥因子3。在本實(shí)驗(yàn)中，使用氟伐他汀后，氟伐他汀組與高血壓腎臟硬化組相比，血壓變化沒有統(tǒng)計學(xué)意義，故其作用不是通過改變血壓來實(shí)現(xiàn)的。與高血壓腎臟硬化組相比，氟伐他汀組腎臟皮質(zhì)的IL6，IL1水平明顯下降，是因?yàn)榉ニ】梢詼p輕對內(nèi)皮細(xì)胞NO合酶表達(dá)的影響，保護(hù)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞免受損傷，減少內(nèi)皮細(xì)胞釋放IL6，IL1。而NO還能抑制N乙基順丁烯二酰亞胺敏感因子(NSF)，對炎癥細(xì)胞遷移具有一定的抑制作用4。同時他汀類藥物尚可通過改善內(nèi)皮細(xì)胞的功能，抑制平滑肌細(xì)胞的增殖，發(fā)揮直接的抗凝作用，穩(wěn)定已經(jīng)形成的粥樣斑塊，

13、減少炎癥反應(yīng)5。氟伐他汀組24 h尿蛋白、尿微白蛋白的下降是通過他汀對炎癥因子的抑制來實(shí)現(xiàn)的，同時他汀可通過減少受體介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)吞噬來增加蛋白的排泄，減緩腎臟纖維化6。 他汀類藥物抑制Ang的作用機(jī)制可能是多途徑的，他汀類藥物能減少細(xì)胞內(nèi)甲羥戊酸等合成,使其下游的類異戊二烯化作用產(chǎn)物焦磷酸法尼酯(FPP)和焦磷酸牛兒基牛兒酯(GGPP)減少，阻礙小GTP蛋白類異戊二烯化，影響細(xì)胞膜受體和胞質(zhì)蛋白的脂化,抑制Ang的異常表達(dá)、受體結(jié)合以及受體后信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。但其機(jī)制仍需進(jìn)一步證實(shí)。 綜上所述，內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂和炎癥因子在高血壓腎臟硬化的發(fā)生、進(jìn)展中起了重要作用，氟伐他汀可通過保護(hù)內(nèi)皮功能抑制炎癥因子

14、的表達(dá)，減少炎癥反應(yīng)，從而減少蛋白尿，減輕腎臟硬化，對高血壓腎臟硬化的發(fā)生、進(jìn)展起保護(hù)作用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 1 Diep QN, Amiri F, Benkirane K，et al. Longterm effects of the PPAR gamma activator pioglitazone on cardiac inflammation in strokeprone spontaneously hypertensive ratsJ.Can J Physiol Pharmacol，2004，82(11):976-985.2 Strippoli GF, Navaneethan SD, Jo

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