水中磷檢測(cè)方法-分光光度計(jì)／維生素丙法NIEAW42753B

1、水中磷檢測(cè)方法-分光光度計(jì)/維生素丙法中華民國(guó)99年9月15日環(huán)署檢字第0990084224號(hào)公告自中華民國(guó)99年12月15日起實(shí)施NIEA W427.53B一、方法概要水樣以硫酸、過(guò)硫酸鹽消化處理，使其中磷轉(zhuǎn)變?yōu)檎姿猁}形式存 在後，再參加鉬酸銨、酒石酸銻鉀，使其與正磷酸鹽作用生成磷鉬酸phosphomolybdic acid,經(jīng)維生素丙ascorbic acid還原為藍(lán)色複合 物鉬藍(lán)molybdenum blue,以分光光度計(jì)於波長(zhǎng) 880 nm處測(cè)其吸光 度定量之。水樣如未經(jīng)消化處理，所測(cè)得僅為正磷酸鹽之含量。二、適用範(fàn)圍本方法適用於地面水體、地下水、海域水質(zhì)及廢污水中總磷或 正磷酸鹽之

2、檢驗(yàn)。採(cǎi)用1公分樣品槽時(shí)檢量線範(fàn)圍為 0.020.50 mg P/L,方法偵測(cè)極限約為 0.006 mg P/L;採(cǎi)用5公分樣品槽則為 0.005 0.050 mg P/L,方法偵測(cè)極限約為 0.002 mg P/L。三、干擾一高濃度之鐵離子或砷酸鹽濃度大於0.1 mg As/L時(shí)會(huì)產(chǎn)生干擾，可以亞硫酸氫鈉排除干擾。二六價(jià)路、亞硝酸鹽、硫化物、矽酸鹽產(chǎn)生干擾。三水樣含有色度或濁度時(shí)，可於水樣中添加除維生素丙與酒石酸銻 鉀以外所有相同試劑，並測(cè)定其吸光度，作為空白校正值。四、設(shè)備及材料一玻璃器皿：所有玻璃器皿先以1 + 1熱鹽酸溶液清洗，再以蒸餾水淋洗。二pH 計(jì)。三加熱裝置或高壓滅菌釜。四分光

3、光度計(jì)，使用波長(zhǎng) 880 nm,附1 cm 或 5 cm之樣品槽。五天平：可精秤至 0.1 mg。五、試劑所有檢測(cè)時(shí)使用的試劑化合物除非另有說(shuō)明，否則必須是分析試藥級(jí)以上之等級(jí)。假設(shè)須使用其他等級(jí)試藥，在使用前必須要確認(rèn)該試劑 的純度足夠高，干擾物最少，使檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度不致降低。一試劑水：不含待測(cè)物之去離子水，比電阻值三16 M Q cm。二酚酞指示劑：溶解0.5 g酚酞phenolphthalein於50 mL 95%乙 醇或異丙醇isopropylalcohol,再參加50 mL試劑水。三硫酸溶液，11 N:緩慢將310 mL濃硫酸參加於600 mL試劑 水，冷卻後稀釋至1 L。四硫酸溶

4、液，5 N:緩慢將70 mL濃硫酸參加於300 mL試劑水， 冷卻後稀釋至500 mL。五硫酸溶液，1 N:緩慢將14 mL濃硫酸參加於300 mL試劑水， 冷卻後稀釋至500 mL。六過(guò)硫酸銨。七氫氧化鈉溶液，1 N:溶解40 g氫氧化鈉於試劑水，稀釋至1 L。八酒石酸銻鉀溶液：在 500 mL量瓶?jī)?nèi)，溶解1.3715 g酒石酸銻 鉀於400 mL試劑水，稀釋至刻度。貯存於附有玻璃栓蓋棕色瓶 中，並保持4C冷藏。九鉬酸銨溶液：溶解20 g鉬酸銨於試劑水中，再定量至 500 mL。 貯存於塑膠瓶並保持 4C冷藏。十維生素丙溶液，0.1 M:溶解1.76 g維生素丙於試劑水中，再定 量至100

5、mL。使用當(dāng)天配製。十一 混合試劑：依次混合50 mL 5N硫酸溶液，5 mL酒石酸銻鉀溶 液，15 mL鉬酸銨溶液及30 mL維生素丙溶液使成100 mL混 合試劑，每種試劑參加後，均需均勻混合，且混合前所有試劑 均需保持於室溫，假設(shè)混合後產(chǎn)生濁度時(shí)，搖盪數(shù)分鐘使?jié)岫认?失，本試劑不穩(wěn)定，應(yīng)於使用前配製。十二 磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：在1,000 mL量瓶?jī)?nèi)，溶解0.2197 g無(wú)水磷 酸二氫鉀105C，乾燥1小時(shí)於試劑水，稀釋至刻度;1.00 mL = 50.0卩g P。保存期限1個(gè)月。十三 磷標(biāo)準(zhǔn)溶液I:在1,000 mL量瓶?jī)?nèi)，以試劑水稀釋10.0 mL 磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液至刻度；1.00 mL=

6、 0.50卩g P。使用前配製。十四 磷標(biāo)準(zhǔn)溶液H:在1,000 mL量瓶?jī)?nèi)，以試劑水稀釋100 mL 磷標(biāo)準(zhǔn)溶液I至刻度；1.00 mL= 0.05卩g P。使用前配製。十五 亞硫酸氫鈉溶液，溶解 5.2 g亞硫酸氫鈉於1 N硫酸溶液中， 再以1 N硫酸溶液定量至100 mL。六、採(cǎi)樣及保存以1 + 1熱鹽酸洗淨(jìng)之玻璃瓶採(cǎi)集水樣，假設(shè)為檢測(cè)總磷時(shí)，則需添 加硫酸至pH值小於2,於4玄C暗處冷藏，保存期限為 7天。假設(shè) 為檢測(cè)正磷酸鹽也則無(wú)須添加硫酸，但須於48小時(shí)內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),未檢測(cè)前仍需於 4±?C 暗處冷藏。七、步驟一總磷： 包括正磷酸鹽、聚焦磷酸鹽及有機(jī)磷o(hù)rthophosph

7、ateconden sed phosphate and orga ni cally bound phosphate1. 取50 mL水樣或適量水樣稀釋至 50 mL,置於三角燒瓶中，加入一滴酚酞指示劑，如水樣呈紅色，滴加11 N硫酸溶液至顏色剛好消失，再參加1.0 mL 11 N硫酸溶液。2. 參加0.4 g過(guò)硫酸銨。3. 置於已預(yù)熱之加熱裝置上，緩慢煮沸3040分鐘或直至殘留約10 mL液體注意勿使水樣乾涸；或?qū)⑺畼又渺陡邏簻缇校?以 120C, 1.01.4 Kg/cm2 加熱 30 分鐘。4. 假設(shè)以加熱裝置消化，樣品冷卻後以試劑水稀釋至約30 mL 註1,參加1滴酚酞指示劑,以1

8、N或適當(dāng)濃度之氫氧化鈉溶液， 調(diào)整樣品至淡粉紅色出現(xiàn)後，再以試劑水定量至50.0 mL;假設(shè)使用高壓滅菌釜消化，則冷卻後參加 1滴酚酞指示劑，以1N或 適當(dāng)濃度之氫氧化鈉溶液，調(diào)整樣品至淡粉紅色出現(xiàn)後，再以試 劑水定量至100 mL 註2。5. 取經(jīng)消化後50.0 mL樣品或適量樣品稀釋至 50.0 mL，置於三角 燒瓶中，參加8 mL混合試劑，混合均勻後亠在1030分鐘內(nèi) 以分光光度計(jì)於波巨 880 nm處讀取吸光度，並由檢量線求得磷 濃度mg P/L 。二正磷酸鹽1. 樣品於分析前可滴參加酚酞指示劑測(cè)試pH值，如水樣呈紅色，則滴加 5 N硫酸溶液至顏色剛好消失。2. 取50.0 mL經(jīng)調(diào)整

9、過(guò)pH之水樣或適量經(jīng)稀釋之水樣 50.0 mL, 置於三角燒瓶中，參加 8 mL 混合試劑，混合均勻後，在 1030分鐘內(nèi)以分光光度計(jì)於波長(zhǎng) 880 nm處讀取吸光度，並由檢量 線求得磷濃度 mg P/L 。三檢量線製備在分光光度計(jì)線性範(fàn)圍內(nèi)，以磷標(biāo)準(zhǔn)溶液I或H配製 一個(gè)空白和至少五種不同濃度的檢量線標(biāo)準(zhǔn)溶液，例如假設(shè)採(cǎi)用1 cm 樣品槽時(shí)，檢量線範(fàn)圍為 0.020.50 mg P/L;假設(shè)採(cǎi)用5 cm樣品槽 時(shí)則為 0.0050.050 mg P/L,再依七、步驟二2.之相同步驟操 作，繪製吸光度與磷濃度 mg P/L之檢量線。八、結(jié)果處理一由樣品測(cè)得吸光度，代入檢量線可求得樣品中磷之濃度

10、mg P/L 再依下式計(jì)算樣品中磷之濃度。A 二 A >FA :樣品中磷之濃度 mg P/L 。A ':由檢量線求得樣品中磷之濃度mg P/L。F:稀釋倍數(shù)。註：分析總磷時(shí)，假設(shè)以高壓滅菌釜消化，則水樣經(jīng)前處理後，樣品濃度已稀釋二倍。二假設(shè)正磷酸鹽的濃度需以 三價(jià)磷酸根之方式表示時(shí)PO43- mg/L, 則所求得之磷之濃度mg P/L尚需乘以3.07。PO43 - mg/L= PO43 - mg P /L 3.07九、品質(zhì)管制一檢量線：檢量線之相關(guān)係數(shù)應(yīng)大於或等於 0.99&檢量線製作完 成應(yīng)即以第二來(lái)源標(biāo)準(zhǔn)品配製接近檢量線中點(diǎn)濃度之標(biāo)準(zhǔn)品確認(rèn)，其相對(duì)誤差值應(yīng)在 

11、7;5%以?xún)?nèi)。二檢量線杳核：每 10 個(gè)樣品及每批次分析結(jié)束時(shí)，執(zhí)行一次檢 量線杳核，以檢量線中間濃度附近的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行，其相對(duì)誤 差值應(yīng)在±5%以?xún)?nèi)。三空白分析：每10個(gè)樣品或每批次樣品至少執(zhí)行一次空白樣品 分析，其空白分析值應(yīng)小於方法偵測(cè)極限之二倍。四重複分析：每10_個(gè)樣品或每批次樣品至少執(zhí)行一次重覆分析，其相對(duì)差異百分比應(yīng)在 20%以?xún)?nèi)。五查核樣品分析：每10個(gè)或每一批次之樣品至少執(zhí)行一個(gè)查核 樣品分析，其回收率應(yīng)在 80120%範(fàn)圍內(nèi)。六添加標(biāo)準(zhǔn)品分析：每10_個(gè)樣品或每批次樣品至少執(zhí)行一次添 加標(biāo)準(zhǔn)品分析，其回收率應(yīng)在 80120%範(fàn)圍內(nèi)。十、精密度與準(zhǔn)確度一國(guó)內(nèi)某單一實(shí)

12、驗(yàn)室進(jìn)行試劑水添加標(biāo)準(zhǔn)品分析結(jié)果表一。二於19個(gè)實(shí)驗(yàn)室中33個(gè)分析人員檢測(cè)含有精確添加有機(jī)磷 分析總磷之自然水體樣品，其分析結(jié)果如表二。資料來(lái)源：參考資料二三於 16 個(gè)實(shí)驗(yàn)室中 26 個(gè)分析人員檢測(cè)含有精確添加正磷酸鹽 分 析正磷酸鹽之自然水體樣品，其分析結(jié)果如表三。 資料來(lái)源： 參考資料二。十一、參考資料一American Public Health Association, American Water Work Association & Water Pollution Control Federation, Standard Methods for the Exam in a

13、ti on of Water and Wastewater, 21th ed, Method 4500 - P A,B, pp4 - 146 4 - 151, and Method 4500 - P E, pp4 - 153 4-55, APHA, Washington, D.C. USA, 2005.二U.S. En viro nmen tal Protectio n Age ncy. En vir onmen tal Mon itori ng and Support Laboratory. Methods for Chemical An alysis of Water and Wastew

14、ater, Method 365.2, 365.3. Cincinnati, Ohio. USA, 1983.註1：假設(shè)水樣含砷或高濃度鐵，參加5 mL亞硫酸氫鈉溶液，混合後置於95 C水浴中30分鐘保持水樣溫度為 95C, 20分鐘冷卻之。註2:水樣中和後如呈混濁，添加 23滴11 N硫酸溶液混合均勻，視需 要過(guò)濾後再行稀釋。註3:廢液分類(lèi)處理原則-本檢驗(yàn)廢液依一般無(wú)機(jī)廢液處理。表一國(guó)內(nèi)某單一實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行試劑水添加標(biāo)準(zhǔn)品分析結(jié)果水樣基質(zhì)添加濃度平均測(cè)定值測(cè)定次數(shù)回收率相對(duì)誤差%試劑水0.0050.005171020.03試劑水0.010.00917910.09試劑水0.030.031471050.06單位：mg P/L ,採(cǎi)用5 cm樣品槽表二 添加濃度有機(jī)磷分析總磷之自然水體樣品分析結(jié)果添加總磷濃度mg P/L精密度之標(biāo)準(zhǔn)偏差mg P/L準(zhǔn)確度偏差Bias%偏差(Bias) mg P/L0.1100.033+3.09+0.0030.1320.051+ 11.99+0.0160.7720.130+2.96+0.0230.8820.12