酶標(biāo)儀軟件操作步驟

1、酶標(biāo)儀軟件操作步驟一. 軟件運行前的連接酶標(biāo)儀插上電源，和電腦連接好后，打開電腦和酶標(biāo)儀開關(guān)，酶標(biāo)儀至少穩(wěn)定15min后開始讀數(shù)，效果比較好。注意，當(dāng)酶標(biāo)儀處于power on 的狀態(tài)時，不要手動打開酶標(biāo)板室和比色皿室的門，以免紫外輻射的傷害或者儀器的損傷。二軟件的運行1.打開桌面快捷方式SkanIt RE for MSS 2.4.2運行軟件，出現(xiàn)Log on To SkanIt software的界面。2.use name默認(rèn)為“admin”, password為空3.點OK進入SkanIt software 2.4.2界面，New session-新建任務(wù)程序，Open session-打

2、開已有程序。4.在界面上方的setting中選擇Instrument，出現(xiàn)Instrument setting的界面，在Instrument中選中Multiskan spectrum on COM,Themo Electron。點擊右側(cè)的setup，在serial number中輸入1500-850，然后點擊OK。再點擊Default instrument右邊的connect，即可設(shè)定好連接。然后點擊close關(guān)閉窗口。三New session操作1新建任務(wù)程序：點擊new session進入protocol options界面，在session name中輸入新的程序名稱點擊next進入pl

3、ate layout options界面，在select plate template中選擇所需模板類型（一般96孔板選擇use default，比色皿選擇cuvette，其他的可以選擇相應(yīng)的類型）輸入plate layout name(系統(tǒng)默認(rèn)的與session name相同)點擊next進入Definition done界面，在select location中選擇任務(wù)程序所要保存的目的文件夾（該界面可進行新建，重命名及刪除文件夾操作）點擊finish完成新建，進入SkanIt software 2.4.2程序操作主界面（主要有三大塊： platelayout用于模板區(qū)域選擇，protoco

4、l用于程序編輯，results用于數(shù)據(jù)處理）。2.plate layout對模板區(qū)域進行選取點擊wizard進入選取模板區(qū)域操作界面fill wizard（任務(wù)類型type有： blank空白，calibrator標(biāo)準(zhǔn)蛋白，control對照，empty空白，unkown一般為樣品）。 在右邊模板中選取開始點位置，即紅圓點所在位置。選取方向，在Filling order中可通過箭頭設(shè)定。對于blank，在No.of replicates中填寫好重復(fù)數(shù)，選擇好開始位點和方向，點擊Add可完成。對于calibrator，在No.of calibrators 中填寫標(biāo)準(zhǔn)蛋白的個數(shù)，在No.of re

5、plicates中填寫好重復(fù)數(shù)，選擇好開始位點和方向。如有濃度梯度，可選擇Generate series進行設(shè)置。例如，取7個濃度蛋白做標(biāo)準(zhǔn)曲線，稀釋倍數(shù)分別為20，40，80，160，320，640，1320，每個濃度重復(fù)兩次，則在No.of calibrators 中填寫7，在No.of replicates中填寫2，選擇好選擇好開始位點和方向。然后選中Generate series，出現(xiàn)conventions的界面，在Initial value中填寫20，在operators中選擇Multiply，step by中填寫2，點擊ok。對于control，操作基本和calibrators相似

6、。對于Empty操作基本和blank相似。對于unknown，填寫好No.of replicates，No.of unknowns并選擇好開始位點和方向，點擊Add即可完成。第一塊板填滿后，有時會自動進入第二塊板的編輯，注意看Fill wizard的模板下方的current plate，如果顯示為2/2,則可以直接關(guān)掉窗口，模板區(qū)域即可編好。標(biāo)注：對于單一型任務(wù)可先選取全模板【即在No.of unkown選項中設(shè)為模板最大孔數(shù)】，然后對不要的區(qū)域進行刪除。對于非blank和empty型任務(wù)，若有濃度差，可勾選generate series,然后進行設(shè)定：series為有規(guī)則的濃度差，multi

7、ple values為不規(guī)則的濃度差。有規(guī)則的可通過運算公式，系統(tǒng)直接算出，無規(guī)則的通過鍵盤輸入，點擊add進行添加。3.編輯程序選好所用模板區(qū)域后，點擊protocol進入程序編輯界面。在protocol properties所屬框內(nèi)的execution order選項中選中數(shù)據(jù)讀取路徑（共有四種，第一種一般為常用路徑，一次讀四個孔）。在Settle delay選項中設(shè)定讀數(shù)時間間隔。一般比色皿不需要讀書時間間隔，設(shè)置為零即可，對于測量板而言，由于板在移動過程中液體表面共振波的影響，需要穩(wěn)定一段時間，一般設(shè)置為5s in a 6-well plate，300ms in a 96-well p

8、late，20ms in a 384-well plate。在steps所屬框內(nèi)空白處或選中程序單擊鼠標(biāo)右鍵得到應(yīng)用程序子菜單。在子菜單中選取你所要運行的程序（如常用的程序有photometric,photometric-scanning,Incubate和shake等），并在該程序的選項中設(shè)定你所需的參數(shù)。一般測蛋白含量選擇photometric，在wavelength中設(shè)置好波長即可。所有程序編寫好后，在session中點擊save保存好模板程序，不保存將無法運行上面所設(shè)的模板程序。4測讀數(shù)據(jù)在Execution所屬框內(nèi)點擊connect鏈接機器，鏈接過程中會出現(xiàn)機器狀態(tài)列表窗口，無異常后

9、點Close關(guān)閉。在Execution所屬框內(nèi)點擊run plate out彈出酶標(biāo)板載板，把酶標(biāo)板底部擦干后放上去后，確保平穩(wěn)后點擊run plate in，等酶標(biāo)板進去。在Execution所屬框內(nèi)點擊Execute session按鈕運行所設(shè)程序，彈出Run name窗口，點擊Ok確認(rèn)運行。接著會出現(xiàn)讀數(shù)窗口，不要關(guān)閉讀數(shù)窗口，讀數(shù)完畢后窗口會自動消失，并彈出酶標(biāo)板載板。注：以前，無法進行人工讀板，這是因為機器序列號的設(shè)置不對，要仔細(xì)查看機器上的機器序列號，將正確的序列號填入操作軟件中的設(shè)置中。5數(shù)據(jù)分析及保存儀器讀數(shù)完畢后，系統(tǒng)自動進入Results操作界面，在Result界面所屬框中

10、，可對所得數(shù)據(jù)進行分析。在Result所屬框中，單擊要分析數(shù)據(jù)的程序，如測蛋白一般選擇的photometric，點鼠標(biāo)右鍵得到數(shù)據(jù)分析方法主菜單。選擇要分析的方法，測蛋白選擇Quantitative Curve Fit，出現(xiàn)Parameters，Graph，Table，List可以點擊查看結(jié)果。如果需要標(biāo)準(zhǔn)曲線，則在Graph的曲線圖中單擊右鍵選擇Toolbar，圖標(biāo)上方會出現(xiàn)一系列圖標(biāo)，點擊Copy to clipboard選擇As a Bitmap，將其粘貼在新建word文檔中并保存。點擊Result左側(cè)圖標(biāo)框中選擇Export，在Parameters中的select items to r

11、eport中選擇要保存的內(nèi)容，一般選擇layout，Photometric， Quantitative Curve Fit，然后點擊Add，在；右邊的Report items中出現(xiàn)所選擇的內(nèi)容。在After execution中選中Save to file，通過右下方的Browse選擇要保存的文件。注意此次操作可能沒有保存到目的文件夾。必須進行以下步驟。點擊上方的Report可看見結(jié)果，點擊Save選擇所要保存到的目的文件夾。并檢查是否所有要保存的數(shù)據(jù)都已經(jīng)保存到相應(yīng)文件夾中。三Open session操作 若要運行或查看已有的程序，在登錄界面點擊Open session,打開程序所在文件夾，單擊所要運行或查看的程序（提示：