關(guān)于毒扁豆堿對老年癡呆大鼠的空間記憶能力的影響

1、關(guān)于毒扁豆堿對老年癡呆大鼠的空間記憶能力的影響    【摘要】  目的：探討毒扁豆堿對老年癡呆大鼠的空間記憶能力的影響，為老年癡呆病人的臨床治療提供新的治療思路。方法：健康成年雄性大鼠48只，隨機(jī)分為癡呆組、毒扁豆堿對照組、毒扁豆堿治療組、空白對照組。運(yùn)用大鼠穹窿海馬切斷術(shù)建立癡呆模型，術(shù)后第8天開始腹腔注射毒扁豆堿，連續(xù)1周，然后各組進(jìn)行Morris水迷宮測試。結(jié)果：空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，大鼠各象限游泳距離占總距離百分率和跨越各象限平臺相應(yīng)位置次數(shù)占總次數(shù)百分率，毒扁豆堿治療組均有明顯提高()。定位航行實(shí)驗(yàn)提示毒扁豆堿處理后的癡呆大

2、鼠尋找水下平臺時(shí)間明顯縮短。結(jié)論：癡呆大鼠經(jīng)過毒扁豆堿治療后，空間記憶能力出現(xiàn)明顯好轉(zhuǎn)，提示毒扁豆堿對癡呆大鼠具有一定的改善作用。 Nature is the glass reflecting truth.  【關(guān)鍵詞】  毒扁豆堿; 老年癡呆; 大鼠; Morris水迷宮隨著全世界步入老齡化社會(huì)，老年癡呆的發(fā)病率目前呈現(xiàn)進(jìn)行性遞增的趨勢。由于此病影響患者的認(rèn)知功能、記憶功能、語言功能、視空間功能、社會(huì)生活能力、個(gè)人生活自理能力和情感人格等，給家庭和社會(huì)帶來很大負(fù)擔(dān)。因此，WHO已將老年癡呆癥定為21世紀(jì)5大重點(diǎn)疾病之一1。

3、尋找治療老年癡呆癥的有效藥物，成為世界醫(yī)學(xué)界的研究熱點(diǎn)之一。研究指出2，在老年癡呆的早期，膽堿功能缺乏的癥狀早于其它任何癥狀，AD特征之一的神經(jīng)元凋亡也主要發(fā)生在膽堿神經(jīng)元(醫(yī)藥學(xué)/臨床醫(yī)學(xué)論文 )。從治療角度看，美國FDA批準(zhǔn)上市治療AD的藥物均為膽堿酯酶抑制劑3，因而研究和開發(fā)新的具有更好療效的膽堿酯酶抑制劑是當(dāng)前治療和預(yù)防老年癡呆的有效手段。毒扁豆堿是從非洲的毒扁豆種子中提出的生物堿，是一種可逆性膽酯酶抑制劑，但有關(guān)毒扁豆堿對老年癡呆大鼠的空間記憶能力的研究卻鮮有報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)擬對此展開研究。1 材料和方法1.1 動(dòng)物及分組選用成年雄性SD大鼠200220g(購至武漢大

4、學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)。動(dòng)物隨機(jī)分為4組：老年癡呆組、毒扁豆堿組、毒扁豆堿治療組以及空白對照組。The best of friends must part.  1.2 試劑論文分為專題型、論辯型、綜述型和綜合型四大類  毒扁豆堿購置美國sigma公司。Manners make the man.  1.3 模型制備Politeness costs nothing and gains everything.  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無巴比妥鈉(40 mg/kg)常規(guī)麻醉，大鼠立體定位儀定位，無菌操作下沿顱頂中線作長2 cm切口。于前囟后2

5、.0 mm，中線右側(cè)旁0.5 mm處用牙科鉆打開右側(cè)顱骨，仔細(xì)剝開硬腦膜暴露大腦皮質(zhì)， 按照大鼠腦立體定位圖譜4，用特制的寬2 mm刀片于前囟后2 mm， 中線右側(cè)1 mm處置刀于腦表面，然后降刀4.1 mm，并向外向內(nèi)各移動(dòng)1和0.5 mm。最后再降刀 1 mm外移 1.5 mm， 此時(shí)上下抽動(dòng)刀片15次， 依次切斷(單側(cè)) 扣帶回、 胼胝體干、背側(cè)穹窿海馬傘，制作AD動(dòng)物模型, 于術(shù)后第 8天開始腹腔注

6、射注射毒扁豆堿 100 ug/kg，每天3次，連續(xù) 給藥 3 d后進(jìn)行Morris水迷宮行為訓(xùn)練。One ploughs, another sow; who will reap  1.4 Morris 水迷宮行為能力測試定位航行實(shí)驗(yàn) 水池分為 I、II 、III 、IV4個(gè)象限。在第3象限放置平臺，浸潤在水下約1cm高度。實(shí)驗(yàn)前 1 d 將大鼠放入水池( 不含平臺) 自由游泳2 min熟悉水迷宮環(huán)境，試驗(yàn)歷時(shí)5

7、60;d ，每天分上午，下午兩個(gè)時(shí)間段，每段分別訓(xùn)練4次，每個(gè)時(shí)間段分別從池壁4個(gè)起始點(diǎn)將大鼠面向池壁放入水池， 記錄每次找到平臺的時(shí)間 (逃避潛伏期，escape latency )和游泳路徑。如大鼠在120 s 內(nèi)找不到平臺，由實(shí)驗(yàn)者將其引上平臺，潛伏期記為120 s，每次間隔4 min讓大鼠休息，再行下次試驗(yàn)。Good counsel never comes too late.  1.5 空間探索實(shí)驗(yàn)  在第 5天下午第 5次訓(xùn)練時(shí)拆除水下平臺，&#

8、160;然后任選一個(gè)入水點(diǎn)將大 鼠面向池壁放入水中， 測其120 s內(nèi)在各象限的游泳距離及占總距離的百分率和120s內(nèi)跨越各象限平臺相應(yīng)位置次數(shù)及占總次數(shù)的百分率，并記錄大鼠120s 內(nèi)搜索平臺的路線圖。1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS13.0 進(jìn)行兩兩比較及t檢驗(yàn)。2 結(jié)果論文包括學(xué)年論文、畢業(yè)論文、學(xué)位論文、科技論文、成果論文等.  2.1 大鼠行為能力Early mistakes are the seeds of future trouble.  各組大鼠在Morris水迷宮中定向航行試驗(yàn)結(jié)

9、果見圖1，空白對照組和毒扁豆堿陰性對照組的大鼠平均逃避潛伏期逐漸縮短，而癡呆組的大鼠則喪失學(xué)習(xí)記憶能力，平均逃避潛伏期無改變。而給予毒扁豆堿的癡呆大鼠，平均逃避潛伏期時(shí)間明顯縮短(P<0.05)。說明經(jīng)過毒扁豆堿治療的癡呆大鼠，空間記憶學(xué)習(xí)能力明顯提高。圖1 各組大鼠尋找平臺潛伏期對比2.2 空間探索試驗(yàn)拆去水下平臺后，以原站臺象限(III象限)的活動(dòng)時(shí)間和穿梭次數(shù)為指標(biāo)，模型組在第3象限的活動(dòng)時(shí)間顯著縮短，穿越站臺次數(shù)明顯降低。而給予毒扁豆堿治療的癡呆大鼠，則在第3象限的活動(dòng)時(shí)間有明顯增加，穿越站臺次數(shù)也有顯著的增加，說明毒扁豆堿可明顯改善癡呆大鼠的行為能力，見表1

10、。表1 各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物第3象限活動(dòng)時(shí)間與穿越平臺次數(shù)論文包括學(xué)年論文、畢業(yè)論文、學(xué)位論文、科技論文、成果論文等.  3 討論老年癡呆的患病率目前已升至威脅老年人生命的第3位。中樞尤其是海馬等與學(xué)習(xí)和記憶相關(guān)的區(qū)域中，神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿發(fā)現(xiàn)是參與學(xué)習(xí)，記憶功能重要的神經(jīng)遞質(zhì)。 研究發(fā)現(xiàn)：老年癡呆患者大腦內(nèi)的乙酰膽堿的活性明顯降低，運(yùn)用可透過血腦屏障的膽堿酯酶抑制劑可增加腦內(nèi)乙酰膽堿的含量，增強(qiáng)突觸間的傳遞，改善患者的學(xué)習(xí)和記憶能力，因而尋找有效的膽堿酯酶抑制劑對老年癡呆的治療具有重要的研究價(jià)值5。毒扁豆堿可以抑制體內(nèi)膽堿酯酶的活力，是一種副交感神經(jīng)興奮劑，可顯

11、著增加大腦內(nèi)部的乙酰膽堿水平，因而理論上可改善老年癡呆的癥狀，而本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果提示，毒扁豆堿可明顯的改善老年癡呆大鼠的空間記憶學(xué)習(xí)能力。研究指出，嗎啡能夠抑制大鼠對水迷宮任務(wù)的回憶;這種抑制作用可能與嗎啡抑制中樞膽堿能遞質(zhì)系統(tǒng)功能有關(guān),毒扁豆堿通過加強(qiáng)膽堿能遞質(zhì)系統(tǒng)的活動(dòng),從而對抗嗎啡誘導(dǎo)而在嗎啡所致的記憶喪失，說明毒扁豆堿對學(xué)習(xí)和記憶的影響遠(yuǎn)超過我們的想象。綜上所述，毒扁豆堿給予后可顯著的增加老年癡呆大鼠的空間學(xué)習(xí)能力和記憶能力，其機(jī)制可能是通過增加大腦中樞神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的含量而得以實(shí)現(xiàn)的，但具體的機(jī)制如何，仍有待進(jìn)一步的研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1Musiai 

12、;A, Baida M, Malawska. Recent developments in eholinesterases inhibitors for Alzheimer's disease treatment. Current Medicinal Chemistry, 2007, 14: 26542679.2 Kalesnykas G，Puolivali J， Si

13、rvio J， et al. Cholinergic neurons in the basal forebrain of aged female mice. Brain Res, 2004, 1022.3 Jacobsel1 JS. Alzheimer's disease: an overview of current and emerging therapeutic strategies. Curt Top