參麻通絡膠囊的質量控制標準研究

1、參麻通絡膠囊的質量控制標準研究    【關鍵詞】  黃芪；當歸；赤芍藥；白芍藥；天麻；質量；評價標準    參麻通絡膠囊（批準文號：冀藥制字Z20051611）具有益氣活血、化瘀通絡、滋補肝腎功效。臨床上用于治療氣血兩虛、肝腎不足、瘀血阻絡所致的頭暈健忘、肢體不遂，多見于腦梗死及其后遺癥、腦動脈硬化、老年性癡呆見上述證候者。由黃芪、丹參、天麻、半夏、赤芍藥、當歸、桃仁、紅花、雞血藤、竹茹、石菖蒲、白僵蠶、枸杞子、郁金、白芍藥、牛膝16味藥材組成。當歸為該制劑主藥之一，其中阿魏酸是當歸的主要有效成

2、分。現(xiàn)代藥理研究表明，當歸能增加心肌血液供給，降低心肌耗氧量，降低血管阻力，增加循環(huán)血流量，并有抗心律失常，抑制血小板聚集作用 。測定處方中的有效成分阿魏酸的含量對臨床合理用藥具有指導意義。1  材料與方法1.1  儀器與試藥高效液相色譜儀（series III 泵，Model 500檢測器，N2000工作站）；1/10萬分析天平（德國METTLER  TOLEDO公司）中藥材由河北省唐山市豐南區(qū)中醫(yī)院制劑室提供，阿魏酸對照品（中國生物制品檢定所，批號：0773-9910），黃芪甲苷對照品（中國

3、生物制品檢定所，批號0781-200311），當歸對照藥材（中國生物制品檢定所，批號120511-200405），芍藥苷對照品（中國生物制品檢定所，批號110736-200526），天麻對照藥材（中國生物制品檢定所，批號0944-200006），甲醇色譜純（天津四友試劑廠），磷酸、三氯甲烷、甲醇、乙醚、乙醇、正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、甲酸均為分析純，水是純化水，硅膠G薄層板（青島海洋化工廠）。1.2  方法取本品5 g，加甲醇50 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30 mL使溶解，用水飽和的正丁醇提取2 

4、次，每次30 mL，合并正丁醇液；加氨試液三倍量，搖勻，放置分層，取正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法1試驗，吸取供試品溶液15 L，對照品溶液2 L，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷甲醇水（1372）的下層溶液為展開劑， 低溫展開，取出，晾干，噴以10硫酸乙醇溶液，在105加熱至斑點顯色清晰。取本品5 g，加乙醚30 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1 mL使溶解

5、，作為供試品溶液，另取當歸對照藥材1 g，加水60 mL，煎煮40 min，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醚振搖提取2次，每次30 mL，乙醚液低溫蒸干，殘渣加乙醇1 mL使溶解，制成對照藥材溶液。照薄層色譜法1試驗，吸取上述2種溶液各10 L，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷乙酸乙酯（91）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。取本品5 g，加乙醇50 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水15 mL使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次

6、15 mL，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次10 mL，棄去水洗液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇0.5 mL使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品，加無水乙醇制成每mL含2 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法1試驗，吸取供試品溶液15 L，對照品溶液3 L，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷乙酸乙酯甲醇甲酸(405100.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105加熱至斑點顯色清晰。取本品5 g，加水飽和的正丁醇50 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘

7、渣加水2 mL使溶解，通過D101大孔樹脂柱（內徑1 cm，柱高16 cm），用10乙醇25 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇0.5 mL使溶解，作為供試品溶液。另取天麻對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法1試驗，分別吸取上述2種溶液各5 L，分別點于同一以羧甲基纖維鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷乙酸乙酯甲醇甲酸（8130.1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10磷鉬酸乙醇溶液，在105加熱至斑點顯色清晰。阿魏酸對照品儲備液：精密稱取阿魏酸對照品適量，加甲醇制成每mL含阿魏酸5 g的溶液

8、，即得。供試品溶液的配制：取參麻通絡膠囊10粒的內容物，研細，取1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇15 mL，密塞，稱定質量，超聲處理（功率160 W，頻率50 kHz）60 min，放冷，再稱定質量，用甲醇補足減失的質量，搖勻，用0.45 m微孔濾膜過濾即得。色譜柱為Kromasil C18分析柱（4.6 mm×250 mm，5 m），甲醇0.1磷酸溶液（3070）為流動相，流速為1.0 mL/min，檢測波長為320 nm。進樣量為20 L

9、。分別精密吸取對照品儲備液，1、2、4、6、8、10 mL至量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，和原儲備液，分別吸取上述溶液20 L進樣，在上述色譜條件下進行高效液相色譜法(HPLC)分析。在上述色譜條件下，取濃度為5.1 gmL的對照品溶液，連續(xù)進樣5次，測相對標準偏差(RSD)值。取制備好的供試品溶液，分別于0、2、4、8、12、24 h分別進樣20 L，測阿魏酸的RSD值。精密稱取已測含量的供試品0.5 g，5份，分別至具塞錐形瓶中，分別精密加入已配制好的濃度為5.1 gmL的對照品溶液8 mL，按2 

10、60;結  果2.1  薄層鑒別供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點，而陰性對照無干擾。見圖1（封3）。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，顯相同顏色的熒光斑點，而陰性對照無干擾。見圖2（封3）。供試品色譜中，在與對照品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點，而陰性對照無干擾。見圖3（封3）。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，而陰性對照無干擾。見圖4（封3）。2.2  含量測定以峰面積Y對濃度X回歸分析，得回歸方程為：y=3652813x-3013.33，r=0.9998。見圖5。

11、0;   實驗結果表明，阿魏酸濃度在0.01020.1020 g/mL范圍內呈良好的線性關系。測得RSD為0.67%。見表1，圖6。表1  精密度試驗結果（略）測得阿魏酸的RSD值為0.82，結果表明樣品溶液在24 h內含量穩(wěn)定。見表2。表2  穩(wěn)定性試驗結果（略）測得阿魏酸的平均含量為30 g/粒，RSD值為0.86。見表3。表3  重復性試驗結果（略）結果平均回收率為100.05，RSD為1.23。見表4。表4  加樣回收率試驗結果（略）測得含量見表5。表5  樣品測定含量（略）3  討  論    本