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1、白羽肉鴨高致病性禽流感疫苗免疫效果研究衛(wèi)龍興俞財(cái)榮王福泉戴蓮群(上海市奉賢區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,上海201400)摘要對(duì)白羽肉鴨高致病性禽流感疫苗免疫效果進(jìn)行了試驗(yàn)研究,結(jié)果表明,白羽肉鴨如能按照免疫程序規(guī)范實(shí)施免疫操作,能夠獲得較好的免疫效果,首免劑量以0.50.8mL為宜。關(guān)鍵詞白羽肉鴨;高致病性禽流感疫苗;免疫效果中圖分類號(hào)S834文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1007-5739(2009)21-0263-02ImmuneEfftectonWhiteMeat-typeDuckagainstHighlyPathogenicAvianInfluenzaWEILong-xingYUCai-rongWA

2、NGFu-quanDAILian-qun(FengxianDistrictCenterforAnimalDiseasePreventionandControl,Shanghai201400)AbstractInordercostudytheimmuneefiectonwhitemeat-typeduckagainstHighlyPathogenicAvianInfluenza,experimentswerecarriedout.TheresultsshowsthatifimmunizationwasoperatedfollowtheimmunecriterionofHPAIvaccine,th

3、ewhitemeat-typeduckwasabletobebetterimmunized.Thebestfirstimmunizationdosewas0.5S.8niL.Keywordswhitemeat-typeduck;HighlyPathogenicAvianInfluenza(HPAI);immuneeffect禽流感是由禽流感病毒引起的一種急性和高度接觸性傳染病,幾乎所有的野生和家養(yǎng)禽類都能感染該病。自2004年亞洲高致病性禽流感暴發(fā)以來(lái),該病已蔓延到世界上的許多國(guó)家和地區(qū),給養(yǎng)禽業(yè)造成了毀滅性的打擊,并已致數(shù)百人感染死亡。我國(guó)目前防控高致病性禽流感的主要措施仍依賴對(duì)該病的免疫預(yù)

4、防,并已在禽類上取得了確實(shí)的免疫效果,同時(shí)我國(guó)已將高致病性禽流感列為強(qiáng)制免疫的動(dòng)物疫病名錄,為禽流感的防控提供了保障。奉賢區(qū)是上海地區(qū)水禽飼養(yǎng)量較大的一個(gè)區(qū),特別是在奉賢區(qū)的東部地區(qū),白羽肉鴨的飼養(yǎng)量更是非常可觀。但實(shí)際生產(chǎn)中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)白羽肉鴨首免高致病性禽流感疫苗后免疫效果較差、免疫抗體水平較低的現(xiàn)象,這給高致病性禽流感的綜合防控帶來(lái)了隱患,也給基層獸醫(yī)站對(duì)高致病性禽流感免疫工作的宣傳和推動(dòng)帶來(lái)了負(fù)面影響。為弄清目前白羽肉鴨免疫高致病性禽流感疫苗后低免疫反應(yīng)的癥結(jié)所在,筆者在相關(guān)部門的大力協(xié)助下,組織實(shí)施了白羽肉鴨高致病性禽流感免疫效果的試驗(yàn)。1材料與方法1.1試驗(yàn)材料在上海市奉賢區(qū)四團(tuán)鎮(zhèn)隨

5、機(jī)選擇一專業(yè)養(yǎng)殖戶的一棟棚舍作為試驗(yàn)的基地。該專業(yè)養(yǎng)殖戶已有多年養(yǎng)殖白羽肉鴨的經(jīng)驗(yàn),工作責(zé)任心強(qiáng),試驗(yàn)過(guò)程中的日常管理工作由該養(yǎng)殖戶負(fù)責(zé)。由上海市云福種鴨場(chǎng)提供白羽肉鴨苗鴨,2007年6月25日出雛。該批苗鴨的種鴨已經(jīng)過(guò)了3次禽流感H5N1疫苗的免疫,免疫抗體日常檢測(cè)結(jié)果合格。試驗(yàn)用疫苗為重組H5N1禽流感滅活疫苗,來(lái)源于哈爾濱獸醫(yī)研究所,批號(hào)2006348o試驗(yàn)用檢測(cè)試劑為H5N1禽流感血凝抑制試驗(yàn)診斷試劑,來(lái)源于哈爾濱獸醫(yī)研究所,批號(hào)為2007050704o1.2試驗(yàn)方法1.2.1分組。參與試驗(yàn)的白羽肉鴨分別在1日齡和6日齡作者簡(jiǎn)介衛(wèi)龍興(1965-),男,上海人,芮級(jí)獸醫(yī)師,主要從事奶牛

6、結(jié)核、寵物診療及動(dòng)物衣大疫病防控工作。收稿日期2009-09-23時(shí)采集20份血樣檢測(cè)母源抗體,并于6日齡采樣后,將所有試驗(yàn)鴨隨機(jī)分成A、B、C、D、E等5組,每組40羽。1.2.2免疫。試驗(yàn)鴨于11日齡時(shí),每組分別采取20份血樣后,按照A組每羽0.5mL、B組每羽0.5mL、C組每羽0.8mL、I)組每羽l.OmL的劑量,按規(guī)范的操作方法分別對(duì)4個(gè)試驗(yàn)組頸部皮下注射試驗(yàn)用疫苗;E組作為對(duì)照組,不免疫。B組試驗(yàn)鴨于41日齡時(shí),按每羽l.OmL劑量以胸部肌肉注射途徑強(qiáng)化免疫1次,其他3組不做加強(qiáng)免疫。1.2.3采樣。所有參與試裁的5個(gè)組分別在11日齡、16日齡、21日齡、26日齡、31日齡、36

7、日齡、41日齡、46日齡時(shí),每組分別采取20份血樣,分離血清后冷凍保存。46日酸采血后,A、C、D等3組試驗(yàn)結(jié)束。B組和E組分別在51日齡、56日齡、61日齡、66日齡、71日齡時(shí),每組繼續(xù)分別采取血樣20份,分離血清后冷凍保存。71日齡采血后,B組和E組的試驗(yàn)也同時(shí)結(jié)束。1.2.4檢測(cè)。該次試驗(yàn)的所有血清樣品,由上海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)診斷中心采用血凝抑制試驗(yàn)(HI)進(jìn)行檢測(cè)。個(gè)體血凝抑制效價(jià)達(dá)到log25的判定為高致病性禽流感免疫抗體陽(yáng)性。群體免疫抗體陽(yáng)性率達(dá)到70%的判定為群體合格。2結(jié)果與分析2.1各組禽流感一免后抗體陽(yáng)性數(shù)和平均效價(jià)該次試驗(yàn)1日齡和6日齡的各20份血樣檢測(cè)結(jié)果無(wú)

8、陽(yáng)性樣品,血凝抑制平均效價(jià)分別為0.07和0.05,母源抗體較差。各組禽流感一免后免疫抗體(至46日齡)的陽(yáng)性數(shù)見表1和圖1。各組禽流感一免后免疫抗體平均效價(jià)見表2和圖2。由表1、表2和圖1、圖2可知,B組和C組的免疫效果表1各組試驗(yàn)鴨一免后抗體陽(yáng)性數(shù)組別-抗體陽(yáng)性數(shù)份lid16d21d26d31d36d41d46dA034612141612B04679101217C0031113171718D0013111397E00000000組別NBCDElid16<121d26d31d36d41d46d0.701.401.802.204.004.655.854.700.501.202.452.9

9、03.253.653.706.15000.904.204.205.205.806.55000.901.303.154.003.102.200.060.050.080.050000抗體平均效價(jià)組組組組組ABcDE最佳,一免后的抗體陽(yáng)性數(shù)和平均效價(jià)穩(wěn)定上升,至46日齡時(shí),2個(gè)組的陽(yáng)性數(shù)指標(biāo)和平均效價(jià)指標(biāo)均達(dá)到了合格要求;A組和D組的表現(xiàn)則相對(duì)較差,2項(xiàng)指標(biāo)均未能達(dá)到合格要求,且至41日齡時(shí),這2個(gè)組的各項(xiàng)指標(biāo)均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。表2各組禽流感一免抗體平均效價(jià)表2各組禽流感一免抗體平均效價(jià)冬W布丈£姓孵2/1-n_|*-,it_III_k»1116212631364146日齡d圖2各

10、組禽流感一免免疫抗體平均效價(jià)曲線2.2各組禽流感二免抗體檢測(cè)結(jié)果禽流感二免的抗體檢測(cè)結(jié)果見表3。由表3可知,B組在進(jìn)行加強(qiáng)免疫后,抗體水平又有了明顯提高,至二免后10d,20份樣品的免疫抗體全部達(dá)到陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn),平均效價(jià)也(上接第262頁(yè))大型魚類體內(nèi)濃縮,最終富集于人體,嚴(yán)重威脅人類的健康生存,所以應(yīng)該引起人們足夠的重視。應(yīng)采取以下幾點(diǎn)控制措施:一是建立健全法律法規(guī),加強(qiáng)化學(xué)物質(zhì)的管理,禁止使用含有或誘發(fā)環(huán)境激素的化學(xué)農(nóng)藥、漁藥和各類洗滌劑、消毒劑等,實(shí)現(xiàn)無(wú)公害化養(yǎng)殖生產(chǎn)。二是盡快開展水產(chǎn)品中環(huán)境激素的體內(nèi)、體外檢測(cè)方法,以便對(duì)環(huán)境激素活性的相關(guān)化合物進(jìn)行檢測(cè)。目前重組基因酵母應(yīng)用較多,而且易操

11、作,成本低。4參考文獻(xiàn)11郭艷英,段昌群.環(huán)境激素研究進(jìn)展探討皿云南環(huán)境科學(xué),2004,23達(dá)到了8.9的高位,且維持時(shí)間也較長(zhǎng),至該次試驗(yàn)結(jié)束時(shí),該組的所有樣品仍全部達(dá)到陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)。E組(對(duì)照組)的抗體情況未出現(xiàn)較大的波動(dòng),說(shuō)明試驗(yàn)期間該批鴨未受到禽流感野毒干擾。參與該次試驗(yàn)的200羽白羽肉鴨的成活率大于95%。試驗(yàn)期間未發(fā)生任何疾病,每組正常死亡數(shù)小于2羽。表3禽流感二免后抗體檢測(cè)結(jié)果匯總?cè)正gd陽(yáng)性數(shù)份平均效價(jià)B組E蛆B組E組411203.700461706.150512008.900562008.350.03612008.650662008.150712006.8503結(jié)論與討論試驗(yàn)結(jié)果表

12、明,白羽肉鴨對(duì)禽流感疫苗的免疫比較敏感,通過(guò)高致病性禽流感疫苗的二次免疫能得到較高的免疫抗體。由于白羽肉鴨的飼養(yǎng)周期較短,一般50日齡左右已出售,因此很難做到禽流感二免。但在實(shí)踐操作中,如能規(guī)范實(shí)施禽流感一免,也能得到較好的免疫抗體。雖然種鴨的高致病性禽流感的免疫抗體水平達(dá)到了合格的要求,但試驗(yàn)鴨的母源抗體水平則較低,同時(shí)由于白羽肉鴨的生長(zhǎng)速度較快,故建議在今后的生產(chǎn)實(shí)踐中,對(duì)白羽肉鴨可適當(dāng)提早首免日齡。試驗(yàn)中首免0.5mL和0.8mL劑量的2個(gè)組,均得到了較好的免疫抗體,說(shuō)明首免劑量在0.5y).8mL之間是完全合理的。但首免l.OmL劑量的D組的抗體水平反而較差,可能與應(yīng)激和免疫麻痹等因素

13、有關(guān),確切原因有待進(jìn)一步研究。4參考文獻(xiàn)劉勝安,王勇,何建強(qiáng),等.不同免疫方式對(duì)白鴨禽流感免疫效果的研究養(yǎng)禽與禽病防治,2007(9):2-3.2 金大春,肖劍,王躍川,等.H5亞型禽流感疫苗對(duì)蛋鴨免疫效果影響的研究J.中國(guó)畜牧獸醫(yī),2008,35(4):96-98.3 劉宇卓,李銀,張敬峰.H9亞型禽流感病毒NJ01株動(dòng)物回歸試驗(yàn)前后生物學(xué)特性比較U.江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2008(9):102-104.4 占松鶴,劉華.不同家禽紅細(xì)胞懸液檢測(cè)水禽禽流感抗體對(duì)比試驗(yàn)U.畜牧與飼料科學(xué),2009(5):11-13.5 蘭玲,盛卓君.新麗地區(qū)高致病性禽流感的免疫抗體監(jiān)測(cè)中國(guó)動(dòng)物檢疫,2007(2):35

14、-36.6 梅偉,周碧君,溫貴蘭,等.高致病性禽流感抗體水平監(jiān)測(cè)及免疫程序制定J.山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào),2007,1(4):22-25.(3) :12-15.2 吳燕燕,李來(lái)好,刁石強(qiáng),等.環(huán)境激素對(duì)水產(chǎn)品安全性的影響及預(yù)防UL海洋科學(xué),2008,32(1):94-96.3 張鳳君,鄭文彪,方展強(qiáng),等.PCBs對(duì)斑馬魚蜩及肝臟細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響的初步研究U.華南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2001(4):112-114.4 OLSSONPE,WESTERLUNDL,SWEEJ,etalTheeffectsofmaternalexposuretoestrogenandPCBondifferentlifeStagesofzebrafishQ.Ambio,1999,28(1):100106.5 ISLINGERM,WILLIMSKID,VOLKLA,etal.Eflfec

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