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文檔簡介
1、檢測人體血清中的蛋白質(zhì)組分介紹利用毛細管電泳法可檢測人體血清中相對的白蛋白和球蛋白的含量。測量方法毛細管電泳法檢測人體血清中白蛋白和球蛋白的含量是基于這些物質(zhì)在電場中因電泳淌度的不同實現(xiàn)有差別的遷移和分離。定性和定量分析蛋白質(zhì)是通過直接測定該物質(zhì)在215-220 nm區(qū)域內(nèi)的紫外吸收。血漿中蛋白質(zhì)組分的參考值在血清中蛋白質(zhì)在總量中所占百分比的參考值列于下表。組分占總蛋白質(zhì)含量,% -球蛋白( -Gl) -球蛋白( - Gl)2 -球蛋白( 2 - Gl)1 -球蛋白( 1 - Gl)白蛋白( Alb )毛細管電泳的優(yōu)點與其它方法相比,測定血清中蛋白質(zhì)所使用的電泳和醋酸纖維素和瓊脂糖凝膠,毛細管
2、電泳有幾個優(yōu)點: l 沒有特別的樣品制備l 實時檢測l 易于使用l 定量測定l 低的成本分析設(shè)備與試劑以下設(shè)備和試劑在測量中被使用:l CAPEL-105毛細管電泳儀l 蒸餾水l 白蛋白l 氫氧化鈉,超級純l 硫酸,超級純l 四硼酸鈉,超級純l 十二烷基硫酸鈉(SDS),超級純在WINDOWS98/ME/NT/2000/XP系統(tǒng)下安裝采集和處理色譜數(shù)據(jù)的Chrom&Spec軟件包可實現(xiàn)對數(shù)據(jù)的采集、收集、處理和輸出。前處理步驟前處理步驟包括:取樣和樣品準備,毛細管調(diào)試,輔助和校準溶液的準備,CAPEL毛細管電泳儀的校正。測量步驟樣品收集樣品(靜脈血)的收集必需按照臨床要求。執(zhí)行標準條例獲得血清。樣品準備分析前,血清必需用蒸餾水稀釋(稀釋比 50:1),徹底攪拌并離心。毛細管的調(diào)試 每次清洗毛細管10分鐘。依次用濃硫酸,蒸餾水、氫氧化鈉(1 mol/l),蒸餾水,緩沖液沖洗。測量采用毛細管電泳法在CAPEL -105毛細管電泳儀上使用日常慣例,分析預備溶液。數(shù)據(jù)處理Chrom&Spec軟件輸出一份白蛋白和球蛋白的含量(%)報告。實例分析樣品: 人體血清(正常)緩沖劑:10 mM硼酸,5 mM SDS,pH 9.2毛細管:LEFF/LTOTAL 50/60 cm
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