注射用鹽酸克林霉素方法學(xué)研究原始記錄

1、方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱系統(tǒng)性適用性試驗(yàn)檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇(210:300)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程對(duì)照品來源：中國(guó)藥品生物制品檢定所；含量：86.0%；批號(hào)：130422-200705精密稱取克林霉素對(duì)照品W對(duì)照 mg，置于10ml容量瓶中，用流動(dòng)相定容至刻度，即得對(duì)照品溶液，作為系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，取10

2、ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，理論板數(shù)按克林霉素峰計(jì)算，應(yīng)不低于1300。試驗(yàn)結(jié)果結(jié)果：方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱含量線性關(guān)系試驗(yàn)檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱： C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇(210:300)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程對(duì)照品來源：中國(guó)藥品生物制品檢定所；含量：86.0%；批號(hào)：130422-200705精密稱取克林霉素標(biāo)準(zhǔn)品W m

3、g，置于50ml容量瓶中，用流動(dòng)相定溶至刻度，制成每1 ml含克林霉素4 mg的溶液，即得樣品溶液，精密稱取樣品溶液置于不同量瓶中，用流動(dòng)相稀釋并分別制成濃度1.2mg/ml、1.6mg/ml、2.0mg/ml、2.4mg/ml、2.8mg/ml的樣品溶液，分別取10l注入液相色譜儀，以濃度為橫坐標(biāo) x，以峰面積為縱坐標(biāo)Y，得回歸方程和相關(guān)系數(shù)；見附圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果濃度(mg/ml)峰面積1.21.62.02.42.8回歸方程R2方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱5%對(duì)照品線性關(guān)系試驗(yàn)檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫

4、1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇(210:300)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程對(duì)照品來源：中國(guó)藥品生物制品檢定所；含量：86.0%；批號(hào)：130422-200705精密稱取克林霉素標(biāo)準(zhǔn)品W樣 mg,置于50ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1 ml中約含克林霉素2 mg的溶液，即得樣品溶液，精密稱取樣品溶液置于不同量瓶中，用流動(dòng)相稀釋并分別制成濃度0.15mg/ml、0.20mg/ml、0.25mg/ml、0.30mg/ml、0.35m

5、g/ml的樣品溶液，分別取10l注入液相色譜儀，以濃度為橫坐標(biāo) x，以峰面積為縱坐標(biāo)Y，得回歸方程和相關(guān)系數(shù)；見附圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果濃度(mg/ml)峰面積0.150.200.250.300.35回歸方程R2方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱含量重復(fù)性試驗(yàn)檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇(210:300)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程對(duì)照品

6、來源：中國(guó)藥品生物制品檢定所；含量：86.0%；批號(hào)：130422-200705精密稱取克林霉素標(biāo)準(zhǔn)品 mg置于10ml容量瓶中,加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1 ml中約含克林霉素2 mg的溶液，A對(duì)主峰面積 。精密稱?。ㄅ?hào)： ）樣 mg，樣 mg、樣 mg、樣 mg、樣 、樣 mg；分別置25ml的容量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得作為含量樣品溶液。上述溶液取10ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計(jì)算含量RSD%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果樣品主峰面積含量（%）RSD（%）A樣1A樣2A樣3A樣4A樣5A樣6方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱有關(guān)物質(zhì)總雜重復(fù)性試驗(yàn)

7、檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇(210:300)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程對(duì)照品來源：中國(guó)藥品生物制品檢定所；含量：86.0%；批號(hào)：130422-200705精密稱取克林霉素標(biāo)準(zhǔn)品 mg置于100ml容量瓶中,加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1 ml中約含克林霉素0.25 mg的溶液。A對(duì)主峰面積 。精密稱?。ㄅ?hào)： ）樣 mg，樣 mg樣 mg樣 樣 、樣 mg；

8、分別置50ml的容量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得作為含量樣品溶液。上述溶液取10ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計(jì)算總雜RSD(%)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果樣品總雜總雜(%)平均總雜(%)RSD(%)A樣1A樣2A樣3A樣4A樣5A樣6方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱進(jìn)樣精密度試驗(yàn)檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇(210:300)為流動(dòng)相；檢測(cè)

9、波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程對(duì)照品來源：中國(guó)藥品生物制品檢定所；含量：86.0%；批號(hào)：130422-200705精密稱取克林霉素標(biāo)準(zhǔn)品 mg置于10ml容量瓶中,加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1 ml中約含克林霉素2 mg的溶液。上述溶液取10ul連續(xù)6次注入液相色譜儀，計(jì)算RSD(%)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果樣品峰面積RSD(%)A1A2A3A4A5A6方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱5%對(duì)照品進(jìn)樣精密度試驗(yàn)檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二

10、氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇(210:300)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程對(duì)照品來源：中國(guó)藥品生物制品檢定所；含量：86.0%；批號(hào)：130422-200705精密稱取克林霉素標(biāo)準(zhǔn)品 mg置于100ml容量瓶中,加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1 ml中約含克林霉素0.25 mg的溶液。上述溶液取10ul連續(xù)6次注入液相色譜儀，計(jì)算RSD(%)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果樣品峰面積RSD(%)A1A2A3A4A5A6方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱回收率試驗(yàn)檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色

11、譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇(210:300)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程對(duì)照品來源：中國(guó)藥品生物制品檢定所；含量：86.0%；批號(hào)：130422-200705精密稱取鹽酸克林霉素對(duì)照 mg分別置10ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1 ml中約含克林霉素2 mg的溶液，搖勻，即得作為對(duì)照溶液。精密稱?。ㄅ?hào)： ）樣品1 mg，樣品2 mg樣品3 mg分別置25ml的容量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，即

12、得三份濃度為 mg/ml， mg/ml， mg/ml的樣品溶液（作為含量120%樣品溶液）。精密稱?。ㄅ?hào)： ）樣品1 mg，樣品2 mg樣品3 mg分別置25ml的容量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得三份濃度為 mg/ml， mg/ml， mg/ml的樣品溶液（作為含量100%樣品溶液）。精密稱?。ㄅ?hào)： ）樣品1 mg，樣品2 mg樣品3 mg分別置25ml的容量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得三份濃度為 mg/ml， mg/ml， mg/ml的樣品溶液（作為含量80%樣品溶液）。分別量取10ul 80%、100%、120%的樣品溶液各三份注入液相色譜儀，記錄色譜圖。計(jì)算回

13、收率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果相對(duì)濃度W加入量(mg)W測(cè)得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)80%100%120%方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱耐用性試驗(yàn)流速檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇(210:300)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程精密稱取鹽酸克林霉素樣品（批號(hào)： ）W樣 mg置于25ml容量瓶中，用流動(dòng)相定容至刻度，分別

14、以0.8ml/min ,1.0 ml/min,1.2 ml/min的流速進(jìn)樣，記錄保留時(shí)間，理論塔板數(shù)，分離度和對(duì)稱因子。試驗(yàn)結(jié)果流速(ml/min)保留時(shí)間理論塔板數(shù)A（%）分離度對(duì)稱因子方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱耐用性試驗(yàn)pH值檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至2.8；3.0；3.2)-甲醇(210:300)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程

15、精密稱取鹽酸克林霉素樣品（批號(hào)： ）W樣1 mg，W樣2 mg, W樣3 mg置于25ml容量瓶中，用pH分別為2.8，3.0和3.2的流動(dòng)相定容至刻度，分別取10ul 注入液相色譜儀，記錄主峰保留時(shí)間，理論塔板數(shù)，分離度和對(duì)稱因子。試驗(yàn)結(jié)果pH值保留時(shí)間理論塔板數(shù)A（%）分離度對(duì)稱因子方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱耐用性試驗(yàn)柱溫檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0

16、)-甲醇（210:300）流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程精密稱取鹽酸克林霉素樣品（批號(hào)： ）W樣 mg，置于25ml容量瓶中，定容至刻度，設(shè)柱溫為20，25，30，分別進(jìn)樣10 ul，進(jìn)樣測(cè)定，記錄記錄主峰保留時(shí)間，理論塔板數(shù)，分離度和對(duì)稱因子試驗(yàn)結(jié)果柱溫保留時(shí)間理論塔板數(shù)A（%）分離度對(duì)稱因子方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱耐用性試驗(yàn)流動(dòng)相比例檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000m

17、l，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇( 20:31)；（21:30）；（22:29）；（24:27）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程精密稱取鹽酸克林霉素樣品（批號(hào)： ）W樣1 mg，W樣2 mg, W樣3 mg, W樣4 mg置于25ml容量瓶中，分別以磷酸二氫銨溶液-甲醇20:31；21:30；22:29；24:27為流動(dòng)相，定容至刻度，進(jìn)樣測(cè)定，記錄記錄主峰保留時(shí)間，理論塔板數(shù)，分離度和對(duì)稱因子試驗(yàn)結(jié)果磷酸二氫銨溶液-甲醇保留時(shí)間理論塔板數(shù)A（%）分離度對(duì)稱因子方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱耐用性試驗(yàn)結(jié)果與結(jié)論檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010

18、年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260試驗(yàn)結(jié)果結(jié)論方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱專屬性試驗(yàn)：強(qiáng)光檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇( 210 : 300 )為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程樣品測(cè)定：精密稱取鹽酸克林霉素樣品（批號(hào)： ）W樣 mg，50ml無色量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，置強(qiáng)光照射箱（光照強(qiáng)

19、度約4000Lx）中照射4小時(shí)，取出，作為供試品溶液。量取10ul 的樣品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。輔料空白：按處方量配比，精密稱取醋酸鈉三水合物 mg，混勻精密稱取5/6瓶量于25ml無色容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，置強(qiáng)光照射箱（光照強(qiáng)度約4000Lx）中照射4小時(shí)，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。量取10ul 的樣品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。試驗(yàn)結(jié)果方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱專屬性試驗(yàn)：高溫破壞檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以

20、磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇( 210 : 300 )為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程樣品測(cè)定：精密稱取鹽酸克林霉素樣品（批號(hào)： ）W樣 mg，置于50ml棕色容量瓶中，加流動(dòng)相適量使溶解，置100的水浴中加熱30分鐘后，取出，放冷，搖勻。量取10ul 的樣品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。輔料空白：按處方量配比，精密稱取醋酸鈉三水合物 mg，混合后，置于25ml棕色容量瓶中，加流動(dòng)相適量使溶解，置100的水浴中加熱30分鐘后，取出，放冷，搖勻。量取10ul 的樣品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。試驗(yàn)結(jié)果

21、方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱專屬性試驗(yàn)：氧化破壞檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇( 210 : 300 )為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程樣品測(cè)定：精密稱取鹽酸克林霉素樣品（批號(hào)： ）W樣 mg，置50ml棕色量瓶中，加流動(dòng)相適量使溶解，加濃度為3的過氧化氫溶液5ml，搖勻，室溫放置30分鐘后，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品

22、溶液。量取10ul 的樣品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。輔料空白：按處方量配比，精密稱取醋酸鈉三水合物 mg，混合后，精密稱取5/6瓶量于25ml棕色容量瓶中，加流動(dòng)相適量使溶解，加濃度為3的過氧化氫溶液5ml，搖勻，室溫放置30分鐘后，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。量取10ul 的樣品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。試驗(yàn)結(jié)果方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱專屬性試驗(yàn)：強(qiáng)酸破壞檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水

23、溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇( 210 : 300 )為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程樣品測(cè)定：精密稱取鹽酸克林霉素樣品（批號(hào)： ）W樣 mg，置50ml棕色量瓶中，加流動(dòng)相適量使溶解，加0.1mol/L鹽酸溶液5ml，搖勻，室溫放置30分鐘后，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液中和，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。量取10ul 的樣品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。輔料空白：按處方量配比，精密稱取醋酸鈉三水合物 mg，混合后，精密稱取5/6瓶量于25ml棕色容量瓶中，加流動(dòng)相適量使溶解，加0.1mol/L鹽酸溶液5ml，搖勻，室溫放置30分

24、鐘后，用0.1mol/L氫氧化鈉溶液中和，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。量取10ul 的樣品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。 試驗(yàn)結(jié)果方法學(xué)研究測(cè)定原始記錄第 頁 共 頁樣品名稱注射用鹽酸克林霉素試驗(yàn)名稱專屬性試驗(yàn)：強(qiáng)堿破壞檢驗(yàn)依據(jù)中國(guó)藥典2010年版二部附錄 D（高效液相色譜法）高效液相色譜儀安捷倫1260色譜條件色譜柱：C18 5um，4.6250mm ；以磷酸二氫銨溶液(取磷酸二氫銨2.88g，加水溶解并稀釋成1000ml，用80磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至3.0)-甲醇( 210 : 300 )為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。試驗(yàn)過程樣品測(cè)定：精密稱取鹽酸克林霉素樣品（批號(hào)： ）W樣 mg，置50ml棕色量瓶中，加流動(dòng)相適量使溶解使溶解，加0.1mol/L氫氧化鈉溶液5ml，搖勻，室溫放置30分鐘后，用0.1mol/L鹽酸溶液中和，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。量取10ul