組織培養(yǎng)試題

1、組織培養(yǎng)模擬試卷A卷（理論部分）一、填空題：（每空1.5分，共33分）1、植物組織培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)方式不同可以分為_(kāi)和_ 。2、愈傷組織的器官發(fā)生順序有四種情況，分別為無(wú)芽的根或無(wú)根的芽_、_ 、_ 、_ 。3、對(duì)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基滅菌時(shí)，一般情況采用的條件是_溫度，保持時(shí)間是_ 。4、在培養(yǎng)基中，蔗糖的主要作用是_ 、_ 和_ 。5、原生質(zhì)體融合中， _的原理是利用交變電場(chǎng)，脈沖電壓來(lái)促進(jìn)細(xì)胞融合的。6、_是指用一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織塊來(lái)看護(hù)單個(gè)細(xì)胞，并使其生長(zhǎng)和增殖的方法。7、動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)主要包括_ 、 _和_ 三大類。8、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)曲線分為、_ 、_ 、_和_ 四個(gè)時(shí)期。9、植

2、物花粉培養(yǎng)時(shí)，處于_ 時(shí)期的花粉比較容易成功。10、細(xì)胞同步化的方法主要有_ 和_ 。二、名詞解釋：（每題4分，共20分）1、 細(xì)胞全能性：2、 原生質(zhì)體：3、 callus：4、 人工種子：5、 褐變：三、判斷題：（判斷改正，請(qǐng)把錯(cuò)誤的改正過(guò)來(lái)；本題共6小題，每題2分，共12分；只判斷不改正，本小題得0.5分）1、 玻璃化現(xiàn)象的產(chǎn)生主要是細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中環(huán)境因素的變化引起的。2、 植物生長(zhǎng)素主要促進(jìn)側(cè)芽萌發(fā)生長(zhǎng)，細(xì)胞分裂素則重要促進(jìn)生根，有保鮮效果。3、 組織培養(yǎng)植株再生途徑有兩條：一是體細(xì)胞胚胎發(fā)生，另一個(gè)是愈傷組織發(fā)生。4、 動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)的基本過(guò)程是：從有機(jī)體取得材料切碎或酶解原代培養(yǎng)

3、傳代培養(yǎng)。5、 植物脫毒技術(shù)就是把植物體內(nèi)所有病毒都?xì)⑺?，形成不含任何病毒的植株的技術(shù)。6、 冷凍保存種質(zhì)資源時(shí)，慢速冷凍法適用于含水量較高，細(xì)胞中含有大液泡的材料。四、簡(jiǎn)答題：（本題共3小題，共20分）1、簡(jiǎn)述細(xì)胞融合的基本過(guò)程。（5分）2、概述無(wú)菌操作基本過(guò)程。（7分）3、簡(jiǎn)述人工種皮的特點(diǎn)和使用人工種子的意義。（8分）五、分析題：（15分）舉例試述雜交瘤技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體的原理和技術(shù)過(guò)程（必要時(shí)，可以附帶圖示）。組織培養(yǎng)模擬試卷B卷（實(shí)驗(yàn)操作部分）一、填空題：1、培養(yǎng)基母液配制時(shí)，植物激素一般配制成濃度為_(kāi) mg/ml的溶液，貯存在_  下備用。2、分裝好的培養(yǎng)基置于高壓蒸汽滅

4、菌鍋中滅菌，滅菌條件為溫度_  ，壓力_  。3、不同培養(yǎng)基有不同的特點(diǎn)。MS培養(yǎng)基的特點(diǎn)是_  ；White培養(yǎng)基特點(diǎn)是_  ；N6培養(yǎng)基的特點(diǎn)是_  。4、外植體的選擇是組織培養(yǎng)培養(yǎng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，一般選擇的原則是優(yōu)良的種質(zhì)_ 、_  。5、培養(yǎng)基中使用的糖源一般是蔗糖，其濃度為_(kāi)  左右。葉片組織接種后于_  條件下培養(yǎng)，每天光照1214h，光照度約為_(kāi)  。二、簡(jiǎn)述題：1、外植體滅菌消毒步驟。2、無(wú)菌操作過(guò)程。3、以MS培養(yǎng)基為例，簡(jiǎn)述配制過(guò)程。一、填空題：1、固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)2、先芽后根、先根

5、后芽，根芽同時(shí)生長(zhǎng)3、121，1530min4、調(diào)節(jié)滲透壓、提供碳源、提供能源5、電融合6、看護(hù)培養(yǎng)7、細(xì)胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)8、潛伏期、指數(shù)生長(zhǎng)期、平臺(tái)期、衰退期9、單核期10、分離同步化、誘導(dǎo)同步化二、名詞解釋：1、細(xì)胞全能性：生物體的每一個(gè)細(xì)胞都攜帶有一套完整的基因組，并具有在一定條件下能夠發(fā)育成完整個(gè)體的潛在能力。2、原生質(zhì)體：指用特殊的方法脫去植物細(xì)胞壁的、裸露的、有生活力的原生質(zhì)團(tuán)。3、callus：即愈傷組織，指脫分化后的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)細(xì)胞分裂形成一團(tuán)無(wú)特定結(jié)構(gòu)和功能的松散的薄壁細(xì)胞團(tuán)。4、人工種子：指植物離體培養(yǎng)中產(chǎn)生的胚狀體或不定芽包裹在含有養(yǎng)分和保護(hù)功能的人工胚乳和人工種

6、皮中所形成的能發(fā)芽出苗的顆粒體。5、褐變：指外植體在培養(yǎng)過(guò)程中體內(nèi)的多酚氧化酶被激活，使細(xì)胞里的酚類物質(zhì)氧化成棕褐色的醌類物質(zhì)，這種致死性的褐化物向外擴(kuò)散使培養(yǎng)基變色，同時(shí)抑制其他酶的活性，嚴(yán)重影響外植體的脫分化和器官分化，最后褐變死亡的現(xiàn)象。三、判斷題：1、對(duì)。2、錯(cuò) 前者促進(jìn)生根，后者促進(jìn)側(cè)芽生長(zhǎng)和保鮮效果。3、錯(cuò) 器官發(fā)生。4、對(duì)。5、錯(cuò) 不含主要病毒的苗木稱為無(wú)毒苗。6、對(duì)四、簡(jiǎn)答題：1、細(xì)胞融合過(guò)程：答：基本過(guò)程是：a、細(xì)胞在誘融劑或正弦電場(chǎng)作用下凝集，彼此靠近；b、兩個(gè)相鄰細(xì)胞之間的質(zhì)膜相互融合，隨后兩個(gè)親本細(xì)胞質(zhì)膜上的受體、糖蛋白、糖脂等質(zhì)膜成分也在融合后的質(zhì)膜上重新分布；c、細(xì)

7、胞質(zhì)發(fā)生融合；d、細(xì)胞核的融合，形成單核融合細(xì)胞。2、無(wú)菌操作a、用水和肥皂洗凈雙手，穿上滅菌過(guò)的專用實(shí)驗(yàn)服、帽子鞋子，進(jìn)入接種室；b、打開(kāi)超凈工作臺(tái)和無(wú)菌操作室的紫外燈，照射20min；c、操作前10min使超凈工作臺(tái)處于工作狀態(tài)，讓過(guò)濾室空氣吹拂工作臺(tái)面和四周臺(tái)壁；d、照射20min后，關(guān)閉紫外燈，用70%的酒精擦拭工作臺(tái)和雙手；e、用蘸有70%酒精的紗布擦拭有培養(yǎng)基的培養(yǎng)器皿，放進(jìn)工作臺(tái)；f、把解剖刀、剪刀、鑷子等浸泡在95%酒精中，在火焰上滅菌后，放在器械架上；g、滅菌材料；，打開(kāi)培養(yǎng)瓶，火燒瓶口，接種；h、接種結(jié)束后，清理和關(guān)閉超凈工作臺(tái)。3、人工種皮特點(diǎn)：1、對(duì)胚狀體或芽無(wú)毒害；2

8、、柔軟且有一定的機(jī)械抗壓能力；3、能保持一定水分及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；4、允許種皮內(nèi)外氣體交換通暢，不影響胚萌發(fā)突破，播種后易于化解。意義：1、人工種子結(jié)構(gòu)完整，體積小，便于貯藏和運(yùn)輸，可直接播種，易于機(jī)械化操作；2、不受季節(jié)限制，不受環(huán)境制約，胚狀體數(shù)量多、繁殖快、有利于工廠化生產(chǎn)；3、有利于繁殖生育周期長(zhǎng)、自交不親合、珍貴稀有的一些植物，也可以大量繁殖無(wú)病毒材料；4、可在人工種子中加入抗生素、菌肥、農(nóng)藥等成分，提高種子活力和品質(zhì)；5、體細(xì)胞胚由無(wú)性繁殖體系產(chǎn)生，可以固定雜交優(yōu)勢(shì)。五、單克隆抗體原理：正常B淋巴細(xì)胞不能在體外培養(yǎng)條件下長(zhǎng)期生存，因而不能在體外持續(xù)產(chǎn)生抗體，而骨髓瘤細(xì)胞可以在體外快速生長(zhǎng)

9、，但不能分泌抗體，但是，若把二者在體外結(jié)合，獲得雜交瘤細(xì)胞，使雜交瘤細(xì)胞既具有B淋巴細(xì)胞分泌抗體的能力，又具有骨髓瘤細(xì)胞能夠在體外長(zhǎng)期快速生長(zhǎng)的特性。步驟要點(diǎn)：1、致敏B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤親本細(xì)胞的制備；2、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合（一般5：1）；3、雜交瘤細(xì)胞的篩選；4、可分泌特異性單抗的雜交瘤細(xì)胞的篩選；5、雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)；6、單克隆抗體的生產(chǎn)和純化。 模擬試卷B卷（實(shí)驗(yàn)操作部分）一、填空題1、0.11.0，242、121，1.1kg/cm23、無(wú)機(jī)鹽濃度高，無(wú)機(jī)鹽濃度低，KNO3和（NH4）SO4含量高，不含鉬4、健壯的植株、最適時(shí)期，最佳大小5、3%，2528，1500200

10、0lx二、簡(jiǎn)述題1、外植題滅菌消毒步驟：先用流水沖洗1020min或更長(zhǎng)時(shí)間，然后在70%酒精中浸泡30s，再立刻放入0.1%0.2%氯化汞液中浸泡10min左右或在10%的次氯酸鈉、飽和飄白粉浸泡30min左右，然后再用蒸餾水沖洗45次，即可。2、無(wú)菌操作過(guò)程：(1)實(shí)驗(yàn)前，無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)用紫外燈照射40min滅菌，用70%酒精擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面，并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)10min后，才可開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)。如需要繼續(xù)進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)，則用70% 酒精擦拭無(wú)菌操作臺(tái)面，再讓無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)10min后，才可進(jìn)行下一個(gè)實(shí)驗(yàn)操作。(2)無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔與寬

11、敞，必要物品如試管架、移液器或吸管頭等可以暫時(shí)放置，其它實(shí)驗(yàn)用品用完后應(yīng)及時(shí)移出，以利氣體流通。實(shí)驗(yàn)用品要用70%酒精擦拭后才能帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在操作臺(tái)中央無(wú)菌區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，勿在邊緣非無(wú)菌區(qū)域操作。 (3)小心取出無(wú)菌實(shí)驗(yàn)用品，避免造成污染。切勿碰觸吸管與吸頭頭部或容器瓶口，不要在打開(kāi)的容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開(kāi)后，用手夾住瓶蓋并握住瓶身傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放在臺(tái)面上。(4)工作人員應(yīng)注意自身的安全，必須穿戴實(shí)驗(yàn)衣與手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。操作過(guò)程中，應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生，小心有毒性試劑，并避免尖銳物品傷人等。 (5)定期檢查下列項(xiàng)目:

12、無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)氣流壓力是否正常，定期更換紫外燈管及HEPA過(guò)濾器濾膜，預(yù)濾網(wǎng)。3、培養(yǎng)基配制過(guò)程：a、取規(guī)定數(shù)量的糖源和凝固劑置于燒杯或搪瓷鍋內(nèi)，加蒸餾水或去離子水至培養(yǎng)基最終體積的3/4，在恒溫水浴中加熱使之溶解，并不斷攪拌，防止瓊脂凝塊兒。配制液體培養(yǎng)基時(shí)因不含凝固劑，無(wú)須高溫加熱。b、根據(jù)計(jì)算所需量依次加入大量元素、微量元素、鐵鹽、有機(jī)物、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)母液及其他特殊的附加物，攪拌均勻。吸取各種母液的移液器應(yīng)專用，以免產(chǎn)生交叉感染。對(duì)高溫高壓條件下不穩(wěn)定或容易分解的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)必須在培養(yǎng)基進(jìn)行高溫高壓滅菌后，用過(guò)濾的方法加入。c、加水定容至規(guī)定體積，攪拌均勻。在標(biāo)準(zhǔn)溫度下將培養(yǎng)基定容后進(jìn)

13、行稱量，并以此質(zhì)量為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行較高溫度的培養(yǎng)基的定容。d、調(diào)整培養(yǎng)基的pH值。一般采用1mol/LNaOH與1mol/LHCl來(lái)調(diào)整其pH值。e、分裝。已經(jīng)配制好的培養(yǎng)基應(yīng)盡快的分裝，以防止含瓊脂的培養(yǎng)基在較低溫度下凝固。分裝時(shí)應(yīng)注意到培養(yǎng)基占該容器的1/31/4為宜。f、封口。培養(yǎng)基分裝后，應(yīng)立刻用封口膜將容器口部封嚴(yán)。封口膜應(yīng)具有透光、透氣性，但不通透塵埃、微生物等雜質(zhì)。 植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)材料一、名詞解釋。、植物組織培養(yǎng)：植物的離體器官、組織或細(xì)胞在人工制備的培養(yǎng)基上進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)，并在人工控制的環(huán)境條件下，使其發(fā)育成完整植株的科學(xué)技術(shù)。簡(jiǎn)稱組培。、脫分化：指失去分裂能力的細(xì)胞回復(fù)到分生性狀態(tài)

14、并進(jìn)行分裂，形成無(wú)分化的細(xì)胞即愈傷組織的現(xiàn)象。、單倍體植株：只含有配子體染色體組數(shù)的植株。、胚狀體：體細(xì)胞在一定條件下所誘導(dǎo)形成的胚稱為體細(xì)胞胚，即胚狀體。二、不定項(xiàng)選擇 （每題2 分，共10分）、下列不屬于生長(zhǎng)素類的植物激素是_AD_。A Kt； B IAA； C NAA； D ZT、影響培養(yǎng)基凝固程度因素有_ABCD_。A 瓊脂的質(zhì)量好壞； B 高壓滅菌的時(shí)間； C 高壓滅菌的溫度； D 培養(yǎng)基的PH、第一次提出植物細(xì)胞具有全能性的理論概念的科學(xué)家是_B_：A Morel； B Haberland； C    Schleiden； D White、下列不屬于大

15、量元素的鹽是_C_。A NH NO ； B KNO ； C ZnSO .7HO； D MgSO .7HO4 3      3       4   2        4   2、下列實(shí)驗(yàn)中可能獲得單倍體植株的是_BCD_。A 小麥的莖尖培養(yǎng)；B 番茄花藥培養(yǎng)；C 玉米胚乳培養(yǎng)；D 玉米花粉培養(yǎng)三、填空題（每空1分，共20分）、植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)對(duì)象分為植株培養(yǎng)、_器官培養(yǎng)_、組織

16、或愈傷組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)_等幾種類型。、1902年德國(guó)植物生理學(xué)家Haberlandt第一次提出植物細(xì)胞全能性_的理論概念；1943年White 提出植物細(xì)胞“_全能性_”學(xué)說(shuō)，并出版了植物組織培養(yǎng)手冊(cè)，從而使植物組織培養(yǎng)成為一門新興的學(xué)科。、細(xì)胞全能性是指植物的每個(gè)細(xì)胞都具有該植物的全部遺傳信息_和發(fā)育成完整植株的潛在的能力。、6-BA / NAA 的高低決定了外植體的發(fā)育方向，比值低時(shí)促進(jìn)_根_的生長(zhǎng)，這時(shí)_脫分化_占主導(dǎo)地位；比值高促進(jìn)_芽_的生長(zhǎng)，這時(shí)_分化_占主導(dǎo)地位。、在組織培養(yǎng)中，不耐熱的物質(zhì)用_過(guò)濾滅菌_法滅菌，而培養(yǎng)基常用_濕熱滅菌_法滅菌。、組織培養(yǎng)中有三大不易解決的問(wèn)題，

17、它們分別是_污染_、_褐化_、_玻璃化_。、花藥培養(yǎng)是_器官_培養(yǎng)，花粉培養(yǎng)屬于_細(xì)胞_培養(yǎng)，但二者的培養(yǎng)目的一樣，都是要誘導(dǎo)花粉細(xì)胞發(fā)育成單倍體細(xì)胞，最后發(fā)育成_單倍體植株_。四、判斷題（對(duì)的畫(huà)“”；錯(cuò)題畫(huà)“×”。每題1分，共5分）、2，4D 可用01molL 的HCl 助溶，再加蒸餾水定容。                         (&

18、#215;)、幼年細(xì)胞和組織比成年細(xì)胞和組織誘導(dǎo)愈傷組織容易。                                  ()、在MS 的培養(yǎng)基成分中，MgSO4·7HO 屬于微量元素。     

19、60;                        (×)4、一般來(lái)說(shuō)，光照強(qiáng)度較強(qiáng)，幼苗容易徒長(zhǎng)，而光照強(qiáng)度較弱幼苗生長(zhǎng)的粗壯。(×)、由性細(xì)胞發(fā)育而成的胚叫做胚狀體，而由體細(xì)胞發(fā)育而成的胚叫做合子胚。(×)五、簡(jiǎn)答題（每題5分，共15分）1、培養(yǎng)基一般包括哪些基本成分?答：培養(yǎng)基的成份有：（1）無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)：包括：氧(O)、碳(C)、氫

20、(H)、氮(N)、鉀(K)、磷(P)、鎂(Mg)、硫(S)和鈣(Ca)等大量元素；鐵（Fe ）、銅（Cu）、鋅（Zn ）、錳（Mn ）、鉬（Mo ）、硼（B ）、碘（I）、 鈷（Co）、氯（Cl）、鈉（Na ）等微量元素（2）有機(jī)營(yíng)養(yǎng)：氨基酸、天然提取物、維生素、糖類（3）植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)：主要包括生長(zhǎng)素類和細(xì)胞分裂素類。（4）其他：包括水、活性炭、瓊脂等。、培養(yǎng)基、培養(yǎng)器皿和植物材料通常怎樣滅菌?答：培養(yǎng)基一般采用濕熱滅菌，如果培養(yǎng)基中的有些成分高溫易分解，則可采用過(guò)濾滅菌.培養(yǎng)器皿可采用濕熱滅菌或干熱滅菌。植物材料一般采用藥劑浸泡滅菌，具體操作如下：（1）外植體的預(yù)處理，對(duì)植物組織進(jìn)行修整

21、，去掉不需要的部分，并將外植體用流水沖洗干凈。（2）用70%的酒精浸潤(rùn)材料30s 左右。（3）用滅菌劑浸泡滅菌，滅菌時(shí)不時(shí)攪動(dòng)，使植物材料與滅菌劑有良好的接觸，若滅菌過(guò)程中加入數(shù)滴吐溫，則滅菌效果更好。（4）植物材料用無(wú)菌水沖洗3-5 次，以除去滅菌劑。一、名詞解釋 （每題分，共20 分）、細(xì)胞全能性：指植物體的每個(gè)具有完整細(xì)胞核的生活的細(xì)胞，都具有該植株的全部遺傳信息和發(fā)育成完整植株的潛在能力。、再分化：在人工培養(yǎng)的特定條件下，細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化的過(guò)程而形成的無(wú)結(jié)構(gòu)的分生組織（愈傷組織）再次分化，進(jìn)行器官形成，產(chǎn)叢生芽或胚狀體，形成完整植株的過(guò)程。3、愈傷組織培養(yǎng)：指將母體植物上各個(gè)部分切下、形

22、成外植體、接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上、進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)、生長(zhǎng)和發(fā)育的一門技術(shù)。一般情況下，植物組織均能誘發(fā)形成愈傷組織，由外植體形成愈傷組織，標(biāo)志著植物組織培養(yǎng)的開(kāi)始。二、不定項(xiàng)選擇 （每題2 分，共10分）、活性炭在組織培養(yǎng)中的作用有_ABC_。A 吸附有毒物質(zhì)；      B 減少褐變，防止玻璃化；   C 創(chuàng)造黑暗環(huán)境，增加培養(yǎng)基的通透性，利于根的生長(zhǎng)； D 增加培養(yǎng)基中的養(yǎng)分、下列具有細(xì)胞全能性的細(xì)胞是：_ABCD_。A 成熟的老細(xì)胞；B 幼嫩的組織細(xì)胞；C 愈傷組織細(xì)胞D 番茄的受精合子、下列培養(yǎng)基中_C_無(wú)機(jī)鹽的濃度最低

23、。A MS 培養(yǎng)基；B B 培養(yǎng)基；C White 培養(yǎng)基； N 培養(yǎng)基               5                        6、從單個(gè)細(xì)胞或一塊外植體形成典型的愈傷組織，大致經(jīng)歷_ACD_三個(gè)時(shí)期。A

24、誘導(dǎo)期；B 潛伏期；C 分化期；D 分裂期、植物組織培養(yǎng)的特點(diǎn)是_ABCD_：A 培養(yǎng)條件可人為控制；B 生長(zhǎng)周期短，繁殖率高；C 管理方便；D 取材少三、填空題（每空1分，共20分）、在無(wú)毒苗的組織培養(yǎng)中，外植體的大小與其成活率成_正比_，而與脫毒效果成_反比_。、一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象稱為"_脫分化_"。、莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為_(kāi)普通莖尖_培養(yǎng)和_莖尖分生組織_培養(yǎng)兩種類型。、愈傷組織的形態(tài)發(fā)生有_器官形態(tài)建成_和_胚形態(tài)建成_兩種情況。6、在組織培養(yǎng)中，IAA和GA 必須用_過(guò)濾_法滅菌，而接種室空間采用_7

25、0%酒精或2%新潔爾滅噴霧_或_甲酫熏蒸_法滅菌。7、植物的胚胎培養(yǎng)，包括_胚_(dá)培養(yǎng)、_胚乳_(kāi)培養(yǎng)、_胚珠_(kāi)培養(yǎng)、_子房_培養(yǎng)。8、幼胚培養(yǎng)時(shí)，其發(fā)育過(guò)程有_胚性發(fā)育_、_早熟萌發(fā)_、_產(chǎn)生愈傷組織三種方 式。四、判斷題（對(duì)的畫(huà)“”；錯(cuò)題畫(huà)“×”。每題1分，共5分）1、一個(gè)已分化的細(xì)胞若要表現(xiàn)其全能性，首先要經(jīng)歷脫分化過(guò)程。                      

26、             ()、一般來(lái)說(shuō)，光照強(qiáng)度較強(qiáng)，幼苗容易徒長(zhǎng)，而光照強(qiáng)度較弱幼苗生長(zhǎng)的粗壯。(×)、經(jīng)過(guò)花藥培養(yǎng)所獲得的植株都是單倍體。                           &

27、#160;                (×)、由性細(xì)胞發(fā)育而成的胚叫做胚狀體，而由體細(xì)胞發(fā)育而成的胚叫做合子胚。(×)、用于外植體、手、超凈臺(tái)等的表面消毒酒精濃度越大，消毒效果越好越好。(×)五、簡(jiǎn)答題（每題5分，共15分）、在植物組織培養(yǎng)中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素各有什么作用？    答：生長(zhǎng)素能促進(jìn)細(xì)胞的縱向伸長(zhǎng)，它的作用具有兩重性：既促進(jìn)生長(zhǎng)，又能抑制生長(zhǎng)、甚至殺死植物；既促進(jìn)發(fā)芽，

28、又會(huì)抑制發(fā)芽；既能防止落花落果，又可疏花疏果。這取決于濃度、細(xì)胞的年齡和器官的種類。一般低濃度促進(jìn)生長(zhǎng)，中濃度抑制生長(zhǎng)，高濃度則殺死植物。細(xì)胞分裂素能促進(jìn)細(xì)胞分裂和擴(kuò)大、延遲衰老和保鮮、誘導(dǎo)芽的分化、促進(jìn)側(cè)芽發(fā)育，防止果樹(shù)生理落果、打破種子的休眠，促使其發(fā)芽等作用。二、不定項(xiàng)選擇 （每題2 分，共10分）1、高溫易被破壞分解的植物激素是_ABD_。A IAA；B GA；C NAA；D Zt2、同一植株下列_部位病毒的含量最低。A 葉片細(xì)胞；B 莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞；C 莖節(jié)細(xì)胞；D 根尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞3、在原生質(zhì)體的培養(yǎng)中，滲透穩(wěn)定劑的作用是 ：A 穩(wěn)定原生質(zhì)體的形態(tài)而不使其被破壞 B 支持作用C 提供

29、營(yíng)養(yǎng)                 D 調(diào)節(jié)PH 值4、下列實(shí)驗(yàn)中不可能獲得單倍體植株的是_。A 水稻莖尖培養(yǎng)；B 草莓花藥培養(yǎng)；C 玉米葉片培養(yǎng)；D 棉花胚乳培養(yǎng)5、適合花粉培養(yǎng)的最適時(shí)期是 ：A 單核早期 B 單核靠邊期 C 二核期 D 三核期三、填空題（每空1分，共20分）1、一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)開(kāi)分生狀態(tài)_狀態(tài)，并形成_無(wú)分化的愈傷組織_的現(xiàn)象稱為"脫分化"。2、原生質(zhì)體的分離有_機(jī)械法_和_酶解法_兩種方

30、法。3、White 培養(yǎng)基_無(wú)機(jī)鹽_濃度低，適合生根培養(yǎng)。4、在無(wú)毒苗的組織培養(yǎng)中，外植體的大小與其成活率成_正比_，而與脫毒效果成_反比_。5、莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為_(kāi)普通莖尖_培養(yǎng)和_莖尖分生組織_培養(yǎng)兩種類型。6、由胚乳培養(yǎng)可以獲得_單_倍體植株，經(jīng)秋水仙素處理可以獲得_二_倍體植株。7、使單倍體植株染色體加倍的途徑主要有 自然加倍 、 人工加倍 和 通過(guò)愈傷組 、織再生加倍8、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)有 成批掊養(yǎng)   和 連續(xù)培養(yǎng)     兩種類型。9、通過(guò)植物組織培養(yǎng)獲得無(wú)病毒苗的方法主要有 莖尖分生組織培養(yǎng)、 愈傷組織培

31、養(yǎng) 、 珠心胚培養(yǎng)及花藥培養(yǎng)脫毒。四、判斷題（對(duì)的畫(huà)“”；錯(cuò)題畫(huà)“×”。每題1分，共5分）1、經(jīng)過(guò)花藥培養(yǎng)所獲得的植株都是單倍體。(× )2、幼嫩的組織比成熟的老組織脫分化難。(× )3、通過(guò)子房的培養(yǎng)，即可能等到單倍體植株，也有可能得到二倍體植株。( )4、蘭花可以通過(guò)芽叢分離的組培途徑快繁，非洲菊通過(guò)原球莖增殖的途徑快繁。 (× )5、單細(xì)胞培養(yǎng)可以采用發(fā)酵罐進(jìn)行培養(yǎng)。(× )五、簡(jiǎn)答題（每題5分，共15分）3、什么是看護(hù)培養(yǎng)?其具體的方法是什么？答：看護(hù)培養(yǎng)指用一塊生長(zhǎng)活躍的愈傷組織來(lái)看護(hù)單個(gè)細(xì)胞或其他培養(yǎng)物，使其生長(zhǎng)和增殖的方法。具體方

32、法：1、將生長(zhǎng)活躍的愈傷組織放入滅過(guò)菌的固體培養(yǎng)基上，并在愈傷組織上放一片無(wú)菌濾紙片。2、將該愈傷培養(yǎng)過(guò)夜。3、將單細(xì)胞或其他培養(yǎng)物放于濾紙片上面，移入培養(yǎng)室培養(yǎng)。一、名詞解釋 （每題分，共20 分）1、細(xì)胞培養(yǎng)：指從植物體中分離了單細(xì)胞，無(wú)人工條件下進(jìn)行培養(yǎng)，使其生長(zhǎng)增殖，甚至發(fā)育成完整植株的技術(shù)。4、無(wú)病毒苗：指不含該種植物主要危害病毒的苗木。二、不定項(xiàng)選擇 （每題2 分，共10分）1、IAA需要用_C_法滅菌。A 灼燒滅菌；B 干熱滅菌；C 過(guò)濾滅菌 D 高壓濕熱滅菌2、能打破種子休眠，促進(jìn)種子、塊莖、鱗莖等提前萌發(fā)的激素是 ：A GA；B IAA；C NAA；D ZT3、同一植株下列_

33、部位病毒的含量最低。A 葉片細(xì)胞；B 莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞；C 莖節(jié)細(xì)胞；D 根尖生長(zhǎng)點(diǎn)細(xì)胞4、從單個(gè)細(xì)胞或一塊外植體形成典型的愈傷組織，大致經(jīng)歷_三個(gè)時(shí)期。A 誘導(dǎo)期；B 潛伏期；C 分化期；D 分裂期5、下列屬于微量元素的鹽是_。A NH4 NO3  ；B KI；C ZnSO4 .7HO2；D CuSO4 .5H O2三、填空題（每空1分，共20分）1、去除植物病毒的主要方法是_組培法_和_理化法_兩種方法，當(dāng)把二者結(jié)合起來(lái)脫毒效果最好。2、原生質(zhì)體的融合可實(shí)現(xiàn)_體細(xì)胞_的雜交，其融合的方式分為_(kāi)自然融合_和_人工誘導(dǎo)融合_兩類。3、在組織培養(yǎng)中，非洲菊是靠_叢生芽_的方式進(jìn)行繁殖的，

34、而蝴蝶蘭是以_原球莖增殖_的方式進(jìn)行快繁的。4、單細(xì)胞培養(yǎng)的方法主要有 看護(hù)培養(yǎng)、 微室培養(yǎng) 及 平板培養(yǎng) 。5、在通過(guò)微莖尖培養(yǎng)脫毒時(shí)，外植體的大小應(yīng)以成苗率和脫毒率綜合確定，一般以_0.3-05_mm、帶_12_個(gè)葉原基為好。6、植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)過(guò)程中是否需要光，可分為_(kāi)光_培養(yǎng)和_暗_培養(yǎng)。7、細(xì)胞的再分化有 器官發(fā)生 和 體胚發(fā)生 兩種形式。8、連續(xù)培養(yǎng)有 濁度恒定法 和化學(xué)恒定法 兩種方法。9、通過(guò)莖尖培養(yǎng)脫毒苗的過(guò)程中，切取莖尖的大小與其成活率成_正比_，而與脫毒效果成_反比_。四、判斷題（對(duì)的畫(huà)“”；錯(cuò)題畫(huà)“×”。每題1分，共5分）1、一個(gè)已分化的細(xì)胞若要表現(xiàn)其全能性

35、，首先要經(jīng)歷脫分化過(guò)程。( )2、環(huán)境的相對(duì)濕度可以影響培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)，一般要求80-90的相對(duì)濕度。( )3、通過(guò)花藥培養(yǎng)，即可能等到單倍體植株，也有可能得到二倍體、三倍體甚至更多倍體植株。( )4、在MS 的培養(yǎng)基成分中，MgSO4 .7HO 2 屬于微量元素。(× )5、單體細(xì)胞比二倍倍體細(xì)胞容易誘導(dǎo)愈傷組織。(× )一、名詞解釋 （每題分，共20 分）1、外植體：用于植物組織培養(yǎng)的各種植物材料。2、細(xì)胞全能性 ：指植物的每個(gè)細(xì)胞都具有該植物的全部遺傳信息和發(fā)育成完整植株的潛在的能力。3、原生質(zhì)體融合：指使分離下來(lái)的不同親本的原生質(zhì)體，在人工控制的條件下，

36、像性細(xì)胞受精作用那樣互相融合成一體，又稱體細(xì)胞雜交。4、胚狀體:體細(xì)胞在一定條件下所誘導(dǎo)形成的胚稱為體細(xì)胞胚，即胚狀體。5、愈傷組織培養(yǎng)：指將母體植物上各個(gè)部分切下、形成外植體、接種到無(wú)菌培養(yǎng)基上、進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)、生長(zhǎng)和發(fā)育的一門技術(shù)。一般情況下，植物組織均能誘發(fā)形成愈傷組織，由外植體形成愈傷組織，標(biāo)志著植物組織培養(yǎng)的開(kāi)始。二、不定項(xiàng)選擇 （每題2 分，共10分）1、植物組織培養(yǎng)的特點(diǎn)是_： A 培養(yǎng)條件可人為控制；B 生長(zhǎng)周期短，繁殖率高；C 管理方便；D 取材少2、下列實(shí)驗(yàn)中可能獲得單倍體植株的是_。A 小麥的莖尖培養(yǎng)；B 番茄花藥培養(yǎng)；C 玉米胚乳培養(yǎng)；D 玉米花粉培養(yǎng)3、下面屬于處于

37、愈傷組織分裂期的特征是_。A 細(xì)胞分裂加快                    B 正在分裂的細(xì)胞體積小，內(nèi)無(wú)液泡C 細(xì)胞的核和核仁增至最大 D 細(xì)胞中的RNA 含量減少，而DNA 含量保持不變4、赤霉素（GA）需要用_法滅菌。A 灼燒滅菌；B 干熱滅菌；C 過(guò)濾滅菌 D 高壓濕熱滅菌5、第一次提出植物細(xì)胞具有全能性的理論概念的科學(xué)家是_：A Morel ；B Haberland ；C Schleiden

38、 ；D White三、填空題（每空1分，共20分）1、一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)開(kāi)未分化_狀態(tài)，并形成_未分化的愈傷組織_的現(xiàn)象稱為"脫分化"。2、植物的胚胎培養(yǎng)，包括_胚_(dá)培養(yǎng)、_胚乳_(kāi)培養(yǎng)、_胚珠_(kāi)培養(yǎng)、以及子房的培養(yǎng)。3、在組織培養(yǎng)中，IAA、ZT 和GA 必須用_過(guò)濾滅菌_法滅菌，而接種室空間采用_紫外線照射_或甲醛薰蒸_法滅菌。4、幼胚培養(yǎng)時(shí)，其發(fā)育過(guò)程有_早熟萌發(fā)_、_胚性發(fā)育_、_形成愈傷_三種方式。5、原生質(zhì)體的分離有_機(jī)械法_和_酶降解法_兩種方法。6、莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為_(kāi)普通莖尖培養(yǎng)_培養(yǎng)和_莖尖分生組織_培養(yǎng)兩種類型。7、花藥培養(yǎng)

39、是_器官_培養(yǎng)，花粉培養(yǎng)屬于_細(xì)胞_培養(yǎng)，但二者的培養(yǎng)目的一樣，都是要誘導(dǎo)花粉細(xì)胞發(fā)育成單倍體細(xì)胞，最后發(fā)育成_單倍體植株_。8、不同的滅菌劑其滅菌的機(jī)理一般不一樣，次氯酸鈣和次氯酸鈉都是利用分解產(chǎn)生_ClO-_來(lái)殺菌的；升汞是靠_重金屬_來(lái)達(dá)到滅菌目的。四、判斷題（對(duì)的畫(huà)“”；錯(cuò)題畫(huà)“×”。每題1分，共5分）、6-BA 可用0.1molL 的HCl 助溶，再加蒸餾水定容。                  

40、;    ( )2、用于外植體、手、超凈臺(tái)等的表面消毒酒精濃度越大，消毒效果越好。 (× )3、未成熟胚較小、較嫩、顏色淺，易培養(yǎng)；成熟胚較大、較硬、顏色較深，不易培養(yǎng)。( )4、經(jīng)過(guò)花粉培養(yǎng)所獲得的植株都是單倍體。(× )5、環(huán)境的相對(duì)濕度過(guò)低易使培養(yǎng)基喪失大量水分，濕度過(guò)高時(shí)，則易造成污染。( )五、簡(jiǎn)答題（每題5分，共15分）2、培養(yǎng)基、培養(yǎng)器皿和植物材料通常怎樣滅菌?答：植物材料一般采用藥劑浸泡滅菌，具體操作如下：1、外植體的預(yù)處理，對(duì)植物組織進(jìn)行修整，去掉不需要的部分，并將外植體用流水沖洗干凈。 2、用70%的酒精浸潤(rùn)材料30s 左右

41、。 3、用滅菌劑浸泡滅菌，滅菌時(shí)不時(shí)攪動(dòng)，使植物材料與滅菌劑有良好的接觸，若滅菌過(guò)程中加入數(shù)滴吐溫，則滅菌效果更好。 4、植物材料用無(wú)菌水沖洗3-5 次，以除去滅菌劑。培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿可采用濕熱滅菌，培養(yǎng)器皿也可采用干熱滅菌，有些培養(yǎng)器械也可采用灑精燈火焰灼燒。一、名詞解釋 （每題分，共20 分）2、原生質(zhì)體：指去掉細(xì)胞壁的由質(zhì)膜包裹的裸細(xì)胞。3、植物組織培養(yǎng)：植物的離體器官、組織或細(xì)胞在人工制備的培養(yǎng)基上進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)，并在人工控制的環(huán)境條件下，使其發(fā)育成完整植株的科學(xué)技術(shù)。簡(jiǎn)稱組培5、脫分化：指失去分裂能力的細(xì)胞回復(fù)到分生性狀態(tài)并進(jìn)行分裂，形成無(wú)分化的細(xì)胞即愈傷組織的現(xiàn)象。二、不定項(xiàng)選擇 （每題2 分，共10分）1、第一次提出植物細(xì)胞具有全能性學(xué)說(shuō)的科學(xué)家是_A Morel ；B Haberland ；C Schleid