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1、實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三 植物組織觀察植物組織觀察1掌握植物組織的類型、位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)。掌握植物組織的類型、位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)。2理解植物組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理機(jī)能之間的關(guān)系。理解植物組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理機(jī)能之間的關(guān)系。3熟悉徒手切片、臨時(shí)水封片和壓片技術(shù)。熟悉徒手切片、臨時(shí)水封片和壓片技術(shù)。4通過對(duì)植物根尖細(xì)胞的觀察,掌握有絲分裂各時(shí)期染色通過對(duì)植物根尖細(xì)胞的觀察,掌握有絲分裂各時(shí)期染色 體的形態(tài)特征和動(dòng)態(tài)變化。體的形態(tài)特征和動(dòng)態(tài)變化。二、實(shí)驗(yàn)材料二、實(shí)驗(yàn)材料 活材料:活材料:梨、芹菜、吊竹梅、蔥蘭、橘子、培養(yǎng)好梨、芹菜、吊竹梅、蔥蘭、橘子、培養(yǎng)好 的洋蔥根尖的洋蔥根尖 永久封片:永久封片:南瓜莖橫切、南瓜莖
2、縱切、南瓜莖離析南瓜莖橫切、南瓜莖縱切、南瓜莖離析材料、松針葉橫切、洋蔥根尖縱切、材料、松針葉橫切、洋蔥根尖縱切、洋蔥根尖有絲洋蔥根尖有絲分裂分裂三、實(shí)驗(yàn)用具和試劑三、實(shí)驗(yàn)用具和試劑 光學(xué)顯微鏡、載玻片、蓋玻片、解剖用具等光學(xué)顯微鏡、載玻片、蓋玻片、解剖用具等 鹽酸間苯三酚溶液、蒸餾水、醋酸洋紅鹽酸間苯三酚溶液、蒸餾水、醋酸洋紅1. 1. 分生組織的觀察分生組織的觀察 洋蔥根尖縱切,示頂端分生組織(原分洋蔥根尖縱切,示頂端分生組織(原分生組織、初生分生組織)生組織、初生分生組織)四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容初生分生組織初生分生組織100倍倍400倍倍1)1)生根生根水培法水培法石英砂培養(yǎng)法石英砂培
3、養(yǎng)法根尖有絲分裂的壓片制備根尖有絲分裂的壓片制備2 2)取材)取材當(dāng)洋蔥根尖長(zhǎng)到當(dāng)洋蔥根尖長(zhǎng)到1cm 以以上時(shí),在其有絲分裂高峰上時(shí),在其有絲分裂高峰(上午(上午1011點(diǎn)或晚上點(diǎn)或晚上12 1點(diǎn))取下。點(diǎn))取下。用鋒利的雙面刀片截取生用鋒利的雙面刀片截取生長(zhǎng)良好的植物根尖,長(zhǎng)度長(zhǎng)良好的植物根尖,長(zhǎng)度不超過不超過3mm。3 3)固定)固定用固定劑迅速殺死正在分裂的細(xì)胞,使其盡量保持分裂的狀態(tài)。用固定劑迅速殺死正在分裂的細(xì)胞,使其盡量保持分裂的狀態(tài)??ㄖZ固定液劑,乙醇卡諾固定液劑,乙醇:冰乙酸冰乙酸 = 3:1,固定,固定15min至至1h。 4)保存)保存75%酒精酒精 5 5)解離)解離(1
4、)用酶或鹽酸處理固定后的材料,使正在分裂的細(xì)胞分離,便于壓片。)用酶或鹽酸處理固定后的材料,使正在分裂的細(xì)胞分離,便于壓片。(2)方法:固定的材料蒸餾水沖洗)方法:固定的材料蒸餾水沖洗2遍,放入預(yù)熱的遍,放入預(yù)熱的60的的1mol/L鹽酸鹽酸中,恒溫處理中,恒溫處理5分鐘左右,用蒸餾水沖洗分鐘左右,用蒸餾水沖洗3遍,將材料浸泡在蒸餾水中遍,將材料浸泡在蒸餾水中2小時(shí),小時(shí),將材料中酸洗凈(也可用流水沖洗幾分鐘)。將材料中酸洗凈(也可用流水沖洗幾分鐘)。(3)注意:掌握好解離時(shí)間。)注意:掌握好解離時(shí)間。6 6)染色和壓片)染色和壓片取解離好的根尖,用刀片取解離好的根尖,用刀片截取尖部截取尖部1
5、-2mm放在載玻片中放在載玻片中 間,用解剖針碾碎,并鋪展開。間,用解剖針碾碎,并鋪展開。加一滴醋酸洋紅染液,蓋上蓋玻片。加一滴醋酸洋紅染液,蓋上蓋玻片。用濾紙將多余的染液吸掉。用濾紙將多余的染液吸掉。用解剖針或鉛筆背面輕輕用解剖針或鉛筆背面輕輕敲擊敲擊,使組織或細(xì)胞分散,用濾,使組織或細(xì)胞分散,用濾 紙覆蓋蓋片,用拇指用力紙覆蓋蓋片,用拇指用力平壓平壓蓋玻片使染色體分開,即可蓋玻片使染色體分開,即可 觀察。觀察。7)鏡檢觀察)鏡檢觀察 后期后期前期前期末期末期前期前期中期中期2.2.薄壁薄壁組織的觀察組織的觀察 南瓜莖橫切永久封片南瓜莖橫切永久封片3.3.機(jī)械組織的觀察機(jī)械組織的觀察 南瓜莖
6、橫切永久封片(示厚角組織、厚壁組織)南瓜莖橫切永久封片(示厚角組織、厚壁組織) 芹菜葉柄橫切水封片(徒手切片,示厚角組織)芹菜葉柄橫切水封片(徒手切片,示厚角組織) 梨果肉細(xì)胞水封片(徒手切片,鹽酸梨果肉細(xì)胞水封片(徒手切片,鹽酸- -間苯三酚染色,間苯三酚染色, 示石細(xì)胞)示石細(xì)胞)南瓜莖橫切,南瓜莖橫切, 示全景示全景木質(zhì)部木質(zhì)部導(dǎo)管導(dǎo)管維管束維管束髓腔髓腔皮層厚皮層厚壁組織壁組織薄壁組織薄壁組織韌皮部韌皮部南瓜莖橫切南瓜莖橫切 表皮表皮皮層厚角組織皮層厚角組織皮層厚壁組織皮層厚壁組織皮層薄壁組織皮層薄壁組織維管束維管束南瓜莖橫切,南瓜莖橫切, 示表皮、厚角組織、薄壁組織、厚壁組織示表皮、
7、厚角組織、薄壁組織、厚壁組織皮層厚角組織皮層厚角組織皮層厚壁組織皮層厚壁組織100倍倍400倍倍細(xì)胞壁細(xì)胞壁梨石細(xì)胞梨石細(xì)胞紋孔紋孔4.4.輸導(dǎo)輸導(dǎo)組織的觀察組織的觀察 南瓜莖橫切、縱切(示導(dǎo)管、篩管、伴胞)南瓜莖橫切、縱切(示導(dǎo)管、篩管、伴胞)南瓜莖橫切南瓜莖橫切 表皮表皮皮層厚角組織皮層厚角組織皮層厚壁組織皮層厚壁組織皮層薄壁組織皮層薄壁組織維管束維管束南瓜莖橫切,南瓜莖橫切, 示形成層、韌皮部篩管、木質(zhì)部導(dǎo)管示形成層、韌皮部篩管、木質(zhì)部導(dǎo)管導(dǎo)管導(dǎo)管形成層形成層篩管篩管伴胞伴胞南瓜莖縱切,南瓜莖縱切, 示木質(zhì)部導(dǎo)管、形成層、韌皮部示木質(zhì)部導(dǎo)管、形成層、韌皮部南瓜莖縱切,示木質(zhì)部導(dǎo)管、形成層、韌皮部南瓜莖縱切,示木質(zhì)部導(dǎo)管、形成層、韌皮部導(dǎo)管導(dǎo)管篩管篩管伴胞伴胞南瓜莖離析材料南瓜莖離析材料螺紋螺紋導(dǎo)管導(dǎo)管網(wǎng)紋網(wǎng)紋導(dǎo)管導(dǎo)管5.5.分泌結(jié)構(gòu)的觀察分泌結(jié)構(gòu)的觀察 松針葉橫切永久切片(示樹脂道)松針葉橫切永久切片(示樹脂道) 橘皮徒手切片(示分泌腔)橘皮徒手切片(示分泌腔)100倍倍樹脂道樹脂道分泌腔分泌腔油滴油滴思考題:思考題:1. 在光學(xué)顯微鏡下如何識(shí)別導(dǎo)管和篩管?在光學(xué)顯微鏡下如何識(shí)別導(dǎo)管和篩管?2. 做好根尖壓片的關(guān)鍵是什么?做好根尖壓片的關(guān)鍵是什么?繪圖題:繪圖題:1. 繪南瓜莖縱切中的導(dǎo)管、篩管和伴胞,并注明各部分名稱。繪南瓜莖縱切中的導(dǎo)管、
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