島津液相色譜工作站外標(biāo)法使用解析

1、島津液相色譜工作站外標(biāo)法使用解析外標(biāo)法又稱工作曲線法，首先配制含待測(cè)組分濃度不同的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，如果待測(cè)組分不止一個(gè)，我們也把該標(biāo)準(zhǔn)溶液稱為混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后進(jìn)樣得濃度不同的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的色譜圖。通常利用濃度不同的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的色譜數(shù)據(jù)建立工作曲線和線性方程，然后根據(jù)試樣的色譜數(shù)據(jù)既可以利用工作曲線查得試樣的濃度數(shù)據(jù)，也可利用線性方程計(jì)算試樣中各組分的濃度。在相同色譜條件下，可以用已建立的工作曲線或線性方程進(jìn)行批量樣品分析。一、進(jìn)樣首先進(jìn)濃度不同的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，然后進(jìn)試樣，得標(biāo)樣色譜圖和試樣色譜圖并保存。如果是單次分析（手動(dòng)進(jìn)樣模式），在設(shè)置單次分析條件時(shí)，應(yīng)將樣品瓶架設(shè)置為“

2、-1”，如圖所示，然后按電腦提示進(jìn)樣，待采樣結(jié)束后停在分析。啟動(dòng)或停止單次分析，既可以用助手欄“主項(xiàng)目”下的功能按鈕，也可用數(shù)據(jù)采集窗口中的功能按鈕，如圖所示。通常使用數(shù)據(jù)采集窗口的功能按鈕啟動(dòng)和停止單次分析更為高效。無論是啟動(dòng)或停止單次分析，系統(tǒng)均有“請(qǐng)稍后”的等待提示，務(wù)必等待足夠時(shí)間，方可進(jìn)行下一步操作。二、色譜圖解析得到色譜圖后，套取組分的保留時(shí)間，確定組分的名稱，輸入標(biāo)樣中各組分的濃度是最基本的工作。有時(shí)還要根據(jù)色譜圖的具體情況對(duì)色譜圖進(jìn)行手動(dòng)處理，色譜圖處理通常放在進(jìn)樣完成后，停機(jī)或在流動(dòng)相置換期間進(jìn)行。點(diǎn)擊“LabSolutions Essentia主項(xiàng)目”窗口下的“處理工具”圖

3、標(biāo)，再雙擊右邊窗口中的“再解析”圖標(biāo)，彈出“再解析”（即數(shù)據(jù)處理）窗口。在數(shù)據(jù)管理器選擇文件所在的文件夾，切換到數(shù)據(jù)標(biāo)簽，打開所需的數(shù)據(jù)文件，這里我們選擇打開“化妝品抗菌劑_Std11”數(shù)據(jù)文件，過程如圖所示。1.編輯色譜圖數(shù)據(jù)窗口由色譜圖視圖、結(jié)果視圖、方法視圖組成。方法視圖右上角有“視圖”和“編輯”兩個(gè)圖標(biāo)，只有切換到“編輯”模式，色譜圖數(shù)據(jù)才是可以編輯的，在“視圖”模式下方法視圖里九個(gè)標(biāo)簽下的編輯框是灰色的，只能瀏覽。要手動(dòng)編輯色譜圖，點(diǎn)擊快捷圖標(biāo)欄的“手動(dòng)積分欄”圖標(biāo)是不可少的，上述三個(gè)經(jīng)常使用的圖標(biāo)如圖所示。要編輯色譜圖，單擊“手動(dòng)積分欄”圖標(biāo)，彈出手動(dòng)積分欄，如圖所示。在編輯色譜圖

4、時(shí)，經(jīng)常想去掉不用的色譜峰，這時(shí)可用“去除峰（不校正）”功能按鈕，拖選不要的色譜峰使色譜圖簡(jiǎn)潔，更有針對(duì)性。方法視圖里的九個(gè)標(biāo)簽，最常用的是“積分”、“定量處理”和“化合物”三個(gè)標(biāo)簽?！胺e分”標(biāo)簽如下：一般使用默認(rèn)值，但可通過修改“最小面積/高度”來控制色譜圖中峰顯示的多少?！岸刻幚怼睒?biāo)簽是非常重要的標(biāo)簽。這里我們要用的定量方法是外標(biāo)法，所以定量方法選擇外標(biāo)法，配制的羥苯混酯標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液有3個(gè)，所以校準(zhǔn)曲線最大級(jí)別數(shù)選為3，如果只有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液就設(shè)置為1，根據(jù)實(shí)際情況修改濃度單位和格式，島津工作站的濃度單位設(shè)置更為靈活，其他工作站一般是通過下拉列表框選擇合適的單位，濃度值格式更符合實(shí)際工

5、作的情況，在出報(bào)告時(shí)，我們更關(guān)心數(shù)字的有效位數(shù)。如果只有一個(gè)標(biāo)樣，建議選擇工作曲線過原點(diǎn)，即“零截距”?！盎衔铩睒?biāo)簽更是非常重要的標(biāo)簽。在這里我們要套取色譜峰的保留時(shí)間，這是定性、定量的基礎(chǔ)，獲取了保留時(shí)間后，輸入相應(yīng)的化合物名稱和其在不同標(biāo)樣里的濃度。完成上述必須的編輯修改后，保存修改后的數(shù)據(jù)文件。按相同的方法修改、保存數(shù)據(jù)文件“化妝品抗菌劑_Std12”至“化妝品抗菌劑_Std33”。需要說明的是，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)了3次樣， 所以“化妝品抗菌劑_Std11”至“化妝品抗菌劑_Std13”為第一個(gè)標(biāo)樣的數(shù)據(jù)文件，“化妝品抗菌劑_Std21”至“化妝品抗菌劑_Std23”為第二個(gè)標(biāo)樣的數(shù)據(jù)文件

6、，“化妝品抗菌劑_Std31”至“化妝品抗菌劑_Std33”為第三個(gè)標(biāo)樣的數(shù)據(jù)文件。 至此，所有標(biāo)樣的數(shù)據(jù)文件編輯、修改、保存完成。2.創(chuàng)建校準(zhǔn)曲線島津LabSolutios有一種快速建立校準(zhǔn)曲線的方法。打開保存的數(shù)據(jù)文件“化妝品抗菌劑_std11”，切換到視圖模式，點(diǎn)擊“主項(xiàng)目”下的“應(yīng)用到方法”圖標(biāo)，在彈出的“方法另存為”對(duì)話框中輸入要保存的校準(zhǔn)曲線的名稱，這里我們輸入“化妝品抗菌劑校準(zhǔn)曲線”保存，接著在彈出來的窗口中選中“當(dāng)前設(shè)置”，勾選“數(shù)據(jù)處理參數(shù)”和“系統(tǒng)適用性設(shè)置”，按“確定”按鈕保存。切換到方法標(biāo)簽，可以看到“化妝品抗菌劑校準(zhǔn)曲線”方法文件已經(jīng)存在了。島津把定量分析數(shù)據(jù)的校準(zhǔn)曲

7、線文件稱為方法文件，后綴仍為“.lcm”，因此島津方法文件中可以有儀器參數(shù)方法文件和數(shù)據(jù)分析方法文件，建議把儀器參數(shù)文件和分析數(shù)據(jù)的方法文件分別建立、保存。在方法標(biāo)簽的文件名框中雙擊“化妝品抗菌劑校準(zhǔn)曲線”方法文件，在右面窗口中顯示校準(zhǔn)曲線編輯窗口，校準(zhǔn)曲線窗口由校準(zhǔn)曲線視圖、方法視圖、色譜視圖和數(shù)據(jù)文件編輯窗口組成。數(shù)據(jù)文件的添加與刪除在數(shù)據(jù)文件窗口進(jìn)行。在窗口右上角的數(shù)據(jù)文件窗口右擊數(shù)據(jù)文件下的“級(jí)別1”，在彈出來的菜單列表中單擊“添加”，在彈出來的窗口中選中要添加得數(shù)據(jù)文件，比如“化妝品抗菌劑_Std11”至“化妝品抗菌劑_Std13”，點(diǎn)擊打開，如圖所示。你會(huì)發(fā)現(xiàn)，在級(jí)別1下面就出現(xiàn)了

8、剛才選中的三個(gè)數(shù)據(jù)文件。同理，右擊數(shù)據(jù)文件下的“級(jí)別2”，在彈出來的菜單列表中單擊“添加”，選中要添加得數(shù)據(jù)文件“化妝品抗菌劑_Std21”至“化妝品抗菌劑_Std23”，點(diǎn)擊打開；再右擊數(shù)據(jù)文件下的“級(jí)別3”，在彈出來的菜單列表中單擊“添加”，選中要添加得數(shù)據(jù)文件“化妝品抗菌劑_Std31”至“化妝品抗菌劑_Std33”，點(diǎn)擊打開，可以看到，每個(gè)級(jí)別下面均有了三個(gè)文件了，添加完數(shù)據(jù)文件后的“校準(zhǔn)曲線視圖”窗口會(huì)出現(xiàn)每種物質(zhì)的校準(zhǔn)曲線及相關(guān)信息，如圖所示。點(diǎn)擊化合物下的方向按鈕，可以切換、查看每種化合物的校準(zhǔn)曲線和線性方程、線性相關(guān)系數(shù)R等信息，右側(cè)的色譜圖視圖中會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化，顯示所選中物質(zhì)的色譜峰。 當(dāng)然，有了標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液的色譜數(shù)據(jù)文件后，要?jiǎng)?chuàng)建校準(zhǔn)曲線，還可以直接在助手欄“主項(xiàng)目”中點(diǎn)擊“校準(zhǔn)曲線”圖標(biāo)，然后點(diǎn)擊菜單欄的“文件”/“新建方法文件”，在彈出來的窗口中選擇數(shù)據(jù)文件比如“化妝品抗菌劑_Std11”打開，進(jìn)入校準(zhǔn)曲線窗口，在窗口的數(shù)據(jù)文件小窗口里添加數(shù)據(jù)文件，在下面的方法視圖窗口再對(duì)數(shù)據(jù)文件進(jìn)行編輯、保存，創(chuàng)建校準(zhǔn)曲線。3.分析試樣校準(zhǔn)曲線建好后，便可分析試樣了。校準(zhǔn)曲線的最大好處就是可以進(jìn)行批量樣品分析。島津工作站分析試樣非常簡(jiǎn)單，首先打開要分析的試樣數(shù)據(jù)文件如“化妝品抗菌劑_Smp1.lcd”，然后點(diǎn)擊菜單欄“文件”/“加載方法參數(shù)