細(xì)胞生物學(xué)簡(jiǎn)答題整理

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上1.簡(jiǎn)述G蛋白偶聯(lián)受體所介導(dǎo)的信號(hào)通路的異同G蛋白偶聯(lián)受體所介導(dǎo)信號(hào)通路分為三類：激活離子通道；激活或抑制腺苷酸環(huán)化酶，以cAMP 為第二信使；激活磷脂酶C ，以IP3 和DAG 作為雙信使激活離子通道：當(dāng)受體與配體結(jié)合被激活后，通過偶聯(lián)G蛋白的分子開關(guān)作用，調(diào)控跨膜離子通道的開啟和關(guān)閉，進(jìn)而調(diào)節(jié)靶細(xì)胞的活性。激活或抑制腺苷酸環(huán)化酸的cAMP信號(hào)通路：細(xì)胞外信號(hào)（激素，第一信使）與相應(yīng)G蛋白偶聯(lián)的受體結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞第二信使cAMP的水平變化而引起細(xì)胞反應(yīng)的信號(hào)通路。腺苷環(huán)化酶調(diào)節(jié)胞cAMP的水平，cAMP被環(huán)腺苷酸磷酸二酯酶降解清除。cAMP信號(hào)通路主要是通過活化cA

2、MP依賴性蛋白激酶A (PKA) ，激活靶酶開啟基因表達(dá)，從而表現(xiàn)出不同的效應(yīng)。 蛋白激酶A 由2個(gè)催化亞基和2個(gè)調(diào)節(jié)亞基組成，cAMP的結(jié)合可改變調(diào)節(jié)亞基的構(gòu)象，釋放催化亞基產(chǎn)生活性。蛋白激酶A被激活后，一方面通過對(duì)底物蛋白的磷酸化，引起細(xì)胞對(duì)胞外信號(hào)的快速反應(yīng)；另一方面，其催化亞基可進(jìn)入細(xì)胞核，磷酸化cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白 (CREB) 的絲氨酸殘基。磷酸化的CREB蛋白被激活，它作為基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)蛋白識(shí)別并結(jié)合到靶細(xì)胞的cAMP應(yīng)答元件 (CRE) 啟動(dòng)靶基因的轉(zhuǎn)錄，引起細(xì)胞緩慢的應(yīng)答反應(yīng)。cAMP信號(hào)通路中的緩慢反應(yīng)過程：激素G-蛋白偶聯(lián)受體G-蛋白腺苷酸環(huán)化酶 cAMP cAMP依

3、賴的蛋白激酶A基因調(diào)控蛋白基因轉(zhuǎn)錄。cAMP是由腺苷酸環(huán)化酶 (adenylyl cyclase，AC) 催化合成的，腺苷酸環(huán)化酶為跨膜12次的糖蛋白，在Mg2+或Mn2+存在下能催化ATP生成cAMP；細(xì)胞的環(huán)腺苷酸磷酸二酯酶 (PDE) 可降解cAMP生成5-AMP，導(dǎo)致細(xì)胞cAMP水平下降。因此，細(xì)胞cAMP的濃度受控于腺苷酸環(huán)化酶和PDE的共同作用）。cAMP信號(hào)調(diào)控系統(tǒng)由質(zhì)膜上的5種成分組成：刺激型激素受體 (Rs)、抑制型激素受體 (Ri)、刺激型G蛋白 (Gs)、抑制型G蛋白 (Gi)、腺苷酸環(huán)化酶 (E)。Gs和Gi的、亞基相同，而亞基不同決定了對(duì)激素對(duì)腺苷酸環(huán)化酶的作用不同。

4、Gs的調(diào)節(jié)作用：當(dāng)細(xì)胞沒有受到激素刺激時(shí)，Gs處于非活化狀態(tài)，G蛋白的a亞基與GDP結(jié)合，此時(shí)腺苷酸環(huán)化酶沒有活性；當(dāng)激素配體與Rs受體結(jié)合后，導(dǎo)致受體構(gòu)象改變，暴露出與Gs結(jié)合的位點(diǎn)，配體受體復(fù)合物與Gs結(jié)合，Gs的a亞基構(gòu)象改變，排斥GDP結(jié)合GTP，使G蛋白三聚體解離，暴露出的a亞基與腺苷酸環(huán)化酶結(jié)合，使酶活化，催化ATP環(huán)化為cAMP。隨著GTP水解使a亞基恢復(fù)原來的構(gòu)象并導(dǎo)致與腺苷酸環(huán)化酶解離，終止腺苷酸環(huán)化酶的活化作用。亞基與亞基重新組合，使細(xì)胞回復(fù)到靜止?fàn)顟B(tài)。Gi的調(diào)節(jié)作用：Gi對(duì)腺苷酸環(huán)化酶的抑制作用可通過兩個(gè)途徑：當(dāng)Gi與GTP結(jié)合，Gi的亞基與b亞基解離后，一是通過與腺苷酸

5、環(huán)化酶結(jié)合，直接抑制酶的活性；二是通過亞基復(fù)合物與游離的Gs亞基結(jié)合，阻斷Gs的亞基對(duì)腺苷酸環(huán)化酶的活化。 磷脂酰肌醇雙信使信號(hào)通路：胞外信號(hào)分子與細(xì)胞表面G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合，通過G蛋白 (Gq) 激活質(zhì)膜上的磷脂酶C- (PLC-)，使質(zhì)膜上4,5-二磷酸磷脂酰肌醇 (PIP2) 水解為1,4,5-三磷酸肌醇 (IP3) 和二?；视?(DAG) 兩個(gè)第二信使，使細(xì)胞外信號(hào)轉(zhuǎn)換為胞信號(hào)。IP3通過動(dòng)員細(xì)胞源鈣到細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，使胞質(zhì)中游離Ca2+濃度升高；DAG激活蛋白激酶C (PKC)，活化的PKC使底物蛋白磷酸引起細(xì)胞反應(yīng)。因此該途徑又稱為“雙信使系統(tǒng)”。 IP3-Ca2+信號(hào)通路IP3是

6、一種水溶性小分子，通過與質(zhì)網(wǎng)膜上IP3 控制的Ca2+釋放通道相結(jié)合，將Ca2+釋放到細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，Ca2+可活化各種Ca2+結(jié)合蛋白引起細(xì)胞反應(yīng)。胞質(zhì)中高濃度的游離Ca2+由質(zhì)膜和質(zhì)網(wǎng)膜上的鈣泵轉(zhuǎn)移到細(xì)胞外或質(zhì)網(wǎng)中。DAG-PKC信號(hào)通路二?；视?(DAG) 可活化與質(zhì)膜結(jié)合的蛋白激酶C (PKC)。PKC有兩個(gè)功能區(qū)，一個(gè)是親水的催化活性中心，另一個(gè)是疏水的膜結(jié)合區(qū)。在未受到刺激的細(xì)胞中，PKC主要分布在細(xì)胞溶質(zhì)中，呈非活性構(gòu)象。細(xì)胞受到刺激時(shí)，PIP2水解，質(zhì)膜上DAG積累，細(xì)胞溶質(zhì)中Ca2+濃度升高，使細(xì)胞溶質(zhì)中PKC轉(zhuǎn)位到質(zhì)膜表面，在質(zhì)膜上PKC受Ca2+、DAG和磷脂酰絲氨酸(P

7、S)共同作用而激活，磷酸化底物蛋白的Ser/Thr。PKC可通過至少兩條通路增強(qiáng)基因的轉(zhuǎn)錄：一是PKC活化一條蛋白激酶的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致與DNA特異序列結(jié)合的基因調(diào)控蛋白的磷酸化和激活，進(jìn)而增強(qiáng)特殊基因的轉(zhuǎn)錄；二是PKC磷酸化與基因調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合的抑制蛋白，使細(xì)胞質(zhì)中的基因調(diào)節(jié)蛋白從抑制狀態(tài)下釋放出來，進(jìn)入細(xì)胞核，刺激特定基因轉(zhuǎn)錄。2.胞質(zhì)中動(dòng)力蛋白、驅(qū)動(dòng)蛋白在結(jié)構(gòu)與功能上的異同驅(qū)動(dòng)蛋白(kinesins)：結(jié)構(gòu)：驅(qū)動(dòng)蛋白是由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈構(gòu)成的四聚體；有一對(duì)球形的頭，與微管結(jié)合并具有水解ATP為驅(qū)動(dòng)蛋白移動(dòng)提供能量；有一個(gè)扇形的尾，是貨物結(jié)合部位；頭部通過頸部、螺旋狀的螺旋桿部與

8、扇形尾部相連。功能：大多數(shù)驅(qū)動(dòng)蛋白的馬達(dá)結(jié)構(gòu)域位于N端，驅(qū)動(dòng)物質(zhì)沿微管從微管(-)端向微管(+)端運(yùn)行；細(xì)胞中負(fù)責(zé)GCPM的膜泡運(yùn)輸；神經(jīng)細(xì)胞中負(fù)責(zé)向神經(jīng)軸突末梢的正向運(yùn)輸；部分驅(qū)動(dòng)蛋白的馬達(dá)結(jié)構(gòu)域位于重鏈的C端，驅(qū)動(dòng)物質(zhì)從微管(+) 端向(-)端運(yùn)行，如ERGC ；每一步長度大約為8nm，正好是一個(gè)微管二聚體的長度；移動(dòng)的速度與ATP的濃度有關(guān)，速度高時(shí)，可達(dá)到每秒900nm。動(dòng)力蛋白(dyneins)：結(jié)構(gòu)：含2條或3條重鏈構(gòu)成的球形頭部（含有馬達(dá)結(jié)構(gòu)域），多條輕鏈構(gòu)成的尾部，還有一些中間鏈介于重鏈和輕鏈間。動(dòng)力蛋白的馬達(dá)結(jié)構(gòu)域位于重鏈的C端，軸絲動(dòng)力蛋白具有3個(gè)頭部馬達(dá)結(jié)構(gòu)域，胞質(zhì)動(dòng)力蛋

9、白具有2個(gè)頭部馬達(dá)結(jié)構(gòu)域。與胞質(zhì)動(dòng)力蛋白相結(jié)合的動(dòng)力蛋白激活復(fù)合體，介導(dǎo)胞質(zhì)動(dòng)力蛋白與“貨物”間的結(jié)合。功能：動(dòng)力蛋白沿微管從微管(+)端向微管(-)端運(yùn)行；運(yùn)輸小泡和膜結(jié)合細(xì)胞器向細(xì)胞中心運(yùn)輸(PM GC，ER GC)；與染色體著絲點(diǎn)上動(dòng)粒和有絲分裂紡錘體的共定位密切相關(guān)，也是細(xì)胞分裂后期染色體分離動(dòng)力的來源。兩種馬達(dá)蛋白都是單方向運(yùn)輸物質(zhì)，驅(qū)動(dòng)蛋白：從(-)端向(+)端的運(yùn)輸，動(dòng)力蛋白：從(+)端向(-)端運(yùn)輸；運(yùn)輸方式為逐步行進(jìn)，驅(qū)動(dòng)力是ATP，每消耗一分子ATP行進(jìn)一步。3.試述caspase在細(xì)胞凋亡中外源途徑及源途徑的異同Caspase依賴性的細(xì)胞凋亡主要通過兩條途徑引發(fā)：細(xì)胞表面

10、死亡受體起始的外源途徑和線粒體起始的源途徑。細(xì)胞表面死亡受體介導(dǎo)的外源性細(xì)胞凋亡：死亡受體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡起始于死亡配體與受體的結(jié)合。死亡配體主要是腫瘤壞死因子 (TNF) 超家族成員；死亡受體為跨膜蛋白，TNF-R1和Fas(Apo-1, CD95)是死亡受體家族的代表成員，其胞外具有半胱氨酸富集的重復(fù)區(qū)，胞具有死亡結(jié)構(gòu)域 (death domain，DD)。配體與受體結(jié)合，受體構(gòu)象改變發(fā)生聚合，聚合的Fas受體通過胞死亡結(jié)構(gòu)域 (DD) 招募同樣具有死亡結(jié)構(gòu)域的接頭蛋白FADD和Caspase-8酶原，形成死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合物DISC(death inducing signaling comp

11、lex)。Caspase-8酶原在復(fù)合物過自身切割而被激活，進(jìn)而切割執(zhí)行者Caspase-3酶原，產(chǎn)生有活性的Caspase-3，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。Caspase-8還通過切割Bcl-2家族成員Bid將凋亡信號(hào)傳遞給線粒體，引發(fā)凋亡的源途徑，使凋亡信號(hào)進(jìn)一步擴(kuò)大。線粒體起始的源性細(xì)胞凋亡：當(dāng)細(xì)胞受到部或外部的死亡信號(hào)刺激時(shí)，細(xì)胞色素c從線粒體釋放到胞質(zhì)作為通路的起始，釋放的細(xì)胞色素c與胞質(zhì)中的Apaf-1(apoptosis protease activating factor) 結(jié)合。Apaf-1的N端具有Caspase募集結(jié)構(gòu)域(CARD)，它與細(xì)胞色素c結(jié)合后發(fā)生自身聚合，并進(jìn)一步通過CAR

12、D結(jié)構(gòu)域招募細(xì)胞質(zhì)中的Caspase-9酶原，形成大的凋亡復(fù)合體(apoptosome)。Caspase-9酶原在凋亡復(fù)合體中發(fā)生自身切割而活化，活化的Caspase-9再進(jìn)一步激活執(zhí)行者Caspase-3和Caspase-7酶原，引起細(xì)胞凋亡。線粒體外膜釋放通透性的改變主要受到Bcl-2(B-cell lymphoma gene 2) 家族的調(diào)控。Bcl-2家族成員可分為3個(gè)亞族：Bcl-2亞族，包括bcl-2、bcl-xl、Bcl-w等可通過抑制線粒體釋放Cyt c，進(jìn)而抑制細(xì)胞凋亡；Bax亞族，包括Bax、Bak等通過改變線粒體膜透性促使Cyt c的釋放，促進(jìn)細(xì)胞凋亡；BH3亞族，包括B

13、ad、Bid、Bik等充當(dāng)細(xì)胞凋亡信號(hào)的“感受器”，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。細(xì)胞接受凋亡信號(hào)后，促凋亡因子Bax和Bak發(fā)生寡聚化，從細(xì)胞質(zhì)中轉(zhuǎn)移到線粒體外膜上，并與膜上的電壓依賴性陰離子通道相互作用，促進(jìn)cyt c釋放從而引起細(xì)胞凋亡。凋亡抑制因子Bcl-2和Bcl-xl能與Bax/Bak形成異二聚體，通過抑制Bax和Bak的寡聚化來抑制線粒體膜通道的開啟。4.溶酶體的發(fā)生初級(jí)溶酶體是在高爾基體的反面以出芽的形式形成，形成過程如下：rER合成溶酶體蛋白進(jìn)入質(zhì)網(wǎng)腔進(jìn)行N-連接的糖基化修飾進(jìn)入高爾基體順面膜囊磷酸轉(zhuǎn)移酶識(shí)別溶酶體水解酶的信號(hào)斑 在N-乙酰葡糖胺磷酸轉(zhuǎn)移酶和N-乙酰葡糖胺磷酸糖苷酶作用下溶酶

14、體水解酶形成M6P與反面膜囊上的M6P受體結(jié)合通過網(wǎng)格蛋白包裝成有被囊泡出芽脫去網(wǎng)格蛋白后與晚期胞體融合胞體pH降低使水解酶與M6P受體脫離并去磷酸后形成轉(zhuǎn)運(yùn)泡，經(jīng)成熟后形成成熟的溶酶體。溶酶體的形成可能存在多條途徑。依賴于M6P的分選途徑的效率不高，部分溶酶體酶通過運(yùn)輸小泡直接分泌到細(xì)胞外。在細(xì)胞質(zhì)膜上也存在依賴鈣離子的M6P受體，同樣可與胞外的溶酶體酶結(jié)合，通過受體介導(dǎo)的吞作用，將酶送至前溶酶體中，M6P受體返回細(xì)胞質(zhì)膜，反復(fù)使用。還存在不依賴于M6P的分選途徑（如酸性磷酸酶、分泌溶酶體的perforin和granzyme)。5.舉例說明CDK激酶在細(xì)胞周期是如何實(shí)現(xiàn)調(diào)控的在細(xì)胞周期的后期

15、逐漸合成、至周期的中間階段突然消失的周期性存在蛋白，成為細(xì)胞周期蛋白。細(xì)胞周期蛋白可分為3類：S期周期蛋白，M期周期蛋白，G1期周期蛋白。S期周期蛋白為cyclin A，在S期開始表達(dá)，到中期時(shí)開始消失；M期周期蛋白為cyclin B，在S期開始表達(dá)，在G2/M期到達(dá)峰值，中期到后期轉(zhuǎn)換時(shí)消失。G1期周期蛋白在脊椎動(dòng)物中位cyclin C、D、E，在酵母中為Cln1、Cln2、Cln3，他們?cè)贕1期開始表達(dá)，進(jìn)入S期后消失。能與細(xì)胞周期蛋白結(jié)合并將周期蛋白作為其調(diào)節(jié)亞單位、進(jìn)而表現(xiàn)出蛋白激酶活性的蛋白統(tǒng)稱為細(xì)胞周期蛋白依賴性蛋白激酶，簡(jiǎn)稱為CDK激酶。細(xì)胞由G1期向S期轉(zhuǎn)化主要受G1期CDK激

16、酶控制。哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，與G1期細(xì)胞周期蛋白結(jié)合的CDK激酶主要包括CDK2、CDK4和CDK6。cyclin D主要與CDK4和CDK6結(jié)合并調(diào)節(jié)后者活性；cyclin A常被劃分為M期周期蛋白，但它也可與CDK2結(jié)合使后者表現(xiàn)激酶活性，說明cyclin A可能參與調(diào)控G1/S期轉(zhuǎn)化過程。cyclin E在G1/S期與CDK2結(jié)合，呈現(xiàn)CDK2的激酶活性促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)入S期。G2/M期主要受CDK1激酶調(diào)控，CDK1激酶即MPF,或P34cdc2蛋白和細(xì)胞周期蛋白cyclin B組成。CDK1蛋白本身不具有蛋白激酶的活性。當(dāng)cyclin A/B含量積累到一定值時(shí)，兩者相互結(jié)合成復(fù)合體，結(jié)合cyc

17、lin的CDK1被Wee1將Thr14和Tyr15磷酸化，并被CDK激活激酶將Thr161磷酸化。在M期，Wee1的活性下降，cdc25使CDK1的Thr14和Tyr15去磷酸化，其激酶活性才能表現(xiàn)出來。在G2/M期，cyclin A、cyclin B與CDK1結(jié)合，CDK1使底物蛋白磷酸化，如將組蛋白H1磷酸化導(dǎo)致染色體凝縮，核纖層蛋白磷酸化使核膜解體。在M期，當(dāng)MPF活性達(dá)到最高時(shí)，激活后期促進(jìn)因子APC，將泛素連接在cycli A和cyclin B上，通過多泛素化作用，使它們被蛋白酶體降解，完成一個(gè)細(xì)胞周期。以MPF為例闡述：MPF是一種使多種底物磷酸化的蛋白激酶，即CDK1激酶，由p3

18、4蛋白和周期蛋白B結(jié)合而成。CDK1激酶活性首先依賴于周期蛋白B含量的積累。周期蛋白B一般在G1期的晚期開始合成，通過S期，其含量不斷增加，達(dá)到G2期，其含量達(dá)到最大值，CDK1激酶的活性隨著周期蛋白B濃度變化而變化。CDK1激酶的活化還受到激酶與磷酸酶的調(diào)節(jié)?；罨腃DK1激酶可使更多的CDK1激酶活化。隨著周期蛋白B含量達(dá)到一定程度，CDK1激酶活性開始出現(xiàn)，到G2晚期階段，CDK1激酶活性達(dá)到最大值并一直維持到M期的中期階段?；罨腃DK1激酶促使分裂期細(xì)胞在分裂前期執(zhí)行下列生化事件：（1）染色質(zhì)開始濃縮形成有絲分裂染色體；（2）細(xì)胞骨架解聚，有絲分裂紡錘體開始組裝；（3）高爾基復(fù)合體、

19、質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器解體，形成小的膜泡。在有絲分裂的后期，活化的后期促進(jìn)因子APC主要介導(dǎo)兩類蛋白降解：后期抑制因子和有死分裂周期蛋白。前者維持姐妹染色單體粘連，抑制后期啟動(dòng)；后者的降解意味著CDK1激酶失去活性，有死分裂即將結(jié)束，即染色體開始去凝集，核膜重建。6.EGF通過受體酪氨酸激酶進(jìn)行信號(hào)傳導(dǎo)過程表皮生長因子與其受體表皮生長因子受體結(jié)合后可引發(fā)一系列細(xì)胞變化，最終使細(xì)胞發(fā)生分化或增殖。表皮生長因子受體是一種受體酪氨酸蛋白激酶，而受體酪氨酸蛋白激酶RasMAPK級(jí)聯(lián)途徑是表皮生長因子刺激信號(hào)傳遞到細(xì)胞核的最主要途徑。它由以下成員組成：表皮生長因子受體含有SH2結(jié)構(gòu)域的接頭蛋白(如Grb2)鳥嘌呤

20、核苷酸釋放因子(如SOS)Ras蛋白MAPKKK(如Raf1)MAPKKMAPK轉(zhuǎn)錄因子等EGF受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程1. 受體酪氨酸激酶的激活在靜息狀態(tài) RTK 活性很低，當(dāng)配體與受體結(jié)合時(shí)引起受體二聚化后，激活受體的蛋白酪氨酸激酶活性，進(jìn)而在二聚體彼此交叉磷酸化，引發(fā)受體自磷酸化。激活的RTK 的磷酸酪氨酸殘基可被含SH2 結(jié)構(gòu)域的胞信號(hào)蛋白所識(shí)別，啟動(dòng)信號(hào)傳導(dǎo)。2. RTK信號(hào)的傳遞RTK結(jié)合蛋白都具有高度保守的結(jié)構(gòu)域SH結(jié)構(gòu)域 (Src homolog region，包括SH2和SH3)。含有SH2的蛋白可直接與活化的酪氨酸蛋白激酶受體結(jié)合并被磷酸化；SH3結(jié)構(gòu)域結(jié)合富含脯氨酸的基序，

21、不能直接與受體酪氨酸殘基結(jié)合，它需通過細(xì)胞的接頭蛋白將信號(hào)向下傳遞。被磷酸化的胞蛋白包括兩類：一類是信號(hào)通路中有關(guān)的酶，如：GTP酶活化蛋白 (GAP)、磷脂酶C- (PLC-)、3-磷酯酰肌醇激酶(PI3K)、酪氨酸磷酸酶(SyP)以及Src類的非受體酪氨酸蛋白激酶等。另一類是接頭蛋白，如生長因子受體結(jié)合蛋白-2 (GRB-2)，其作用是偶聯(lián)活化受體與其他信號(hào)分子，參與構(gòu)成信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)復(fù)合物，但它本身沒有酶活性，也不傳遞信號(hào)。3. Ras蛋白的激活及Ras-MAPK通路生長因子受體結(jié)合蛋白GRB2，具有SH2 結(jié)構(gòu)域，可直接與活化受體特異性磷酸酪氨酸殘基結(jié)合，GRB2 還具有兩個(gè)SH3 結(jié) 構(gòu)域

22、，能結(jié)合并激活另一種胞質(zhì)蛋白Sos (Son of sevenless）。Sos 蛋白具有鳥苷酸交換因子活性，它與Ras 結(jié)合導(dǎo)致構(gòu)象改變，使非活性的 Ras-GDP 轉(zhuǎn)換成有活性的Ras-GTP。Ras-MAPK通路：(1). 活化的Ras蛋白將作為MAP激酶激酶的激酶 (MAPKKK)的Raf蛋白的Ser/Thr殘基磷酸化，使Raf蛋白活化，將短壽命Ras-GTP信號(hào)事件轉(zhuǎn)變?yōu)殚L壽命的信號(hào)事件；(2). Raf 蛋白使MAP激酶的激酶 (MAPKK) (MEK)發(fā)生磷酸化而激活；(3). MAPKK是一種雙重特異性的蛋白激酶，只能催化其唯一底物MAPK的Thr和Tyr同時(shí)被磷酸化。(4).

23、 活化的MAPK進(jìn)入細(xì)胞核，可使許多底物蛋白的Ser/Thr殘基磷酸化，包括調(diào)節(jié)細(xì)胞周期和細(xì)胞分化的特異性蛋白表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子，從而改變它們的活性。概述：表皮生長因子與受體結(jié)合后，可以使受體發(fā)生二聚體化，從而改變了受體的構(gòu)象，使其中的蛋白酪氨酸激酶活性增強(qiáng)，受體自身的酪氨酸殘基發(fā)生磷酸化，磷酸化的受體便形成了與含SH2結(jié)構(gòu)域的蛋白分子Grb2結(jié)合的位點(diǎn)，導(dǎo)致Grb2與受體的結(jié)合。Grb2中有兩個(gè)SH3結(jié)構(gòu)域，該部位與一種稱為SOS的鳥苷酸交換因子結(jié)合，使之活性改變，SOS則進(jìn)一步活化Ras，激活的Ras作用于MAPK激活系統(tǒng)，導(dǎo)致ERK的激活。最后ERK轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核，導(dǎo)致某些轉(zhuǎn)錄因子的活性改變從

24、而改變基因的表達(dá)狀態(tài)及細(xì)胞的增殖與分化過程。7.信號(hào)肽假說分泌蛋白在N端含有一信號(hào)肽，它指導(dǎo)分泌性蛋白到ER膜上合成，然后在信號(hào)肽引導(dǎo)下蛋白質(zhì)邊合成邊通過ER膜上的通道進(jìn)入ER腔，在蛋白質(zhì)合成結(jié)束之前信號(hào)肽被切除。信號(hào)肽指導(dǎo)蛋白質(zhì)的共翻譯轉(zhuǎn)運(yùn)途徑。信號(hào)肽位于蛋白質(zhì)的N端，通常為1626個(gè)氨基酸殘基，包括疏水核心區(qū)、C端和N端三個(gè)區(qū)域構(gòu)成。 通常指導(dǎo)分泌蛋白進(jìn)入質(zhì)網(wǎng)腔，在完成蛋白質(zhì)合成后被信號(hào)肽酶切除。血清白蛋白和HIV-1型病毒的gp160信號(hào)肽兩者的N端區(qū)長度明顯不同。蛋白質(zhì)首先在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)游離核糖體上起始合成() ，合成約80個(gè)多肽暴露出信號(hào)肽時(shí)，SRP識(shí)別并結(jié)合信號(hào)肽，翻譯停止() ，直

25、到接觸到rER膜，核糖體附著于ER上的SRP受體(?？康鞍?() 。隨后，信號(hào)肽結(jié)合到轉(zhuǎn)移器（移位子）上，轉(zhuǎn)移器打開通道到ER腔，SRP從其受體上釋放，多肽鏈通過通道()。這些過程中需要結(jié)合和水解GTP提供能量。新生多肽鏈進(jìn)入ER腔后，信號(hào)肽被信號(hào)肽酶切除()，蛋白質(zhì)繼續(xù)合成并折疊為成熟蛋白，轉(zhuǎn)運(yùn)器關(guān)閉()。8.質(zhì)子泵類型利用ATP水解提供的能量驅(qū)動(dòng)離子或小分子逆濃度梯度或電化學(xué)梯度進(jìn)行跨膜主動(dòng)運(yùn)輸，類似于“泵”的作用，故也稱為ATPase。當(dāng)運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)為離子時(shí)常稱為離子泵(Ion pump)。這種主動(dòng)運(yùn)輸方式直接利用水解ATP提供能量，所以又稱為初級(jí)主動(dòng)運(yùn)輸。1. P-型離子泵所有的P-型離

26、子泵都有2個(gè)獨(dú)立的催化亞基，具有ATP結(jié)合位點(diǎn)；絕大多數(shù)還具有2個(gè)起調(diào)節(jié)作用的小的b亞基。在轉(zhuǎn)運(yùn)離子過程中，至少一個(gè)亞基發(fā)生磷酸化和去磷酸化反應(yīng)。主要類型：A. Na+K+ 泵；B. Ca2+ 泵；C. P型質(zhì)子泵A. Na+K+ 泵結(jié)構(gòu)：由2個(gè)和2個(gè)亞基組成的四聚體。為多次跨膜的大亞基，具有Na+、K+和ATP結(jié)合位點(diǎn)；為單次跨膜的小亞基，協(xié)助亞基折疊。工作原理：細(xì)胞側(cè)亞基與Na+結(jié)合激活了ATP酶活性，使ATP水解，亞基的Asp殘基被磷酸化，引起亞基構(gòu)象改變，將Na+泵出細(xì)胞；同時(shí)，細(xì)胞外K+與亞基的另一個(gè)位點(diǎn)結(jié)合，使其去磷酸化，亞基構(gòu)象再度發(fā)生改變，將K+泵入細(xì)胞，完成整個(gè)循環(huán)。每次循環(huán)

27、消耗1個(gè)ATP，泵出3個(gè)Na+ ，泵入2個(gè)K+B. Ca2+ 泵結(jié)構(gòu)：是由1000個(gè)氨基酸殘基組成的多肽構(gòu)成的跨膜蛋白，每一泵單位中有10個(gè)跨膜a螺旋，側(cè)有兩個(gè)大的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。工作原理：是Ca2+ATP酶，工作原理與Na+K+泵類似，每循環(huán)1次消耗1個(gè)ATP，將2個(gè)Ca 2+泵出細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)到細(xì)胞外或肌質(zhì)網(wǎng)。C. P型質(zhì)子泵結(jié)構(gòu)：P型H+ 泵的結(jié)構(gòu)與Na+K+ 泵結(jié)構(gòu)類似。工作原理：P型H+ 泵的工作原理與Na+-K+泵的工作原理相同，在的運(yùn)輸過程中涉及亞基的磷酸化和去磷酸化，利用水解ATP所釋放的能量將H+泵出細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。2. V型質(zhì)子泵和F型質(zhì)子泵結(jié)構(gòu)和工作原理與ATP合酶類似。F型H+泵存在

28、于線粒體膜、植物類囊體膜和細(xì)菌質(zhì)膜上，主要用于合成ATP (ATP合酶)。3.ABC超家族所有ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白都共享一種由4個(gè)“核心”結(jié)構(gòu)域組成：2個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域(T)，形成運(yùn)輸分子的跨膜通道；2個(gè)胞質(zhì)側(cè)ATP結(jié)合域(A)。ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的每個(gè)T結(jié)構(gòu)域由6個(gè)跨膜a螺旋組成，形成跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)通道并決定每個(gè)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白底物的特異性。9.核孔復(fù)合體結(jié)構(gòu)與功能胞質(zhì)環(huán) (cytoplasmic ring)： 又稱外環(huán)，核孔邊緣胞質(zhì)面一側(cè)環(huán)上有8個(gè)細(xì)胞質(zhì)顆粒和8條纖維伸向胞質(zhì)；核質(zhì)環(huán) (nuclear ring)：又稱環(huán)，核孔邊緣核質(zhì)面上8條纖維伸向核，且在纖維末端形成一個(gè)小環(huán)，使核質(zhì)環(huán)形成類似“捕魚籠”的核籃結(jié)構(gòu)。輻 (spoke)：由核孔邊緣伸向核孔中央，呈輻射狀八對(duì)稱，連接外環(huán)。由以下三部分組成：柱狀亞單位 (column subunit)：連接胞質(zhì)環(huán)與核質(zhì)環(huán)腔亞單位 (lumin