紅細胞膜蛋白結(jié)構(gòu)測定_第1頁
紅細胞膜蛋白結(jié)構(gòu)測定_第2頁
紅細胞膜蛋白結(jié)構(gòu)測定_第3頁
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文檔簡介

1、紅細胞膜蛋白結(jié)構(gòu)測定（紅細胞抗體）方法流式細胞儀 (BeckmanCoulter，貝克曼庫爾特 )原理：直接免疫熒光法。 FITC 標(biāo)記的各型多克隆抗體，加到全血中，與紅細胞膜上的相應(yīng)的 IgG-Fc 片段結(jié)合，經(jīng)過洗滌 ( 和固定 ) 等步驟后，在流式細胞儀上進行分析。標(biāo)本采集與處理受檢者的準(zhǔn)備檢查對象生活飲食處于日常狀態(tài)，空腹采血。采集部位靜脈采血抗凝劑EDTA或肝素抗凝血要求1樣本量至少 1ml。2 樣本應(yīng)在采集后 6 小時內(nèi)處理，冷凍的標(biāo)本不能用。3 溶血樣本不能用。試劑品牌劑型規(guī)格貯存聯(lián)科成分1 ：單克隆抗體液體1ML282：全血溶血試劑液體A：甲酸液體70ML室溫B：碳酸鈉等液體3

2、2ML室溫C：多聚甲醛液體14ML室溫3：鞘液液體20L室溫4：清洗液液體5L室溫5：熒光微球液體10ML2-8質(zhì)控品BEKAMANCOULTER產(chǎn)品，未開瓶的試劑于 2-8 保存，可在有效期內(nèi)保持穩(wěn)定，稀釋的試劑于 2-8 可穩(wěn)定 2 周；每天校準(zhǔn)一次：遇特殊情況隨時進行校準(zhǔn)。儀器BeckmanCoulter EPICS XL/FC500/Altra操作：1) 按照要求，分別向已編好號的試管中加入10 ul單克隆抗體和同型對照(IgG-FITC)2) 分別向試管中加入混勻的 100u1 抗凝血（ 1： 200 稀釋后）。3) 混勻，避光，室溫孵育 20-30 分鐘4) 上機測樣報告結(jié)果報告百分數(shù)操作性能精密度批內(nèi)五次重復(fù) CV<2靈敏度500 1000 個熒光素分子參考值IgA<2.78%IgG<2.98%IgM<2.52%IgD<

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