市售紅花質(zhì)量評(píng)價(jià)

1、 哈爾濱商業(yè)大學(xué)中藥鑒定學(xué)大實(shí)驗(yàn)（論文） 市售中藥紅花質(zhì)量評(píng)價(jià)研究 學(xué) 生 姓 名 * * * * 指 導(dǎo) 教 師 * * * 專 業(yè) 制藥工程 學(xué) 院 藥學(xué)院 成績(jī)：2012年 3 月 20日摘 要目的：評(píng)價(jià)市售三種紅花（分別為人民同泰藥店、紅旗藥店、海暉藥店出售）的質(zhì)量及其總黃酮含量的測(cè)定方法：1.性狀鑒別評(píng)價(jià)市售紅花的質(zhì)量2.顯微鑒別評(píng)價(jià)市售紅花的質(zhì)量3.紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定市售紅花中總黃酮的含量結(jié)果：1. 通過(guò)性狀鑒別、顯微組織、雜質(zhì)的檢驗(yàn)，觀察到了三種紅花的性狀和組織特征。在清水中浸泡一段時(shí)間后都為水染金黃不退色，且三種紅花都有少量顆粒狀雜質(zhì)；2. 在顯微鑒別中，出現(xiàn)了明顯的組織

2、特征（花粉粒，花柱碎片，花瓣頂端細(xì)胞和分泌管碎片），還有少量的黑色雜質(zhì)；通過(guò)色，味，質(zhì)的經(jīng)驗(yàn)鑒別，紅花質(zhì)量良好；3.通過(guò)紫外分光度法測(cè)定三種紅花的總黃酮含量分別是：人民同泰為0.62%，紅旗為1.4%，海暉為0.98%。結(jié)論：上述方法操作簡(jiǎn)便、可行, 可供評(píng)價(jià)市售紅花的質(zhì)量以及總黃酮含量的測(cè)定。關(guān)鍵詞：市售紅花；總黃酮含量；紫外分光光度法。1 緒 論1.1論文主要內(nèi)容評(píng)價(jià)三種市售紅花的質(zhì)量及其總黃酮含量的測(cè)定1.2論文研究目的和意義紅花是臨床中常用的一種中藥材，由于其價(jià)格較高，市場(chǎng)上不法分子不顧藥材的質(zhì)量，不擇手段，造假作假。醫(yī)療機(jī)構(gòu)及中藥生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)給予注意。目前，常見(jiàn)的摻偽手法主要有以下四種

3、: 一是以添加細(xì)沙、滑石粉來(lái)增加其重量。二是用其他花染色后摻入紅花中。三是用一部分陳貨( 顏色暗、黑) 摻入好的紅花中，以次充好。四是摻糖( 藥材市場(chǎng)習(xí)稱搓糖) 。黃酮類化合物是紅花中最主要的化學(xué)成分之一。本文建立采用分光光度法測(cè)定紅花中總黃酮的含量，精密度、穩(wěn)定性良好，結(jié)果可信，為紅花中總黃酮的含量測(cè)定提供了一種簡(jiǎn)便可行的方法，為紅花的質(zhì)量控制提供了評(píng)價(jià)手段。1.3 紅花概述 紅花是菊科草本植物，為不帶子房的管狀花，長(zhǎng)12cm，表面紅黃色或紅色；花冠筒細(xì)長(zhǎng)，先端5裂，裂片狹條形，長(zhǎng)58mm；雄蕊5，花藥聚合成筒狀，黃白色。柱頭長(zhǎng)圓柱形，頂端微分叉。質(zhì)柔軟。氣微香，味微苦。含有紅花甙、紅花醌甙

4、、紅花多糖、棕櫚酸、肉桂酸和豐富的維生素E等多種化學(xué)成分，具有活血、止痛、降血脂、降血清膽固醇、防止動(dòng)脈硬化等功效，臨床上廣泛用于治療冠心病等心腦血管疾病。.1.3.1 紅花的化學(xué)成分黃酮類化合物：包括紅花黃色素（SY），羥基紅花黃色素A（HSYA）等脂肪酸：紅花中含有棕櫚酸、肉豆蔻酸、月桂酸等不飽和脂肪酸.紅花多糖：該成分是由葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、和中乳糖以B鍵連接的一種多醣體。 紅花的藥理作用 抗炎作用：SY對(duì)甲醛性大鼠足腫脹、對(duì)組胺引起的大鼠皮膚毛細(xì)血管通透量增加及大鼠棉球肉芽腫形成，均有明顯的抑制作用。1.3.2.2 鎮(zhèn)痛和鎮(zhèn)靜作用：SY對(duì)小鼠有較強(qiáng)而持久的鎮(zhèn)痛效用，對(duì)銳痛（熱刺痛）

5、及鈍痛（化學(xué)性刺痛）均有效。 耐缺氧作用：SY有顯著的耐缺氧、抗疲勞作用，能明顯延長(zhǎng)動(dòng)物的存活時(shí)間，并增加離體家兔心臟和心肌缺氧的冠脈流量，改善心臟的缺氧、缺血病理狀態(tài)。 紅花的臨床應(yīng)用1.3.3.1 降低血壓、血脂：紅花煎劑對(duì)狗、貓均有較持久的降低血壓的作用?？诜t花油可治療高膽固醇血癥、高甘油三酯血癥及高非脂化脂肪酸血癥。1.3.3.2 興奮子宮：紅花煎劑對(duì)小白鼠、豚鼠、家兔、狗、貓、之離體和在體子宮均有顯著的興奮作用。2 儀器與藥品2.1 實(shí)驗(yàn)儀器LIV-2120c型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 尤尼柯儀器總公司N1000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 EYELA上海愛(ài)朗儀器有限公司電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科技有

6、限公司BS110S型電子分析天平 北京塞多利斯天平有限公司2.2 實(shí)驗(yàn)試劑與藥品蘆丁對(duì)照品（中國(guó)生物制品鑒定所）1號(hào)紅花（購(gòu)自人民同泰藥店）；2號(hào)紅花（購(gòu)自紅旗藥店）；3號(hào)紅花（購(gòu)自海暉藥店）。無(wú)水乙醇（分析純）、石油醚（分析純）、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁甲醇，蒸餾水。3 方法與結(jié)果3.1 性狀鑒別評(píng)價(jià)市售紅花的質(zhì)量正品紅花性狀：不帶子房的管狀花，黃紅色或紅色，花冠筒細(xì)長(zhǎng)，先端5裂，花藥聚合成筒狀，黃白色；柱頭長(zhǎng)圓柱形，露出于花藥筒外，頂端微分叉。質(zhì)輕，柔軟。氣微香，味微苦；手感柔軟；質(zhì)地柔然，口嘗微苦；顏色鮮艷，將花浸水中，水染成金黃色而花不退色。偽品或摻偽紅花性狀：表面橙黃色、深紅色或鮮

7、紅色，黃色不明顯，大部分表面粘附有細(xì)小的紅色顆粒狀物質(zhì),多數(shù)粘結(jié)成團(tuán),疏松性差，手握無(wú)彈性,質(zhì)較重,濕潤(rùn)感明顯,有異樣氣味(溴氣味)。用開(kāi)水一沖即渾濁，放置后有白色沉淀析出用手拍打后手上會(huì)留有一部分沙粒；摻糖紅花成團(tuán)塊，口嘗先天后苦；顏色發(fā)紅或較暗淡，用水泡后，水變成紅色。另外，把紅花放入水杯中，加入熱水，輕輕攪拌，放置一會(huì)兒。把上半部分倒掉，這時(shí)水杯底如有雜物，系摻偽或含雜質(zhì)。如用其他花染色者，上面顏色會(huì)洗掉，露出原形。實(shí)驗(yàn)中性狀鑒別的紅花結(jié)果：疏松性較好，手握有較好的彈性，質(zhì)輕，無(wú)明顯濕潤(rùn)感，用開(kāi)水沖后無(wú)明顯渾濁現(xiàn)象，但有極少許泥沙顆粒。3.2 顯微鑒別評(píng)價(jià)市售紅花的質(zhì)量正品紅花的顯微特征

8、（1）花粉粒 類球形或長(zhǎng)球形，具3個(gè)萌發(fā)孔，外壁有刺齒及疣狀雕紋。（2）花柱碎片 表皮細(xì)胞分化成單細(xì)胞毛，呈圓錐形，先端尖。（3）花瓣頂端細(xì)胞 表面觀呈長(zhǎng)方形或長(zhǎng)條形，頂端表皮細(xì)胞呈短絨毛狀。（4）分泌管碎片 呈長(zhǎng)管道狀，胞腔內(nèi)充滿黃棕色至紅棕色分泌物。 偽品紅花的顯微特征 粉末呈淡橙黃色。淀粉粒眾多,均為單粒,偶見(jiàn)復(fù)粒;呈類圓形、不規(guī)則形或扁圓形。不規(guī)則的結(jié)晶體眾多,大小不等,有的呈不規(guī)則的塊狀,邊緣不整齊,多層重疊,有立體感；或呈不規(guī)則的顆粒狀物;或呈多梭形,近三角形?？梢?jiàn)紅色或鮮紅色的塊狀物。實(shí)驗(yàn)中的顯微測(cè)定結(jié)果花粉?；ㄖ槠ò觏敹思?xì)胞分泌管碎片3.3紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定市售紅花中

9、總黃酮的含量3.1 對(duì)照品溶液和供試品溶液的制備 對(duì)照品溶液的制備精密稱取蘆丁對(duì)照品5.00mg，置50ml容量瓶中，用60%乙醇溶液溶解定容，配成濃度為0.1mg/ml的對(duì)照品溶液。 供試品溶液的制備將三種樣品粉碎40目。在100ml圓底燒瓶中加入經(jīng)稱量的1. 00 g的紅花粉末，并標(biāo)號(hào)1（紅旗），2（人民同泰），3（海暉）。加入60%的乙醇溶液至刻度線一下，放入超聲儀器中30min，取出，用60%的乙醇定容。3.2 線性關(guān)系考察 將蘆丁對(duì)照品溶液分別移取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 ml，置10 ml比色管中，用60%的乙醇補(bǔ)充至5ml，加入5%的亞硝酸鈉0.3 ml，搖勻，放置

10、6min，加入10%硝酸鋁溶液0.3ml，搖勻，放置6 min后再加入4%的氫氧化鈉溶液4ml，搖勻，用60%的乙醇至刻度，搖勻，放置12 min后，在510nm下測(cè)定。將5組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)填入下列表格：蘆丁標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)試管12345吸光度A0.1100.2350.3550.4790.596C(mg/ml)0.010.020.030.040.05以吸光度為縱坐標(biāo)(Y)、蘆丁對(duì)照品溶液的濃度(mg/ml)為橫坐標(biāo)(X)，得其回歸方程:Y=12.16X-0.0098(R2=0.9999).蘆丁品在0.01-0.05mg/ml范圍內(nèi)線性良好。3.3 精密度試驗(yàn) 用移液管移取試樣溶液2ml于比色管中，加60%乙

11、醇稀釋至5ml，加入5%NaNO2 0.3ml，搖勻，靜置6min，再加10%Al(NO3)3 0.3ml，搖勻，靜置6min，再加4%NaOH 4ml，再加0.4ml30%乙醇，搖勻，靜置12min。于510nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值，重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。測(cè)量結(jié)果如下表。精密度檢驗(yàn)序號(hào)123456試樣0.221 0.225 0.223 0.224 0.223 0.221結(jié)果RSD=0.719%,本實(shí)驗(yàn)精密度良好。3.4 重復(fù)性試驗(yàn)稱取紅花粉末1g于容量瓶中，按“供試品溶液制備”方法重新制備試樣，取2ml紅花（紅旗）提取液，加60%乙醇稀釋至5ml，加入5% NaNO2 0.3ml，

12、搖勻，靜置6min，再加10% Al( NO3)3 0.3ml，搖勻，靜置6min，再加4%NaOH 4ml，再加0.4ml 30%乙醇，搖勻，靜置12min。在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值。重復(fù)實(shí)驗(yàn)六次，數(shù)據(jù)如下：重復(fù)性檢驗(yàn)序號(hào)123456吸光度A0.2310.2670.2780.2700.3350.297結(jié)果RSD為2.4%，表明實(shí)驗(yàn)重復(fù)性一般好。3.5 穩(wěn)定性考察用移液管移取紅花提取液1 ml于比色管中，按“供試品溶液制備”方法制備，顯色后，每隔10min測(cè)定1次吸光度值，測(cè)定6次。穩(wěn)定性檢驗(yàn)時(shí)間（min）0102030405060吸光度A0.1530.1520.1520.1510.15

13、00.1490.149其結(jié)果RSD=0.10%，表明試樣在一小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。3.6 加樣回收率實(shí)驗(yàn)精密量取海暉藥店紅花粉末（總黃酮含量為2.26%）6份，分別加入一定量的蘆丁對(duì)照品，按“供試品溶液制備”方法處理，測(cè)定，計(jì)算回收率。結(jié)果加樣回收率為（97.99±1.76）%，RSD為1.11 %(n=6)，表明該含量測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確。回收率試驗(yàn)結(jié)果序號(hào)123456RSD（%）稱取樣品量（g）0.100.120.110.120.100.101.11供試品中含有量（mg）2.603.122.863.122.602.60對(duì)照品加入量（mg）2.53.02.83.12.62.5測(cè)定總黃酮的量（mg）5

14、.0780 6.0069 5.6194 6.1484 5.1345 5.0730 回收率（%） 99.1296.2398.5597.6997.4898.923. 7 樣品測(cè)定 每份紅花樣品溶液平行取樣3份，每份2ml，按“供試品溶液制備”方法制備，每樣品平行測(cè)定3次,在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算總黃酮含量。紅花中總黃酮含量測(cè)定的結(jié)果樣品吸光度A1吸光度A2吸光度A3平均值總黃酮含量（mg/g）總黃酮總量（%）紅旗0.3350.337.0.3330.33514.181.40人民同泰0.1760.1270.1230.1426.240.62海暉0.2210.2090.2270.2199.410.944 討論通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)知道紅旗藥店所售紅花總黃酮含量最高，人民同泰藥店所售含量最低，但含量均超過(guò)50%