促甲狀腺激素(TSH)定量試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)

1、標(biāo)題：促甲狀腺激素（TSH）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-001發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 1 頁，共 6 頁【概述】促甲狀腺素（TSH）是垂體前葉分泌的一種糖蛋白激素，其主要作用是調(diào)控甲狀腺的功能活動。測定血清中TSH的濃度是判斷甲狀腺功能是否正常的首選指標(biāo)，也是研究下丘腦垂體甲狀腺軸反饋調(diào)節(jié)機制等的重要參數(shù)，臨床上多用于甲狀腺功能亢進（甲亢）和減退（甲減）的診斷、原發(fā)與繼發(fā)性甲減的鑒別診斷、監(jiān)測甲亢和甲減的療效、亞臨床甲亢的診斷、新生兒甲低的篩查以及

2、垂體TSH瘤的實驗室診斷等。【測定原理】本試劑盒采用雙抗夾心法測定血清中TSH水平，用兩株不同的單克隆抗體分別與TSH分子上不同的抗原決定簇發(fā)生反應(yīng)。用一株單抗包被微孔板制成固相抗體，用另一株單抗標(biāo)記酶制成酶標(biāo)抗體。在包被板微孔中加入校準(zhǔn)品或待測血清及酶標(biāo)抗體，溫育后即形成固相抗體抗原酶標(biāo)抗體的復(fù)合物，充分洗滌后加入化學(xué)發(fā)光底物液，于3090分鐘內(nèi)測定其發(fā)光強度（RLU），根據(jù)校準(zhǔn)曲線即可算出樣品中TSH的含量，樣品的RLU值隨TSH濃度的增加而升高。標(biāo)題：促甲狀腺激素（TSH）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-001發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：20

3、07年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 2 頁，共 6 頁【試劑組成和配制】數(shù)量48孔96孔包被板1塊48孔/塊96孔/塊校準(zhǔn)品7瓶0.5ml/瓶0.5ml/瓶濃度0、0.1、0.5、2.5、10、40、120uIU/ml酶標(biāo)記物1瓶3ml/瓶6ml/瓶化學(xué)發(fā)光底物液1瓶3ml/瓶6ml/瓶濃縮洗滌液1瓶30ml/瓶30ml/瓶 使用時用蒸餾水稀釋20倍（水應(yīng)為新鮮制備的去離子水或蒸餾水）說明書1份1張/份1張/份封板膜1份1張/份2張/份【樣本要求】病人標(biāo)本無需特殊處理，采用正確醫(yī)用技術(shù)收集全血標(biāo)本，離心分離后吸取血清用于檢測。待測血清如在2

4、4小時之內(nèi)使用，可于28。C保存，若需長期存放應(yīng)保存在-20。C以下，并避免反復(fù)凍溶。請不要使用嚴(yán)重溶血、脂血或黃疸標(biāo)本。標(biāo)題：促甲狀腺激素（TSH）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-001發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 3 頁，共 6 頁【測定方法】自4。C冰箱中取出試劑盒，室溫平衡15分鐘，然后按下表程序操作：TSH加樣測定程序表 單位：ul包被板 空白孔 校準(zhǔn)孔 樣品孔校準(zhǔn)品 50 待測樣品 50酶標(biāo)記物 50 50 用微量震蕩器充分振蕩混勻，用封板膜封板

5、37。C溫育2小時。 用稀釋后的洗滌液洗板5次，最后在干凈的吸水紙上扣干。發(fā)光底物液 50 50 50 用微量震蕩器充分振蕩混勻，室溫（2027。C）避光反應(yīng)30分鐘。測量 必須于加化學(xué)發(fā)光底物液后的第3090分鐘內(nèi)測量，在化學(xué)發(fā)光測量儀上依序測量各孔的發(fā)光強度（RLU），測量時間1秒/孔。注：若室溫低于20。C，加入化學(xué)發(fā)光底物液后應(yīng)將微孔板置于2030。C烘箱內(nèi)溫育30分鐘后再測量；加入化學(xué)發(fā)光底物液后其發(fā)光強度（RLU）在3090分鐘之間比較穩(wěn)定，此段時間為可靠測量期?！具m用儀器】微孔板光子計數(shù)分析儀，微孔板洗板機?！窘Y(jié)果計算】待測樣品的濃度按下方法計算：用化學(xué)發(fā)光測量儀中的數(shù)據(jù)處理程序

6、（擬合類型：線性擬合，坐標(biāo)選擇：log(x)log(Y),實驗方法：夾心法）直接給出校準(zhǔn)曲線及樣品的濃度值。標(biāo)題：促甲狀腺激素（TSH）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-001發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 4 頁，共 6 頁【正常參考值】各實驗室應(yīng)建立自己的臨床正常值，下列正常值范圍僅供參考。正常參考值：0.35.0uIU/ml【對實驗結(jié)果的解釋】本試劑盒的檢測結(jié)果不是臨床診斷的唯一確認指標(biāo)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測指標(biāo)綜合判定?！痉椒ǖ木窒扌浴?、 本試劑盒

7、僅限用于血清樣本的測定，對于其它體液樣本測定的可靠性尚未得到充分的實驗確認。2、 本試劑盒準(zhǔn)確的測定范圍應(yīng)不超出校準(zhǔn)品曲線的濃度范圍，超出曲線范圍的樣品需要適當(dāng)稀釋后測定結(jié)果才能準(zhǔn)確。3、 通過其它方法得到的TSH濃度值與本試劑盒的測定結(jié)果不具有直接的可比性?！炯夹g(shù)參數(shù)】1、 靈敏度：0.02uIU/ml2、 精密性：用本方法檢測低、中、高三組樣品（n=10）。 批內(nèi)變異系數(shù)：CV%15.0%；批間變異系數(shù)：CV%20.0%3、 線性：r0.9900標(biāo)題：促甲狀腺激素（TSH）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-001發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：200

8、7年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 5 頁，共 6 頁【注意事項】1、 檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染。所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)當(dāng)按傳染物處理。2、 操作前應(yīng)仔細閱讀使用說明書，嚴(yán)格按照說明書的操作程序進行，不同批號的試劑和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封嚴(yán)后保存。3、 各試劑必須搖勻后使用，用前應(yīng)平衡到室溫，嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時間和溫度。4、 加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，盡量縮短整個加樣時間。5、 每次加樣完畢后，應(yīng)用微量震蕩器充分振蕩混勻，并避免產(chǎn)生氣泡

9、防止溶液濺出。6、 以洗板機洗板時，每孔注液量不應(yīng)少于400ul，洗板次數(shù)不少于5次，浸泡時間不短于10秒，并注意檢查加液頭是否堵塞。洗板完后還應(yīng)在干凈的吸水紙上扣干。7、 以手工洗板時，每次洗液都應(yīng)加滿微孔，最后應(yīng)在干凈的無紙屑吸水紙上扣干以防影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。8、 加發(fā)光底物液的加樣器應(yīng)專用，加樣吸頭應(yīng)確保干凈無污染，標(biāo)題：促甲狀腺激素（TSH）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-001發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 6 頁，共 6 頁在加發(fā)光底物液的過程

10、中應(yīng)避免加樣吸頭與板孔或手指接觸，以防底物愛到污染而造成本底升高。9、 為防止樣品蒸發(fā)及避免污染，溫育時應(yīng)將反應(yīng)板放于密閉干凈的塑料袋內(nèi)或用不干膠覆蓋。標(biāo)題：三碘甲腺原氨酸（T3）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-002發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 1 頁，共 5 頁【概述】三碘甲腺原氨酸（T3）是含碘的氨基酸衍生物，由一個分子一碘酪氨酸和一個分子二碘酪氨酸偶聯(lián)而成，分子量651D。血循環(huán)中的T3有80%來自游離T4在外周組織脫去一個碘原子而成，直接來自甲狀腺

11、的T3只占20%。血中的T3有99.7%與甲狀腺結(jié)合球蛋白（TBG）等結(jié)合。血清T3濃度的測定對甲狀腺功能的評價和早期診斷甲亢很有價值，同時對甲亢的療效觀察及判定預(yù)后也有重要價值。【測定原理】本試劑盒采用競爭法測定血清中T3水平。將T3抗體包被微孔板制成固相抗體，用酶標(biāo)記T3抗原制成酶標(biāo)抗原。在包被板微孔中加入校準(zhǔn)品或待測血清和酶標(biāo)記物，溫育后即形成固相抗體非標(biāo)記抗原或酶標(biāo)記抗原復(fù)合物，充分洗滌后加入化學(xué)發(fā)光底物液測定其發(fā)光強度（RLU），根據(jù)校準(zhǔn)曲線即可算出樣品中T3的含量，樣品的RLU值隨T3濃度的增加而降低。標(biāo)題：三碘甲腺原氨酸（T3）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-F

12、G-SOP-002發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 2 頁，共 5 頁【試劑組成和配制】數(shù)量96孔包被板1塊96塊/塊校準(zhǔn)品6瓶0.5ml/瓶 濃度為：0、0.5、1.0、2.5、5.0、7.5ng./ml酶濃縮液1瓶1.1ml/瓶酶稀釋液1瓶11ml/瓶酶工作液：按1：10用酶稀釋液（1.0ml）稀釋酶濃縮液（0.1ml）并混合均勻，現(xiàn)用現(xiàn)配?；瘜W(xué)發(fā)光底物液A1瓶6ml/瓶化學(xué)發(fā)光底物液B1瓶6ml/瓶使用前根據(jù)需要量將底物液A和B等體積（1：1）混合，現(xiàn)用現(xiàn)配。濃縮洗滌液1瓶30ml/瓶使

13、用時用蒸餾水稀釋20倍（水應(yīng)為新鮮制備的去離子水或蒸餾水）說明書1份1張/份封板膜1份2張/份【樣本要求】病人標(biāo)本無需特殊處理，采用常規(guī)醫(yī)用技術(shù)收集全血標(biāo)本，離心分離后吸取血清用于檢測。待測血清如在24小時之內(nèi)使用，可于28。C保存，若需長期存放應(yīng)保存在-20。C以下，并避免反復(fù)凍溶。請不要使用嚴(yán)重溶血、脂血或黃疸標(biāo)本。標(biāo)題：三碘甲腺原氨酸（T3）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-002發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 3 頁，共 5 頁【測定方法】自4。C冰箱中

14、取出試劑盒，室溫平衡15分鐘，然后按下表程序操作：T3加樣測定程序表 單位：ul包被板 空白孔 校準(zhǔn)孔 樣品孔校準(zhǔn)品 50 待測樣品 50酶工作液 100 100 用微量震蕩器充分振蕩混勻，用封板膜封板室溫（2027。C）溫育45分鐘。用稀釋后的洗液洗板5次，最后在干凈的吸水紙上扣干。發(fā)光底物混合液 100 100 100 用微量震蕩器充分振蕩混合均勻，室溫（2027。C）避光反應(yīng)5分鐘。測量 必須于加化學(xué)發(fā)光底物液后的第530。C 分鐘內(nèi)測量，在化學(xué)發(fā)光 測量儀上依序測量各孔的發(fā)光強度（RLU），測量時間1秒/孔?！具m用儀器】微孔板光子計數(shù)分析儀，微孔板洗板機?！窘Y(jié)果計算】待測樣品的濃度計算

15、按下列方法進行：用化學(xué)發(fā)光分析儀中的數(shù)據(jù)處理程序（擬合類型：線性擬合，坐標(biāo)選擇：log(X)logit(Y)，實驗方法：競爭法）直接給出校準(zhǔn)曲線及樣品的濃度值?！菊⒖贾怠扛鲗嶒炇覒?yīng)建立自己的正常參考值，下列正常值僅供參考。正常參考值：0.521.90ng/ml (單位換算：1nmol/L=0.651ng/mL)標(biāo)題：三碘甲腺原氨酸（T3）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-002發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 4 頁，共 5 頁【對實驗結(jié)果的解釋】本試劑盒的檢

16、測結(jié)果不是臨床診斷的唯一確認指標(biāo)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測指標(biāo)綜合判定。【方法的局限性】1、 本試劑盒僅限用于血清樣本的測定，對于其它體液樣本測定的可靠性尚未得到充分的實驗確認。2、 本試劑盒準(zhǔn)確的測定范圍應(yīng)不超出校準(zhǔn)品曲線的濃度范圍，超出曲線范圍的樣品需要適當(dāng)稀釋后測定結(jié)果才能準(zhǔn)確。3、 通過其它方法得到的T3濃度值與本試劑盒的測定結(jié)果不具有直接的可比性。4、 待測血清中存在抗T3等自身抗體以及人抗鼠等異嗜抗體會干擾測定結(jié)果。【技術(shù)參數(shù)】1、 靈敏度：0.04ng/ml2、 精密度：用本方法檢測低、中、高三組樣品（n=10）。分析內(nèi)變異系數(shù)：CV%15%；分析間變異系數(shù)：CV%20%3、 線

17、性：| r | 0.99004、 特異性：與10ug/ml的T4交叉反應(yīng)率小于0.02%【注意事項】1、 檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染。所標(biāo)題：三碘甲腺原氨酸（T3）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-002發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 5 頁，共 5 頁有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)當(dāng)按傳染物處理。2、 操作前應(yīng)仔細閱讀使用說明書，嚴(yán)格按照說明書的操作程序進行，不同批號的試劑和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封嚴(yán)后

18、保存。3、 各試劑必須搖勻后使用，用前應(yīng)平衡到室溫，嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時間和溫度。4、 加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，盡量縮短整個加樣時間。5、 每次加樣完畢后，應(yīng)用微量震蕩器充分振蕩混勻，并避免產(chǎn)生氣泡防止溶液濺出。6、 以洗板機洗板時，每孔注液量不應(yīng)少于400ul，洗板次數(shù)不少于5次，浸泡時間不短于10秒，并注意檢查加液頭是否堵塞。洗板完后還應(yīng)在干凈的吸水紙上扣干。7、 以手工洗板時，每次洗液都應(yīng)加滿微孔，最后應(yīng)在干凈的無紙屑吸水紙上扣干以防影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。8、 加發(fā)光底物液的加樣器應(yīng)專用，加樣吸頭應(yīng)確保干凈無污染，在加發(fā)光底物液的過程中應(yīng)避免加樣吸頭與

19、板孔或手指接觸，以防底物受到污染而造成本底升高。9、 為防止樣品蒸發(fā)及避免污染，溫育時應(yīng)將反應(yīng)板放于密閉干凈的塑料袋內(nèi)或用不干膠覆蓋。標(biāo)題：甲狀腺素（T4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-003發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 1 頁，共 6 頁【概述】甲狀腺素(T4)是甲狀腺分泌的兩種主要激素之一，分子量777D，全部由甲狀腺產(chǎn)生。T4的主要作用是促進合成和能量代謝，使基礎(chǔ)代謝和耗氧量增加，促進生長和發(fā)育。在血中的T4有99.97%與甲狀腺結(jié)合球蛋白（TBG）

20、及甲狀腺結(jié)合前蛋白（TBPA）結(jié)合。T4的合成和分泌主要受下丘腦及垂體的控制。T4是甲狀腺功能亢進（甲亢）和減退（甲減）的診斷和療效評價的指標(biāo)之一?！緶y定原理】本試劑盒采用競爭法測定血清中T4水平，用T4抗體包被微孔板制成固相抗體，用T4抗原標(biāo)記酶制成酶標(biāo)記物。在包被微孔中加入T4校準(zhǔn)品或待測血清和酶標(biāo)抗原，溫育后競爭形成固相抗體非標(biāo)記抗原或標(biāo)記抗原復(fù)合物，充分洗滌后加入化學(xué)發(fā)光底物液于530分鐘內(nèi)測定其發(fā)光強度（RLU），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可算出樣品T4的含量，樣品的RLU值隨T4濃度的增加而降低。標(biāo)題：甲狀腺素（T4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-003發(fā)布日

21、期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 2 頁，共 6 頁【試劑組成和配制】數(shù)量96孔包被板1塊96孔/塊校準(zhǔn)品6瓶0.5ml/瓶濃度為：0、2、5、10、15、25ug/dl酶濃縮液1瓶1.1ml/瓶酶稀釋液1瓶11ml/瓶酶工作液：按1：10用酶稀釋液（1.0ml）稀釋酶濃縮液（0.1ml）并混合均勻，現(xiàn)用現(xiàn)配?；瘜W(xué)發(fā)光底物液A1瓶6ml/瓶化學(xué)發(fā)光底物液B1瓶6ml/瓶使用前根據(jù)需要量將底物液A和B等體積（1：1）混合，現(xiàn)用現(xiàn)配。濃縮洗滌液1瓶30ml/瓶使用時用蒸餾水稀釋20倍（水應(yīng)為新鮮制備的去

22、離子水或蒸餾水）說明書1份1張/份封板膜1份1張/份【樣本要求】病人標(biāo)本無需特殊處理，采用常規(guī)醫(yī)用技術(shù)收集全血標(biāo)本，離心分離后吸取血清用于檢測。待測血清如在24小時之內(nèi)使用，可于28。C保存，若需長期存放應(yīng)保存在-20。C以下，并避免反復(fù)凍溶。請不要使用嚴(yán)重溶血、脂血或黃疸標(biāo)本。標(biāo)題：甲狀腺素（T4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-003發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 3 頁，共 6 頁【測定方法】自4。C冰箱中了出試劑盒，室溫平衡15分鐘，然后按下表程序操作

23、：T4加樣測定程序表 單位：ul包被板 空白孔 校準(zhǔn)孔 樣品孔校準(zhǔn)品 25 待測樣品 25酶工作液 100 100 用微量震蕩器充分振蕩混勻，用封板膜封板室溫（2027。C）溫育45分鐘。用稀釋后的洗液洗板5次，最后在干凈的吸水紙上扣干。發(fā)光底物混合液 100 100 100 用微量震蕩器充分振蕩混合均勻，室溫（2027。C）避光反應(yīng)5分鐘。測量 必須于加化學(xué)發(fā)光底物液后的第530。C 分鐘內(nèi)測量，在化學(xué)發(fā)光 測量儀上依序測量各孔的發(fā)光強度（RLU），測量時間1秒/孔?！具m用儀器】微孔板光子計數(shù)分析儀，微孔板洗板機。【結(jié)果計算】待測樣品的濃度計算按下列方法進行：用化學(xué)發(fā)光分析儀中的數(shù)據(jù)處理程序

24、（擬合類型：線性擬合，坐標(biāo)選擇：log(X)logit(Y)，實驗方法：競爭法）直接給出校準(zhǔn)曲線及樣品的濃度值?！菊⒖贾怠扛鲗嶒炇覒?yīng)建立自己的正常值，下列正常值僅供參考。正常參考值：男性4.410.8ug/dl；女性4.811.6ug/dl （單位換算1nmol/L=0.077ug/dL）標(biāo)題：甲狀腺素（T4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-003發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 4 頁，共 6頁【對實驗結(jié)果的解釋】本試劑盒的檢測結(jié)果不是臨床診斷的唯一確認指

25、標(biāo)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測指標(biāo)綜合判定?！痉椒ǖ木窒扌浴?、 本試劑盒僅限用于血清樣本的測定，對于其它體液樣本測定的可靠性尚未得到充分的實驗確認。2、 本試劑盒準(zhǔn)確的測定范圍應(yīng)不超出校準(zhǔn)品曲線的濃度范圍，超出曲線范圍的樣品需要適當(dāng)稀釋后測定結(jié)果才能準(zhǔn)確。3、 通過其它方法得到的T4濃度值與本試劑盒的測定結(jié)果不具有直接的可比性。4、 血清中存在抗T4等自身抗體以及人抗鼠等異嗜抗體會干擾測定結(jié)果?！拘阅苤笜?biāo)】1、 靈敏度：0.1ug/dL2、 精密度：用本方法檢測低、中、高三組樣品（n=10）。分析內(nèi)變異系數(shù)：CV%15%；分析間變異系數(shù)：CV%20%3、 線性相關(guān)系數(shù)絕對值 | r | 0.9

26、9004、 特異性：與濃度為100ug/dL右旋三碘原氨酸交叉反應(yīng)率為1.5%，與濃度為100ug/dL的左旋三碘原氨酸交叉反應(yīng)率為3.0%。標(biāo)題：甲狀腺素（T4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-003發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 5 頁，共 6 頁【注意事項】1、 檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染。所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)當(dāng)按傳染物處理。2、 操作前應(yīng)仔細閱讀使用說明書，嚴(yán)格按照說明書的操作程序進行，不同批號的試劑和包被板不能混用

27、。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封嚴(yán)后保存。3、 各試劑必須搖勻后使用，用前應(yīng)平衡到室溫，嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時間和溫度。4、 加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，盡量縮短整個加樣時間。5、 每次加樣完畢后，應(yīng)用微量震蕩器充分振蕩混勻，并避免產(chǎn)生氣泡防止溶液濺出。6、 以洗板機洗板時，每孔注液量不應(yīng)少于400ul，洗板次數(shù)不少于5次，浸泡時間不短于10秒，并注意檢查加液頭是否堵塞。洗板完后還應(yīng)在干凈的吸水紙上扣干。7、 以手工洗板時，每次洗液都應(yīng)加滿微孔，最后應(yīng)在干凈的無紙屑吸水紙上扣干以防影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。8、 加發(fā)光底物液的加樣器應(yīng)專用，加樣吸頭應(yīng)確保干

28、凈無污染，在加發(fā)光底物液的過程中應(yīng)避免加樣吸頭與板孔或手指接觸，以標(biāo)題：甲狀腺素（T4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-003發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 6 頁，共 6 頁防底物受到污染而造成本底升高。9、 為防止樣品蒸發(fā)及避免污染，溫育時應(yīng)將反應(yīng)板放于密閉干凈的塑料袋內(nèi)或用不干膠覆蓋。標(biāo)題：游離三碘甲腺原氨酸（FT3）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-004發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布

29、部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 1 頁，共 6 頁【概述】三碘甲腺原氨酸（T3）是含碘的氨基酸衍生物，由一個分子一碘酪氨酸和一個分子二碘酪氨酸偶聯(lián)而成，分子量651D。血循環(huán)中的T3有80%來自游離T4在外周組織脫去一個碘原子而成，直接來自甲狀腺的T3只占20%。血中的T3有99.7%與甲狀腺結(jié)合球蛋白（TBG）等結(jié)合。同TBG等蛋白質(zhì)結(jié)合的T3無生物活性，而0.3%未結(jié)合的T3即游離T3（FT3）的生物活性則比游離T4強510倍。因此測定血清FF3對于甲亢的診斷、療效和預(yù)后的判斷具有重要的臨床價值，對甲減的診斷也有一定的參考價值?！緶y定原理】 本試劑盒采用

30、競爭法測定血清中FT3水平。用T3抗體包被微孔板制成固相抗體，酶標(biāo)記T3抗原制成酶標(biāo)記物，該酶標(biāo)記物不能夠與TBG和白蛋白結(jié)合。在包被板微孔中加入FT3校準(zhǔn)品或待測血清和酶標(biāo)記物，酶標(biāo)記物與樣品的FT3競爭性結(jié)合出樣品中FT3的含量，樣品的RLU值隨FT3濃度的增加而降低。標(biāo)題：游離三碘甲腺原氨酸（FT3）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-004發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 2 頁，共 6 頁【試劑組成和配制】數(shù)量96孔包被板1塊96孔/塊校準(zhǔn)品6瓶0.5ml

31、/瓶濃度為：0、1.2、2.5、5.0、8.5、18pg/mL（1pg/mL1.536=pmol/L）酶標(biāo)記物1瓶1ml/瓶化學(xué)發(fā)光底物液A1瓶6ml/瓶化學(xué)發(fā)光底物液B1瓶6ml/瓶使用前根據(jù)需要量將底物液A和B等體積（1：1）混合，現(xiàn)用現(xiàn)配。濃縮洗滌液1瓶30ml/瓶使用時用蒸餾水稀釋20倍（水應(yīng)為新鮮制備的去離子水或蒸餾水）說明書1份1張/份封板膜1份1張/份【樣本要求】 病人標(biāo)本無需特殊處理，采用常規(guī)醫(yī)用技術(shù)收集全血標(biāo)本，離心分離后吸取血清用于檢測。待測血清如在24小時之內(nèi)使用，可于可于28。C保存，若需長期存放應(yīng)保存在-20。C以下，并避免反復(fù)凍溶。請不要使用嚴(yán)重溶血、脂血或黃疸標(biāo)本

32、。標(biāo)題：游離三碘甲腺原氨酸（FT3）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-004發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 3 頁，共 6 頁【測定方法】自4。C冰箱中了出試劑盒，室溫平衡15分鐘，然后按下表程序操作： FT3加樣測定程序表 單位：ul包被板 空白孔 校準(zhǔn)孔 樣品孔校準(zhǔn)品 50 待測樣品 50酶工作液 100 100 用微量震蕩器充分振蕩混勻，用封板膜封板室溫（2027。C）溫育45分鐘。用稀釋后的洗液洗板5次，最后在干凈的吸水紙上扣干。發(fā)光底物混合液 100

33、100 100 用微量震蕩器充分振蕩混合均勻，室溫（2027。C）避光反應(yīng)5分鐘。測量 必須于加化學(xué)發(fā)光底物液后的第530。C 分鐘內(nèi)測量，在化學(xué)發(fā)光 測量儀上依序測量各孔的發(fā)光強度（RLU），測量時間1秒/孔?！具m用儀器】 微孔板光子計數(shù)分析儀，微孔板洗板機。【結(jié)果計算】待測樣品的濃度計算按下列方法進行：用化學(xué)發(fā)光分析儀中的數(shù)據(jù)處理程序（擬合類型：線性擬合，坐標(biāo)選擇：log(X)logit(Y)，實驗方法：競爭法）直接給出校準(zhǔn)曲線及樣品的濃度值?！菊⒖贾怠扛鲗嶒炇覒?yīng)建立自己的正常值，下列正常值僅供參考。正常參考值：正常成人1.44.2pg/mL；妊娠期：1.84.2pg/mL。（單位換算

34、：1pg/mL1.536=pmol/L）標(biāo)題：游離三碘甲腺原氨酸（FT3）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-004發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 4 頁，共 6 頁【對實驗結(jié)果的解釋】 本試劑盒的檢測結(jié)果不是臨床診斷的唯一確認指標(biāo)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測指標(biāo)綜合判定。【方法的局限性】1、 本試劑盒僅限用于血清樣本的測定，對于其它體液樣本測定的可靠性尚未得到充分的實驗確認。2、 本試劑盒準(zhǔn)確的測定范圍應(yīng)不超出校準(zhǔn)品曲線的濃度范圍，超出曲線范圍的樣品需要適當(dāng)稀釋后

35、測定結(jié)果才能準(zhǔn)確。3、 通過其它方法得到的FT3濃度值與本試劑盒的測定結(jié)果不具有直接的可比性。4、 血中TBG含量的高低不會影響FT3的測定，但血清中存在抗T3等自身抗體以及人抗鼠等異嗜抗體會干擾測定結(jié)果?！拘阅苤笜?biāo)】1、靈敏度：0.05pg/mL2、精密度：用本方法檢測低、中、高三組樣品（n=10）。分析內(nèi)變異系數(shù)：CV%15%；分析間變異系數(shù)：CV%20%3、線性相關(guān)系數(shù)絕對值 | r | 0.99004、 特異性：與10ug/mLT4的交叉反應(yīng)率小于0.02%，與10ug/mLT3的交叉反應(yīng)率小于0.01%標(biāo)題：游離三碘甲腺原氨酸（FT3）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB

36、-FG-SOP-004發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 5 頁，共 6 頁【注意事項】1、 檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染。所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)當(dāng)按傳染物處理。2、 操作前應(yīng)仔細閱讀使用說明書，嚴(yán)格按照說明書的操作程序進行，不同批號的試劑和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封嚴(yán)后保存。3、 各試劑必須搖勻后使用，用前應(yīng)平衡到室溫，嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時間和溫度。4、 加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，盡量縮短整個加樣

37、時間。5、 每次加樣完畢后，應(yīng)用微量震蕩器充分振蕩混勻，并避免產(chǎn)生氣泡防止溶液濺出。6、 以洗板機洗板時，每孔注液量不應(yīng)少于400ul，洗板次數(shù)不少于5次，浸泡時間不短于10秒，并注意檢查加液頭是否堵塞。洗板完后還應(yīng)在干凈的吸水紙上扣干。7、 以手工洗板時，每次洗液都應(yīng)加滿微孔，最后應(yīng)在干凈的無紙屑吸水紙上扣干以防影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。8、 加發(fā)光底物液的加樣器應(yīng)專用，加樣吸頭應(yīng)確保干凈無污染，在加發(fā)光底物液的過程中應(yīng)避免加樣吸頭與板孔或手指接觸，以標(biāo)題：游離三碘甲腺原氨酸（FT3）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-004發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：

38、2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 6 頁，共 6 頁防底物受到污染而造成本底升高。9、 為防止樣品蒸發(fā)及避免污染，溫育時應(yīng)將反應(yīng)板放于密閉干凈的塑料袋內(nèi)或用不干膠覆蓋。標(biāo)題：游離甲狀腺素（FT4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-005發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 1 頁，共 6 頁【概述】甲狀腺素(T4)是甲狀腺分泌的兩種主要激素之一，分子量777D,全部由甲關(guān)腺產(chǎn)生。T4的主要作用是促進合成和能量

39、代謝，使基礎(chǔ)代謝率和耗氧量增加，促進生長和發(fā)育。在血中的T4有99.97%與甲狀腺結(jié)合球蛋白（TBG）及甲狀腺結(jié)合前蛋白（TBPA）結(jié)合，只有0.03%的T4呈游離狀態(tài)（FT4）。與蛋白結(jié)合的FT4無生物活性，只有FT4才具有生物學(xué)效應(yīng)。因此，測定血清中FT4無疑比總FT4對于甲狀腺疾病的診斷和療效判斷具有更重要的臨床意義?！緶y定原理】 本試劑盒采用競爭法測定血清中FT4水平。用T4抗體包被微孔板制固相抗體，酶標(biāo)記T4抗原制成酶標(biāo)記物，該酶標(biāo)記物不能夠與TBG和白蛋白結(jié)合。在包被板微孔中加入FT4校準(zhǔn)品或待測血清和酶標(biāo)記物，酶標(biāo)記物與樣品中的FT4競爭性結(jié)合固定在微孔板上的有限數(shù)量的抗體結(jié)合位

40、點。充分洗滌后加入化學(xué)發(fā)光底物液測定其發(fā)光強度（RLU），根據(jù)校準(zhǔn)曲線即可算出樣品中FT4的含量，樣品的RLU值隨FT4濃度的增加而降低。標(biāo)題：游離甲狀腺素（FT4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-005發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 2 頁，共 6 頁【試劑組成和配制】數(shù)量96孔包被板1塊96孔/塊校準(zhǔn)品6瓶0.5ml/瓶濃度為：0、0.45、1.1、2.0、5.0、7.5、ng/dL（1ng/dL12.9=pmol/L）酶標(biāo)記物1瓶1ml/瓶化學(xué)發(fā)光底物液

41、A1瓶6ml/瓶化學(xué)發(fā)光底物液B1瓶6ml/瓶使用前根據(jù)需要量將底物液A和B等體積（1：1）混合，現(xiàn)用現(xiàn)配。濃縮洗滌液1瓶30ml/瓶使用時用蒸餾水稀釋20倍（水應(yīng)為新鮮制備的去離子水或蒸餾水）說明書1份1張/份封板膜1份1張/份【樣本要求】 病人標(biāo)本無需特殊處理，采用常規(guī)醫(yī)用技術(shù)收集全血標(biāo)本，離心分離后吸取血清用于檢測。待測血清如在24小時之內(nèi)使用，可于可于28。C保存，若需長期存放應(yīng)保存在-20。C以下，并避免反復(fù)凍溶。請不要使用嚴(yán)重溶血、脂血或黃疸標(biāo)本。標(biāo)題：游離甲狀腺素（FT4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-005發(fā)布日期：2007年06月26日生效日

42、期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 3 頁，共 6 頁【測定方法】自4。C冰箱中了出試劑盒，室溫平衡15分鐘，然后按下表程序操作： FT4加樣測定程序表 單位：ul包被板 空白孔 校準(zhǔn)孔 樣品孔校準(zhǔn)品 50 待測樣品 50酶工作液 100 100 用微量震蕩器充分振蕩混勻，用封板膜封板室溫（2027。C）溫育45分鐘。用稀釋后的洗液洗板5次，最后在干凈的吸水紙上扣干。發(fā)光底物混合液 100 100 100 用微量震蕩器充分振蕩混合均勻，室溫（2027。C）避光反應(yīng)5分鐘。測量 必須于加化學(xué)發(fā)光底物液后的第530。C 分鐘內(nèi)測量，在化

43、學(xué)發(fā)光 測量儀上依序測量各孔的發(fā)光強度（RLU），測量時間1秒/孔?！具m用儀器】 微孔板光子計數(shù)分析儀，微孔板洗板機?！窘Y(jié)果計算】待測樣品的濃度計算按下列方法進行：用化學(xué)發(fā)光分析儀中的數(shù)據(jù)處理程序（擬合類型：線性擬合，坐標(biāo)選擇：log(X)logit(Y)，實驗方法：競爭法）直接給出校準(zhǔn)曲線及樣品的濃度值。【正常參考值】各實驗室應(yīng)建立自己的正常值，下列正常值僅供參考。正常參考值：正常成人0.82.0ng/dL；妊娠期：0.762.24ng/dL。（單位換算：1ng/dL12.9=1pmol/L）標(biāo)題：游離甲狀腺素（FT4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-005發(fā)

44、布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 4 頁，共 6 頁【對實驗結(jié)果的解釋】 本試劑盒的檢測結(jié)果不是臨床診斷的唯一確認指標(biāo)，應(yīng)結(jié)合臨床癥狀及其它檢測指標(biāo)綜合判定?！痉椒ǖ木窒扌浴?、 本試劑盒僅限用于血清樣本的測定，對于其它體液樣本測定的可靠性尚未得到充分的實驗確認。2、 本試劑盒準(zhǔn)確的測定范圍應(yīng)不超出校準(zhǔn)品曲線的濃度范圍，超出曲線范圍的樣品需要適當(dāng)稀釋后測定結(jié)果才能準(zhǔn)確。3、 通過其它方法得到的FT3濃度值與本試劑盒的測定結(jié)果不具有直接的可比性。4、 血中TBG含量的高低不會影響FT3的測定，但血

45、清中存在抗T3等自身抗體以及人抗鼠等異嗜抗體會干擾測定結(jié)果?！拘阅苤笜?biāo)】1、靈敏度：0.05ng/dL2、精密度：用本方法檢測低、中、高三組樣品（n=10）。分析內(nèi)變異系數(shù)：CV%15%；分析間變異系數(shù)：CV%20%3、線性相關(guān)系數(shù)絕對值 | r | 0.99004、特異性：與100ug/mL右旋三碘甲腺原氨酸的交叉反應(yīng)率為0.015%，與100ug/mL的左旋三碘甲腺原氨酸的交叉反應(yīng)率為0.030%，與標(biāo)題：游離甲狀腺素（FT4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-005發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：

46、何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 5 頁，共 6 頁40ug/mL人血清白蛋白無交叉反應(yīng)?！咀⒁馐马棥?、檢測必須符合實驗室管理規(guī)范的規(guī)定，嚴(yán)格防止交叉污染。所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應(yīng)當(dāng)按傳染物處理。2、 操作前應(yīng)仔細閱讀使用說明書，嚴(yán)格按照說明書的操作程序進行，不同批號的試劑和包被板不能混用。包被板要干燥保存，用完后立刻放回密封袋中封嚴(yán)后保存。3、 各試劑必須搖勻后使用，用前應(yīng)平衡到室溫，嚴(yán)格控制每步反應(yīng)的時間和溫度。4、 加樣操作應(yīng)快速準(zhǔn)確手法一致，慢吸快打，不要使溶液粘到孔壁上，盡量縮短整個加樣時間。5、 每次加樣完畢后，應(yīng)用微量震蕩器充分振蕩混勻，并避免產(chǎn)生氣泡防止溶液濺

47、出。6、 以洗板機洗板時，每孔注液量不應(yīng)少于400ul，洗板次數(shù)不少于3次，浸泡時間不短于10秒，并注意檢查加液頭是否堵塞。洗板完后還應(yīng)在干凈的吸水紙上扣干。7、 以手工洗板時，每次洗液都應(yīng)加滿微孔，最后應(yīng)在干凈的無紙屑吸水紙上扣干以防影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。8、 加發(fā)光底物液的加樣器應(yīng)專用，加樣吸頭應(yīng)確保干凈無污染，標(biāo)題：游離甲狀腺素（FT4）測定版本號：A修訂號：0文件編號：CJYYLAB-FG-SOP-005發(fā)布日期：2007年06月26日生效日期：2007年07月01日發(fā)布部門：質(zhì)量管理小組編制人：何順卿審核人：鐘尊勇批準(zhǔn)人：張范頁碼：第 6 頁，共 6 頁在加發(fā)光底物液的過程中應(yīng)避免加樣吸頭與板孔或手指接觸，以防底物受到污染而造成本底升高。9、 為防止樣品蒸發(fā)及