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文檔簡介
1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上選修三知識點專題一 基因工程 一、工具1、限制酶(1)來源:主要從原核生物中分離純化而來。(2)作用:識別特定的核苷酸序列并切開相應兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(3)結(jié)果:產(chǎn)生黏性末端或平末端。2、DNA 連接酶常用類型Ecoli DNA連接酶T4DNA連接酶來源大腸桿菌T4噬菌體功能連接黏性末端連接黏性末端和平末端結(jié)果恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵3、 載體 常用載體:質(zhì)粒 動植物病毒 噬菌體衍生物等 質(zhì)粒 載體具備的條件條件適應性穩(wěn)定并能自我復制目的基因穩(wěn)定存在且數(shù)量可擴大有一個至多個限制酶切割位點可攜帶多個或多種外源基因具有特殊的標記基因(如抗生素
2、抗性基因)便于重組DNA的鑒定和選擇對宿主細胞無害不影響宿主細胞的生活 (目的基因序列未知) (知道其中的一段目的基因) (較小的,目的基因序列已知)二、基因工程的操作步驟(1)方法(2)組成(Ca2+處理)(3)方法(4) 方法 補充:比較項目限制酶DNA連接酶DNA聚合酶解旋酶 RNA聚合酶作用底物DNA分子DNA分子片段脫氧核苷酸DNA 分子 核糖核苷酸作用部位磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵堿基對間的氫鍵 磷酸二酯鍵作用結(jié)果形成黏性末端或平末端形成重組DNA分子形成新的DNA分子形成單鏈DNA分子轉(zhuǎn)錄形成RNA 專題二 細胞工程 一、植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng) 項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培
3、養(yǎng)理論基礎植物細胞全能性細胞增殖培養(yǎng)基類型固體或半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基成分水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、氨基酸、瓊脂葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、促生長因子、動物血清等取材植物幼嫩部位或花藥等動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織過程結(jié)果新的組織或植株個體,可以體現(xiàn)全能性新的細胞系或細胞株,不形成個體,不體現(xiàn)全能性目的植株快速繁殖脫毒植株的培育人工種子生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等轉(zhuǎn)基因植物的培育蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)皮膚移植材料的培育檢測有毒物質(zhì)生理、病理、藥理學研究相同點兩技術手段培養(yǎng)過程中細胞都進行有絲分裂,都是無性繁殖,都可稱克隆,都不涉及減數(shù)分裂均為無菌操作,需要適宜的溫度、pH等條件 二、植物
4、體細胞雜交與動物細胞融合植物體細胞雜交動物細胞融合原理細胞膜的流動性、細胞的全能性細胞膜的流動性過程細胞A、B 原生質(zhì)體A、B 融合的原生質(zhì)體雜種細胞 雜種植株細胞A、B 雜交細胞 多個相同雜交細胞相關酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶融合方法物理法:離心、電激、振動;化學法:聚乙二醇等試劑誘導除物理法和化學法外還可以用滅活的病毒誘導結(jié)果雜種植株雜交細胞 意義克服了遠緣雜交的不親和性,獲得雜種植株突破了有性雜交方法的局限,使遠緣雜交成為可能三、單克隆抗體原理:細胞膜的流動性單克隆抗體制備中兩次篩選的目的:(1)第一次篩選是將未融合的B淋巴細胞、骨髓瘤細胞以及BB融合、瘤瘤融合的細胞通過選擇
5、培養(yǎng)基淘汰,篩選出B瘤融合的細胞。(2)第二次篩選是將產(chǎn)生特定抗體的B瘤細胞通過細胞培養(yǎng)用相應抗原檢測的辦法篩選出來。因為從體內(nèi)取免疫過的B淋巴細胞時取出很多種,形成的雜交瘤細胞有很多種,所以需篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。四 核移植(課本P48)原理:動物細胞核具有全能性專題三 胚胎工程一體內(nèi)受精和早期胚胎發(fā)育1精子和卵子的發(fā)生(1)精子的發(fā)生:場所:睪丸的曲細精管。時間:初情期生殖機能衰退。(2)卵子的發(fā)生:(課本P63)場所:卵巢。時間:胎兒期和初情期后。 初級卵母細胞的形成:胎兒期初情期后過程2受精作用的過程 3.早期胚胎發(fā)育二、體外受精和胚胎早期培養(yǎng)1. 卵母細胞的采集(小型動物:
6、用促性腺激素處理,超數(shù)排卵后,從輸卵管中沖取卵子; 大型動物:從屠宰場的卵巢中采集,體外培養(yǎng)至減二中期。)2. 精子的采集與獲能采集(假陰道法、手握法、電刺激法)獲能(培養(yǎng)法:嚙齒動物。家兔和豬的精子在獲能液中;化學誘導法:牛、家畜的精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中獲能。)3. 受精 在獲能液或?qū)S檬芫芤褐型瓿?. 胚胎早期培養(yǎng) 將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)至早期胚胎,可以向受體移植或冷凍保存。3、 胚胎移植 1.移植對象:早期胚胎,體外受精得到的胚胎,其他方式得到的胚胎 2. 生理基礎(1)移入:動物發(fā)情排卵后,在一段時間內(nèi)同種動物的供受體生殖器官的生理變化是相同的(2
7、)收集:早期胚胎處于游離狀態(tài)。(3)存活:受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥。(4)遺傳特征:供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。2.胚胎移植的基本程序 4、 胚胎分割 概念:是指采用機械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分,經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術五、胚胎干細胞(ES細胞)(1)來源:早期胚胎(囊胚的內(nèi)細胞團)或胎兒的原始性腺中分離。(2)特點胚胎干細胞在飼養(yǎng)層細胞上,或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中,可維持不分化的狀態(tài); 在加入分化誘導因子的培養(yǎng)液中向不同類型的組織細胞分化。專題四 生態(tài)工程生態(tài)工程的基本原理1建設目的遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律,充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力,防止環(huán)境污染,達到經(jīng)濟效益和生態(tài)效益的同步發(fā)展。2特點少消耗、多效益、可持續(xù)的工程體系。3基本原理(1)物質(zhì)循環(huán)再生原理:物質(zhì)能夠在各類生態(tài)系統(tǒng)中,進行區(qū)域小循環(huán)和全球物質(zhì)大循環(huán),循環(huán)往復,分層分級利用。(2)物種多樣性原理:生物多樣性程度高,可以在有限的資源條件下,產(chǎn)生或容納更多的生物量,提高系統(tǒng)生產(chǎn)力。(3)協(xié)調(diào)與平衡原理:處理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡,需要考慮環(huán)境承載力,如果生物的數(shù)量超過了環(huán)境承載力的限度,就會引起系統(tǒng)的失衡和破壞。(4)整體性原理:在進行生態(tài)工程建設時,不但要考慮到自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律,還要考慮到經(jīng)濟和社會等系統(tǒng)的影響力。(5)系統(tǒng)學和工程學原理:系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理
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