丹酚酸提取工藝研究

1、丹酚酸提取工藝研究 【摘要】 目的 優(yōu)化丹酚酸的提取工藝，提高丹酚酸B的提取率。方法 以噴霧干燥法獲得的丹酚酸固體粉末的收率和丹酚酸B含量為指標(biāo)，采用均勻設(shè)計法優(yōu)化丹酚酸的乙醇浸提工藝，考察乙醇濃度、提取時間和提取溫度對丹酚酸B提取率的影響。結(jié)果 最佳提取工藝為：45(體積分?jǐn)?shù))乙醇，提取時間為1 h，提取次數(shù)為2次，提取溫度為70 。結(jié)論 提取物中丹酚酸B純度達(dá)到70%以上，優(yōu)化工藝合理、可行。 【關(guān)鍵詞】 丹酚酸B;提取工藝;均勻設(shè)計;大孔吸附樹脂Abstract:Objective To Optimize the extraction process of Salvia acid fro

2、m Salvia miltiorrhiza. Methods Salvia acid of the spray drying powder and salvia acid B were used as use the standard. Uniform design was used to optimize the extraction procedure. The effect of ethanol concentration, extraction time and temperature on the extraction efficiency of salvia acid B were

3、 optimized. Results The optimal conditions were as followings: 45% of ethanol, 1 h of extraction time and 2 cycles of extraction at 70 . Conclusion The extraction yield could reach 70% under the optimal extraction procedure. Key words:salvia acid B; extraction process; uniform design; macroporous re

4、sin 丹參水溶性有效成分多具有酚酸性結(jié)構(gòu),丹參素（化學(xué)名為3,4二羥苯乳酸，3,4dihydroxybenyl lacticacid)是各種丹酚酸的基本化學(xué)結(jié)構(gòu)：丹酚酸A是一分子丹參素與兩分子咖啡酸縮合而成；丹酚酸B為三分子丹參素與一分子咖啡酸縮合而成；丹酚酸C 則為二分子丹參素縮合而成；其他丹酚酸亦有類似結(jié)構(gòu)。丹參水溶性成分中的迷迭香酸(rosmarinic acid A,Ros)也是由一分子丹參素和一分子咖啡酸縮合而成。此外,還有四甲基丹酚酸(tetramethyl salvianolic acid A,Sal M)等等1。 目前,工業(yè)上提取丹參有效成分主要以熱回流法為主,而酚酸類性質(zhì)不

5、穩(wěn)定、易氧化水解,因而提取工藝的研究應(yīng)多指標(biāo)綜合考慮。選擇不穩(wěn)定成分作為提取工藝篩選的指標(biāo)性成分,有利于篩選出合理的工藝條件,防止成分在提取工藝中損失過大2-3。本研究以提取物得率和丹酚酸B含量為指標(biāo),進(jìn)行丹酚酸提取工藝研究, 以確定最佳的提取工藝，探索適合工業(yè)化提取的工藝條件。 1 儀器與試劑 1.1 儀器 FA1004N電子分析天平（上海精密科學(xué)儀器有公司），JZ8002天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司），RE5298A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），LXJII型離心沉淀機(jī)(上海醫(yī)用分析儀器廠)，YL015型實驗型噴霧干燥機(jī)（上海雅程儀器設(shè)備有限公司），QT330型柱溫箱（QM,旗美），L

6、C10ATVP型泵（日本島津），SPD10AVP型紫外檢測器（日本島津），高效液相色譜柱（Diamonsil 鉆石），電子天平（SHIMADZU AY120），KQ100型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），pHS25型pH計（上海智光儀器儀表有限公司）。 1.2 試藥與試劑 丹參藥材系唇形科植物丹參Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根和根莖（購自廣州市天河寶潤堂中藥飲片廠），經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)高英主任藥師檢驗，符合中國藥典2005版一部丹參項下規(guī)定。乙醇（分析純，天津市富宇精細(xì)化工有限公司），甲醇、乙腈（色譜純,迪馬科技有限公司），甲酸（分析純,廣州化學(xué)試劑廠），D10

7、1大孔吸附樹脂（天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所），鹽酸（分析純，廣州市白云區(qū)良田光明化工廠）， FeCl3（分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠），丹酚酸B對照品（批號：200504，中國藥品生物制品檢定所）。 2 方 法 2.1 丹酚酸提取工藝抽濾，作為樣品溶液備用。 2.2 大孔吸附樹脂分離純化 2.3 丹酚酸B含量測定 2.4 樣品的固形物含量 將洗脫液于60 恒溫水浴，揮干乙醇和部分水分成稠膏狀，膏狀物移至真空干燥箱（60 ，0.09 MPa）減壓干燥，置干燥器0.5 h（防回潮），待樣品冷卻后，精密稱量。 3 結(jié) 果 丹酚酸提取工藝正交試驗結(jié)果見表2。將實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸, 求得回歸方程Y=19

8、61+2.0861X1+5.4653X2-0.0356X12-2.055X22+0.0186X1X3,R2=0.954 5,F=6.150 1，方程顯著有效，并得到最佳工藝參數(shù)為：乙醇濃度為45%，提取2次，每次1 h，溫度為70 。對最佳處方進(jìn)行驗證，3批樣品丹酚酸B含量分別為：70.23%、69.04%、69.69%。 4 討 論 41 提取丹參藥材中水溶性成分丹酚酸B，大部分文獻(xiàn)采用水提醇沉法。本文采用乙醇浸提的方法提取，其目的是為了避免用水提取時提取液中含有糖類等水溶性雜質(zhì)而使液體黏稠。表2 U9(96)均勻設(shè)計表及試驗結(jié)果 4.2 丹酚酸B對熱不穩(wěn)定，易氧化水解，對受熱溫度和受熱時間

9、敏感，所以丹參提取液不宜長時間高溫濃縮。試驗結(jié)果表明，丹酚酸提取宜采用減壓濃縮和噴霧干燥等工藝，降低工藝過程的溫度和受熱時間，有利于提取物中丹酚酸保存率的提高4。 4.3 將濃縮液pH值調(diào)至3，可以使部分雜質(zhì)析出，且酸性體系有利于丹酚酸B水溶液在受熱條件下的穩(wěn)定；同時調(diào)節(jié)溶液的pH可以改變丹酚酸在溶液中的游離狀態(tài)，酸性條件下丹參酚酸的極性下降，有利于大孔吸附樹脂對丹酚酸的吸附。 4.4 以體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇濕法裝柱，清洗，然后用水沖洗，沖洗速度宜慢，使大孔樹脂堆實以利于吸附藥液；藥液通過D 101大孔樹脂，流速控制為樹脂體積2.03.0 BV/h,這樣可以使藥液與樹脂充分接觸,靜置一段時間再用水進(jìn)行沖洗,洗脫糖等水溶性雜質(zhì),而丹酚酸B類成分未被洗脫。用體積分?jǐn)?shù)為30%的乙醇洗脫，丹酚酸B具有良好的解吸附性。參考文獻(xiàn)】 1 周長新,羅厚蔚,丹羽正武.丹參水溶性化學(xué)成分的研究J.中國藥科大學(xué)學(xué)報，1999，30 (6) : 411-416.2 孫金蘭，韓偉. 丹參中丹酚酸B的提取分離及分析方