現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)I教案

1、現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)I教案課程名稱(chēng)：細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)時(shí)數(shù)：32主講教師：肖輝海基本教材及主要參考書(shū)：熊大勝等. 現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn). 中南大學(xué)出版社楊漢民. 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn). 高等教育出版社 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)一覽表序號(hào)實(shí)驗(yàn)名稱(chēng)內(nèi) 容 提 要實(shí)驗(yàn)要求實(shí)驗(yàn)時(shí)數(shù)實(shí)驗(yàn)類(lèi)型每組人數(shù)備注1特殊顯微鏡結(jié)構(gòu)及操作技術(shù)暗視場(chǎng)顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)、原理、構(gòu)造及其操作生物.農(nóng)學(xué)動(dòng)科必開(kāi)3綜合22顯微攝影技術(shù)NIKON顯微攝影裝置及YS100數(shù)碼顯微鏡攝影原理及技術(shù)，染色體圖象分析系統(tǒng)軟件的使用，染色體圖象采集、處理及核型分析技術(shù)。生物.農(nóng)學(xué)動(dòng)科必開(kāi)3基本23細(xì)胞膜的特性觀察細(xì)胞凝集反應(yīng)細(xì)胞膜的滲透性生物選

2、開(kāi)3綜合24細(xì)胞器分離、制備與觀察葉綠體的分離與熒光觀察；線(xiàn)粒體制備與活性鑒定。生物必開(kāi)6綜合25細(xì)胞骨架觀察植物細(xì)胞骨架臨時(shí)裝片的制備；鏡檢；植物細(xì)胞骨架永久切片的制備。生物選開(kāi)3綜合26酸性磷酸酶的顯示方法小白鼠注射6%淀粉肉湯抽取腹腔液10%中性福爾馬林酸性磷酸酶作用1%硫化胺姬姆薩染色封片鏡檢。生物必開(kāi)3綜合27細(xì)胞融合細(xì)胞懸液的制備；誘導(dǎo)細(xì)胞融合；鏡檢；統(tǒng)計(jì)平均融合率。生物必開(kāi)3綜合28影響植物原生質(zhì)體融合研究實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)；原生質(zhì)體的分離、活性鑒定；原生質(zhì)體的融合。生物必開(kāi)8綜合設(shè)計(jì)2實(shí)驗(yàn)1 特殊光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu)與使用（學(xué)時(shí)：3）一、教學(xué)目的與要求1、掌握TE2000-U型倒置顯微

3、鏡的特殊部件；    2、掌握TE2000-U型倒置顯微鏡的使用方法和用途；   3、熟悉TE2000-U型倒置顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)。二、教學(xué)內(nèi)容與時(shí)間安排1、TE2000-U型倒置顯微鏡的構(gòu)造與使用；（40分鐘）2、明視場(chǎng)(BF)鏡檢；（20分鐘）3、相差（PH）顯微術(shù)；（20分鐘）4、微分干涉（DIC）顯微術(shù)；（20分鐘）5、熒光（E）顯微術(shù)。（20分鐘）6、實(shí)驗(yàn)小結(jié) ：總結(jié)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中學(xué)生的操作是否規(guī)范；實(shí)驗(yàn)是否成功，如果不成功，問(wèn)題出在哪里；哪些實(shí)驗(yàn)作得比較好。提醒預(yù)習(xí)下節(jié)課實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，提問(wèn)。 （15分鐘）三、教學(xué)方法實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)態(tài)

4、度、提問(wèn)、考勤紀(jì)律、實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范性及熟練程度等給學(xué)生當(dāng)堂打分。四、教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)重點(diǎn)：臨時(shí)制片技術(shù)；幾種特殊顯微鏡操作技術(shù)。難點(diǎn)：特殊顯微鏡操作五、解決方法：先通過(guò)多媒體向?qū)W生講清操作流程，然后分小組向?qū)W生一邊講述一邊示范，最后讓學(xué)生自己練習(xí)；在此過(guò)程中，教師要注意學(xué)生的操作，及時(shí)糾正學(xué)生的不規(guī)范操作，要求學(xué)生能觀察到標(biāo)本的圖象。六、教學(xué)后記：實(shí)驗(yàn)2 顯微攝影術(shù)（學(xué)時(shí)：3）一、教學(xué)目的與要求1、了解顯微攝影裝置，掌握顯微攝影原理；2、掌握顯微攝影技術(shù)，獨(dú)立完成顯微攝影全過(guò)程；3、了解顯微圖象分析系統(tǒng)，掌握?qǐng)D象處理、分析技術(shù)。二、教學(xué)內(nèi)容與時(shí)間安排1、了解OLYMPUS及NIKON顯微攝影裝置，

5、掌握顯微攝影原理；（30分鐘）2、掌握YS100數(shù)碼顯微攝影技術(shù)，用提供的動(dòng)植物細(xì)胞組織永久切片，獨(dú)立完成顯微攝影全過(guò)程；（50分鐘）3、了解染色體圖象分析系統(tǒng)軟件，掌握染色體圖象采集、處理及核型分析技術(shù)。（40分鐘）4、實(shí)驗(yàn)小結(jié) ：總結(jié)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中學(xué)生的操作是否規(guī)范；實(shí)驗(yàn)是否成功，如果不成功，問(wèn)題出在哪里；哪些實(shí)驗(yàn)作得比較好。提醒預(yù)習(xí)下節(jié)課實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，提問(wèn)。 （15分鐘）三、教學(xué)方法實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)態(tài)度、提問(wèn)、考勤紀(jì)律、實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范性及熟練程度等給學(xué)生當(dāng)堂打分。四、教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)重點(diǎn)：顯微攝影；圖象處理及分析技術(shù)。難點(diǎn)：圖象處理及分析五、解決方法：先通過(guò)多媒體向?qū)W生講清操作流程，然后分小組一邊講述

6、一邊示范，最后讓學(xué)生自己練習(xí)；在此過(guò)程中，教師要注意學(xué)生的操作，及時(shí)糾正學(xué)生的不規(guī)范操作，要求學(xué)生將觀察到的標(biāo)本的圖象通過(guò)相應(yīng)軟件記錄下，并進(jìn)行分析。六、教學(xué)后記：實(shí)驗(yàn)3 細(xì)胞膜的特性觀察（學(xué)時(shí)：3）一、教學(xué)目的與要求1、了解細(xì)胞膜的滲透性及各類(lèi)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的速度；    2、學(xué)習(xí)研究細(xì)胞凝集反應(yīng)的方法，了解細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)的原因。   二、教學(xué)內(nèi)容與時(shí)間安排1、講解；（10分鐘）2、雞血細(xì)胞懸液制備；（10分鐘）3、低滲溶液處理；（15分鐘）4、細(xì)胞的滲透性觀察；（35分鐘）5、可溶性土豆凝集素的提取；（15分鐘）6、血球凝血現(xiàn)象的

7、顯微觀察。（35分鐘）7、實(shí)驗(yàn)小結(jié) ：總結(jié)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中學(xué)生的操作是否規(guī)范；實(shí)驗(yàn)是否成功，如果不成功，問(wèn)題出在哪里；哪些實(shí)驗(yàn)作得比較好。提醒預(yù)習(xí)下節(jié)課實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，提問(wèn)。 （15分鐘）三、教學(xué)方法實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)態(tài)度、提問(wèn)、考勤紀(jì)律、實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范性及熟練程度等給學(xué)生當(dāng)堂打分。四、教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)重點(diǎn)：血球凝集現(xiàn)象的觀察；溶血現(xiàn)象的觀察。難點(diǎn)：判斷細(xì)胞是否發(fā)生凝集或溶血五、解決方法：注意學(xué)生的操作，具體指導(dǎo)學(xué)生判斷細(xì)胞是否發(fā)生凝集或溶血。六、教學(xué)后記：實(shí)驗(yàn)4 細(xì)胞器分離、制備與觀察I線(xiàn)粒體制備與活性鑒定（學(xué)時(shí)：3）一、教學(xué)目的與要求1、掌握分離制備動(dòng)物和植物細(xì)胞線(xiàn)粒體的方法；  

8、0; 2、對(duì)分離得到的線(xiàn)粒體進(jìn)行活性鑒定。  二、教學(xué)內(nèi)容與時(shí)間安排1、講解；（10分鐘）2、制備肝細(xì)胞勻漿；（20分鐘）3、差速離心；（70分鐘）4、活性鑒定。（20分鐘）5、實(shí)驗(yàn)小結(jié) ：總結(jié)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中學(xué)生的操作是否規(guī)范；實(shí)驗(yàn)是否成功，如果不成功，問(wèn)題出在哪里；哪些實(shí)驗(yàn)作得比較好。提醒預(yù)習(xí)下節(jié)課實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，提問(wèn)。 （15分鐘）三、教學(xué)方法實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)態(tài)度、提問(wèn)、考勤紀(jì)律、實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范性及熟練程度等給學(xué)生當(dāng)堂打分。四、教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)重點(diǎn)：線(xiàn)粒體的分離難點(diǎn)：線(xiàn)粒體的活性鑒定五、解決方法：先向?qū)W生講清在普通光學(xué)顯微鏡和熒光顯微鏡下線(xiàn)粒體的形態(tài)特征，并讓學(xué)生仔細(xì)觀察教師做好的裝片

9、，然后在教師指導(dǎo)下學(xué)生自己操作。六、教學(xué)后記：II葉綠體的分離與熒光觀察（學(xué)時(shí)：3）一、教學(xué)目的與要求了解葉綠體分離的一般原理和方法，并熟悉應(yīng)用熒光顯微鏡方法觀察葉綠體熒光現(xiàn)象。二、教學(xué)內(nèi)容與時(shí)間安排1、講解；（15分鐘）2、葉綠體的制備；（70分鐘）3、熒光顯微鏡觀察。（35分鐘）6、實(shí)驗(yàn)小結(jié) ：總結(jié)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中學(xué)生的操作是否規(guī)范；實(shí)驗(yàn)是否成功，如果不成功，問(wèn)題出在哪里；哪些實(shí)驗(yàn)作得比較好。提醒預(yù)習(xí)下節(jié)課實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，提問(wèn)。 （15分鐘）三、教學(xué)方法實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)態(tài)度、提問(wèn)、考勤紀(jì)律、實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范性及熟練程度等給學(xué)生當(dāng)堂打分。四、教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)重點(diǎn)：葉綠體的分離難點(diǎn)：葉綠體的熒光顯微鏡觀察五、解決

10、方法：先向?qū)W生講清在普通光學(xué)顯微鏡和熒光顯微鏡下葉綠體的形態(tài)特征，并讓學(xué)生仔細(xì)觀察教師做好的裝片，然后在教師指導(dǎo)下學(xué)生自己操作。六、教學(xué)后記：實(shí)驗(yàn)5 酸性磷酸酶的顯示方法（學(xué)時(shí)：3）一、教學(xué)目的與要求掌握Comori法的基本原理和方法。觀察酸性磷酸酶在細(xì)胞內(nèi)的分布狀況。二、教學(xué)內(nèi)容與時(shí)間安排1、實(shí)驗(yàn)原理的講解；（15分鐘）2、細(xì)胞內(nèi)酸性磷酸酶臨時(shí)裝片的制作；（90分鐘）3、鏡檢。（20分鐘）4、實(shí)驗(yàn)小結(jié) ：總結(jié)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中學(xué)生的操作是否規(guī)范；實(shí)驗(yàn)是否成功，如果不成功，問(wèn)題出在哪里；哪些實(shí)驗(yàn)作得比較好。提醒預(yù)習(xí)下節(jié)課實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，提問(wèn)。 （10分鐘）三、教學(xué)方法1、教師在實(shí)驗(yàn)前三天，每天向小白鼠腹腔內(nèi)

11、注射 1 mL 6% 淀粉肉湯，使小白鼠產(chǎn)生排異反應(yīng)；2、實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)態(tài)度、提問(wèn)、考勤紀(jì)律、實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范性及熟練程度等給學(xué)生當(dāng)堂打分。四、教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)重點(diǎn)：取樣；臨時(shí)裝片的制作。難點(diǎn)：臨時(shí)裝片的制作技術(shù)五、解決方法：注意學(xué)生的操作，要求學(xué)生嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書(shū)上的操作流程進(jìn)行。顯微觀察時(shí)選做得好的玻片標(biāo)本讓大家一起來(lái)觀察。六、教學(xué)后記：實(shí)驗(yàn)6 細(xì)胞骨架的觀察（學(xué)時(shí)：3）一、教學(xué)基本要求掌握用光學(xué)顯微鏡觀察植物細(xì)胞骨架的原理及方法，觀察光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞骨架的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。二、教學(xué)內(nèi)容與時(shí)間安排1、植物細(xì)胞骨架臨時(shí)裝片的制備（100分鐘）2、鏡檢（10分鐘）3、植物細(xì)胞骨架永久切片的制備（25分鐘）

12、4、實(shí)驗(yàn)小結(jié) ：總結(jié)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中學(xué)生的操作是否規(guī)范；實(shí)驗(yàn)是否成功，如果不成功，問(wèn)題出在哪里；哪些實(shí)驗(yàn)作得比較好。提醒預(yù)習(xí)下節(jié)課實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，提問(wèn)。 （10分鐘）三、教學(xué)方法1、實(shí)驗(yàn)教師先做好若干片植物細(xì)胞骨架的永久切片；2、實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)態(tài)度、提問(wèn)、考勤紀(jì)律、實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范性及熟練程度等給學(xué)生當(dāng)堂打分。四、教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)重點(diǎn)：植物細(xì)胞骨架切片的制備難點(diǎn)：植物細(xì)胞骨架永久切片的制備五、解決方法：先通過(guò)多媒體向?qū)W生講清操作流程，然后分步操作，以小組為單位向?qū)W生一邊講述一邊示范；在此過(guò)程中，教師要注意學(xué)生的操作，及時(shí)糾正學(xué)生的不規(guī)范操作，要求學(xué)生制備出能觀察到植物細(xì)胞骨架的臨時(shí)裝片。六、教學(xué)后記：實(shí)驗(yàn)7 誘

13、導(dǎo)細(xì)胞融合（聚乙二醇法）（學(xué)時(shí)：3）一、教學(xué)目的與要求了解細(xì)胞融合的原理，初步掌握用PEG誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法。二、教學(xué)內(nèi)容與時(shí)間安排1、講解（10分鐘）2、細(xì)胞懸液的制備（20分鐘）3、誘導(dǎo)細(xì)胞融合（70分鐘）4、鏡檢（15分鐘）5、統(tǒng)計(jì)平均融合率（10分鐘）6、實(shí)驗(yàn)小結(jié) ：總結(jié)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中學(xué)生的操作是否規(guī)范；實(shí)驗(yàn)是否成功，如果不成功，問(wèn)題出在哪里；哪些實(shí)驗(yàn)作得比較好。提醒預(yù)習(xí)下節(jié)課實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，提問(wèn)。 （10分鐘）三、教學(xué)方法實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)態(tài)度、提問(wèn)、考勤紀(jì)律、實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范性及熟練程度等給學(xué)生當(dāng)堂打分。四、教學(xué)重點(diǎn)、難點(diǎn)重點(diǎn)：細(xì)胞懸液的制備；誘導(dǎo)細(xì)胞融合。難點(diǎn)：誘導(dǎo)細(xì)胞融合五、解決方法：做好預(yù)備實(shí)

14、驗(yàn)，通過(guò)多媒體向?qū)W生講清操作流程及注意事項(xiàng)，注意學(xué)生的操作，及時(shí)糾正學(xué)生的不規(guī)范操作，要求學(xué)生能觀察到標(biāo)本的圖象。六、教學(xué)后記：實(shí)驗(yàn)8 影響植物原生質(zhì)體融合研究（學(xué)時(shí)：8）一、教學(xué)目的與要求了解和探討黃瓜幼苗不同器官(或酵母)原生質(zhì)體提取、純化和融合的適宜條件,認(rèn)識(shí)研究原生質(zhì)體融合方法的重要性。二、教學(xué)內(nèi)容1、選用不同的黃瓜品種的種子,不同條件下(在無(wú)菌條件下光照、不同藥劑浸泡處理、種子成熟率等)進(jìn)行萌發(fā),觀察萌發(fā)條件對(duì)原生質(zhì)體提取、分離和純化的影響。2、選擇不同培養(yǎng)基培養(yǎng)黃瓜(或酵母)對(duì)分離原生質(zhì)體的影響。3、取不同器官切成細(xì)條后提取原生質(zhì)體,比較獲取原生質(zhì)體的條件和能力。 4、用不同成分、

15、濃度的酶液(含0.5%2%纖維素酶、0.3%10%離析酶、00.5%半纖維素酶、3mmol/L 2-N-嗎啡琳乙磺酸鈉、1Ommol/L CaCl2、0.7mmol/LKH2PO4和0.3mol/L甘露醇組成的酶液)(pH5.7)分離原生質(zhì)體,過(guò)濾和洗滌后離心沉淀收集原生質(zhì)體。了解不同酶系對(duì)原生質(zhì)體分離的影響。5、用化學(xué)誘導(dǎo)法或電融合法分別融合原質(zhì)體,了解使用黃瓜(或酵母)用兩個(gè)方法融合的適宜條件。觀察原生質(zhì)體密度對(duì)原生質(zhì)體融合的影響。6、融合后原生質(zhì)體短暫培養(yǎng)條件(從培養(yǎng)基、培養(yǎng)方式、光照條件等方面)的建立和效果比較。7、通過(guò)顯微攝影記錄原生質(zhì)體融合情況，或在顯微鏡下觀察統(tǒng)計(jì)原生質(zhì)體融合率。三、教學(xué)方法1、查閱文獻(xiàn)，按照