藥物聯(lián)合治療對改善腎血管性高血壓大鼠左室重構(gòu)的對比研究

1、藥物聯(lián)合治療對改善腎血管性高血壓大鼠左室重構(gòu)的對比研究【摘要】【摘要】目的 通過貝那普利分別和比索洛爾、替米沙坦、氨氯地平聯(lián)合應(yīng)用治療腎血管性高血壓大鼠，觀察并對比各組藥物聯(lián)合治療的降壓效果，并探討其對左室重構(gòu)的作用。 方法 兩腎一夾法建立高血壓大鼠模型，54 只 SD 大鼠隨機(jī)分為：假手術(shù)組(A 組，n=10)；高血壓組(B 組，n=11)；受體阻滯劑+血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（ACEI）組(C 組，n=11) 予以比索洛爾 5 mg/(kgd)及貝那普利 5 mg/(kgd)灌胃； ACEI+血管緊張素受體拮抗劑（ARB）組 (D組，n=11)予以貝那普利 5 mg/(kgd)及替米沙坦 1

2、0 mg/(kgd)灌胃；ACEI+鈣通道拮抗劑組(E 組，n=11) 予以貝那普利 5 mg/(kgd)及氨氯地平2.5 mg/(kgd)灌胃；飼養(yǎng) 20 周，期間每 2 周給大鼠測量鼠尾動脈壓和超聲心動圖；20 周后采集標(biāo)本，用免疫組化法檢測膠原、膠原及心鈉素（ANF）。 結(jié)果 各用藥組降壓明顯，其中 E 組與 A 組血壓相近，且比其他用藥組血壓降低更明顯（P0.05)。與 A 組比較，C 組 LVMI 明顯上升 （P0.05)；D 組和 E 組無顯著變化，但 B 組收縮末期左室內(nèi)徑（LVESD） 和舒張末期左室內(nèi)徑（LVEDD）明顯擴(kuò)大，與 A 組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05)；且 B

3、組舒張末期左室后壁厚度（LVPWD）和收縮末期左室后壁厚度（LVPWS）明顯變?。≒0.05)，相對室壁厚度（RWT）明顯下降（P0.05)；C 組 LVPWD、LVPWS和 RWT 明顯提高，與 A 組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05)。C 組膠原、膠原含量較 B 組降低 （P0.05)，D 組和 E 組亦顯著降低（P0.01)；與 A 組比較，B 組膠原、膠原和 ANF 明顯升高（P0.05)；與 B 組比較, 各藥物治療組 ANF 顯著降低（P0.01)。 結(jié)論 在降壓和靶器官保護(hù)方面，貝那普利和氨氯地平聯(lián)用療效最好?！娟P(guān)鍵詞】【關(guān)鍵詞】高血壓； 膠原； 心鈉素； 藥物； 大鼠Compar

4、ison of combined medications on improving leftventricular remodeling in Goldblatt ratsLIU Yufei, LONGXiaofeng, LIU Hui, LZhenfang.Department of Emergency，theSecond Affiliated Hospital of Dalian Medical University，Dalian116023，China【】Tocompare the efficacy of combined medications on left ventricularr

5、emodeling in Goldblatt rats (two kidney one clip hypertensiverats ).Fiftyfour Goldblatt rats of 56 weeksold were randomly divided into 5 groups：sham group(group A, n=10);hypertension group(group B, n=11) ; adrenergic receptor blocker(B)+angiotensin converting enzyme inhibitor(ACEI) group group C,bis

6、oprolol 5 mg/(kgd)+benazepril 5 mg/(kgd),n=11;ACEI+angiotensin type receptor blocker(ARB) groupgroup D,benazepril 5 mg/(kgd)+telmisartan 10 mg/(kgd),n=11, ACEI+calciumchannel blocker(CCB) group group E, benazepril 5mg/(kgd)+amlodipine 10 mg/(kgd),n=11; Being fed for 20 weeksalong with blood presure

7、monitored and echocardiography performedevery two weeks, the rats were sacrificed, the blood and hearts werecollected, and the concentration of collagen, collagenand ANFwere detected by immunohistochemistry.The bloodpressure of rats in each medication group was reduced significantly.The blood pressu

8、re of rats was reduced more significantly in group E（P0.01), whose result is close to that ofgroup A, and lowerthan that in other medication group. Compared togroup A, thecardiac geometries ofgroup B andgroup C were changed. RWT wasraised more significantly ingroup C thanthat ingroup A, andreduced m

9、ore significantly ingroup B than that ingroup A. RWTingroup D andgroup E was close to that in group A. Theconcentration of collagen, collagen and ANF in medication groupswere significantly lower than those in group B.Benazepril combined with amlodipine is effective in loweringblood pressure and prot

10、ecting target organ.【Key】hypertension； collagen； atrialnatriuretic factor； drug； rat高血壓的長期存在會引起心室肥厚、心肌間質(zhì)纖維化、心室?guī)缀螛?gòu)型的改變等嚴(yán)重的心臟損害，左心室的這種結(jié)構(gòu)改變又被稱為左心室重構(gòu)（leftventricular remodeling,LVRM)，高血壓治療目的除有效降壓外,更重要的是逆轉(zhuǎn)左室重構(gòu)?？垢哐獕核幬锏穆?lián)合治療已經(jīng)成為降壓治療的重要原則，其降壓及保護(hù)和逆轉(zhuǎn)靶器官損害的效果均明顯高于單一用藥。本研究探討血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（angiotensin converting enz

11、yme inhibitor,ACEI）貝那普利分別和受體阻滯劑( adrenergic receptor blocker, B)康可、血管緊張素受體拮抗劑(angiotensintype 1 receptor blocker,ARB) 替米沙坦、鈣通道拮抗劑（calcium channel blocker， CCB）氨氯地平聯(lián)合應(yīng)用治療腎血管性高血壓大鼠，對比各組藥物降壓的療效和改善左室重構(gòu)的作用。1 1材料與方法材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動物及動物模型的建立及分組54 只健康雄性SpragueDawley(SD)大鼠，56 周齡，測量體質(zhì)量(body weight，BW)、基礎(chǔ)尾動脈壓及進(jìn)行超聲心

12、動圖檢查，將大鼠隨機(jī)分為手術(shù)組（44 只）和假手術(shù)組（A 組，n=10 只），手術(shù)組用直徑 0.3 mm 的銀夾鉗夾左腎動脈1，造成其部分狹窄，A 組行同樣的手術(shù)過程但不放置銀夾。術(shù)后各組大鼠每周測 1 次尾動脈壓，每 2 周進(jìn)行 1 次超聲心動圖檢查。手術(shù)組大鼠隨機(jī)分為 4 組，每組 11只：(1)高血壓組(B 組)；(2)B+ACEI 組(C 組) 予以比索洛爾 5mg/(kgd)+貝那普利 5 mg/(kgd)灌胃；(3)ACEI+ARB 組(D 組)予以貝那普利5 mg/(kgd)+替米沙坦 10 mg/(kgd)灌胃；(4)ACEI+CCB 組(E 組) 予以貝那普利 5 mg/(k

13、gd)+氨氯地平 2.5 mg/(kgd)灌胃。A 組每天給予同體積飲用水灌胃，共 20 周。1.2觀察指標(biāo)1.2.1大鼠尾動脈壓的測定：各組大鼠安靜狀態(tài)下，置于 42 溫箱 15min 后，連接尾動脈壓袖套及血壓記錄儀，連續(xù)記錄 3 次尾動脈壓，計算其平均值。1.2.2超聲心動圖的測量：各組大鼠左室長軸切面二尖瓣尖水平，在二維影像指導(dǎo)下用 M 超測量收縮末期左室內(nèi)徑(LVESD)、舒張末期左室內(nèi)徑(LVEDD)、收縮末期左室后壁厚度(LVPWS)、舒張末期左室后壁厚度(LVPWD)，取其 5 次心動周期的平均值，計算左室質(zhì)量(LVM)、左室質(zhì)量指數(shù)(LVMI)、相對室壁厚度(RWT)、射血分

14、數(shù)(EF)。1.2.3膠原、膠原及心鈉素（ANF）的測定：各組大鼠留取左心室肌的標(biāo)本并根據(jù)膠原、膠原及 ANF 放免試劑盒要求操作， 用 SN682 型放射免疫計數(shù)器計數(shù)。1.3統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用 SPSS 12.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示，組間比較采用 oneway ANOVA 分析。P0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2 2結(jié)果結(jié)果2.1治療前各組大鼠的一般狀況及左室結(jié)構(gòu)和功能指標(biāo)比較治療前各組收縮壓（SBP）及左室結(jié)構(gòu)與功能指標(biāo)均無顯著差異。見表 1。表 1治療前各組大鼠血壓及心臟結(jié)構(gòu)與心功能指標(biāo)情況（略）2.2各組術(shù)后 20 周大鼠血壓、心臟結(jié)構(gòu)、心功能相關(guān)指標(biāo)變

15、化與 B組比較，各用藥組血壓降低程度明顯；其中 E 組和 D 組血壓比 C 組更低 （P0.05)。與 A 組比較，C 組 LVMI 明顯上升 （P0.05)；B 組 LVESD 和 LVEDD 明顯擴(kuò)大，與 A 組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05)，但 D 組和 E 組無顯著變化；且 B 組 LVPWD 和 LVPWS 明顯變薄，RWT 明顯下降（P0.05)；C 組 LVPWD、LVPWS 和 RWT 明顯提高，與 A 組相比具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05)。同時與 A 組比較，EF 在 B 組顯著降低（P0.05)，各用藥組無明顯變化；與 B 組比較，C組、D 組、E 組 EF 明顯提高 （P

16、0.05 或 P0.01)。見表 2。表 2術(shù)后 20 周各組大鼠血壓及心臟結(jié)構(gòu)與心功能指標(biāo)比較（略）注：與 A 組比較，* P0.05, * P0.01；與 B 組比較， P0.05, P 0.01；與 C 組比較，P0.052.3大鼠心肌組織中膠原、膠原和 ANF 含量的變化情況與 A 組比較，B 組 ANF 明顯升高（P0.05)，各藥物治療組 ANF 無明顯升高；與 B 組比較，各藥物治療組 ANF 顯著降低，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05 或 P0.01)。與B 組比較，C 組、D 組、E 組膠原、膠原含量明顯降低，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05 或 P0.01)；且 D 組和 E 組較 C

17、 組明顯降低，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05)。見表 3。表 3各組大鼠心肌組織中膠原、膠原和 ANF 含量比較（略）注：與 A 組比較，* P0.05；與 B 組比較， P0.05， P 0.01;與 C 組比較，P0.053 3討論討論目前在高血壓治療中，藥物聯(lián)合治療能提高療效、降低不良反應(yīng)，是目前高血壓治療的新趨勢。聯(lián)合降壓藥物治療的最終目的并非只是為了血壓數(shù)值的降低，更是為了降低各種心血管事件發(fā)生的危險。高血壓左心室重構(gòu)是心臟事件重要的獨(dú)立危險因素，與心律失常、猝死、心力衰竭等密切相關(guān)。本研究選用臨床常用的 3 類藥物，分別與貝那普利聯(lián)合治療高血壓，并比較其降壓和逆轉(zhuǎn)左心室重構(gòu)的作用。結(jié)果

18、發(fā)現(xiàn)，與 B 組比較，各用藥組血壓降低程度明顯，具有統(tǒng)計學(xué)差異；其中 E 組和 D 組血壓比 C 組更低，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05)；E 組比 D 組血壓更低，但 2 組之間無統(tǒng)計學(xué)差異。表明在藥物兩兩聯(lián)合治療高血壓的過程中，貝那普利和氨氯地平合用降壓效果最好，貝那普利和替米沙坦合用效果次之，貝那普利和康可合用效果不及前 2 組，但也能有效降低血壓。心肌纖維化是左心室重構(gòu)的重要病理改變。研究表明，壓力負(fù)荷和腎素血管緊張素醛固酮系統(tǒng)（RAAS）的活性改變在心肌纖維化過程中起著重要的作用24。本研究中，與 B 組比較，C 組膠原、膠原含量明顯降低，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05)，D 組和 E 組顯

19、著降低（P0.01)；且 D 組和 E 組較 C組明顯降低，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05)。提示貝那普利和康可合用明顯減少了高血壓大鼠的心肌纖維化，其可能的機(jī)制是通過降低高血壓大鼠的血壓，減輕了心臟的壓力負(fù)荷，從而減少了壓力負(fù)荷介導(dǎo)的心肌纖維化；且 ACEI 可改善和逆轉(zhuǎn)血管緊張素介導(dǎo)的心肌纖維化，并且加強(qiáng)血栓素 2（AT2） 的抗心肌肥厚的作用，從而有效地改善和逆轉(zhuǎn)心肌肥厚，起到保護(hù)心臟作用56。D組膠原含量接近 A 組，一方面，該組血壓降低顯著，減輕了壓力負(fù)荷介導(dǎo)的心肌纖維化，另一方面，ACEI 和 ARB 聯(lián)合應(yīng)用能夠從不同水平更加完全地將血管緊張素阻斷，改善和逆轉(zhuǎn)心肌纖維化的作用加強(qiáng)，并

20、且更有效地刺激緩激肽 P、一氧化氮途徑，改善心肌重構(gòu)7。E 組膠原含量更接近 A 組，提示氨氯地平和貝那普利聯(lián)合應(yīng)用可更好地降低心臟負(fù)荷，同時減少血管緊張素的作用，并阻斷它們所介導(dǎo)的心肌纖維化，從而逆轉(zhuǎn)左室肥厚。左室重構(gòu)的最終表現(xiàn)是心臟幾何構(gòu)型的改變，表現(xiàn)為左室腔的擴(kuò)大和室壁的變薄，收縮力下降。本研究表明：與 A 組比較，C 組 LVMI 明顯上升（P0.05)；D 組和 E 組無顯著變化，但 B 組 LVESD 和 LVEDD 明顯擴(kuò)大（P0.05)；且 LVPWD 和 LVPWS 明顯變?。≒0.05)，RWT 明顯下降（P0.05)；C 組LVPWD、LVPWS 和 RWT 明顯提高（P

21、0.05)；EF 在 B 組顯著降低（P0.01)，而C 組、D 組和 E 組 EF 明顯提高 （P0.05 或 P0.01)；與 A 組比較，B 組 ANF明顯升高（P0.05)，各藥物治療組 ANF 無明顯升高，與 B 組比較，各藥物治療組 ANF 顯著降低，具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.01)。說明各用藥組均能有效延緩高血壓大鼠左室重構(gòu)的進(jìn)程，有效地阻止了心力衰竭的發(fā)生。雖然比索洛爾和貝那普利組血壓降低不理想，但受體阻滯劑可能通過使心肌受體密度上調(diào)，減慢心室率，減少心肌耗氧，抑制升高的交感神經(jīng)系統(tǒng)興奮導(dǎo)致的縮血管作用，降低心臟后負(fù)荷，抑制 RAAS 的激活，減輕心肌損傷，減慢左室重構(gòu)等機(jī)制，阻止

22、心力衰竭的發(fā)生89。貝那普利和替米沙坦聯(lián)用及貝那普利和氨氯地平聯(lián)用不但將血壓降至理想水平，阻斷了壓力負(fù)荷誘導(dǎo)的心力衰竭，且通過減輕心肌纖維化逆轉(zhuǎn)了左室重構(gòu)，預(yù)防了心力衰竭的發(fā)生?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】【參考文獻(xiàn)】 Weber KT, Brilla CG. Pathologic hypertrophy and cardiacinterstitum. Fibrosis and reninangiotensinaldosterone systemJ.Circulation, 1991, 83（6）:18491865.2 Harada K, Komuro I, Shioima I, et al. Pressure overloadinduces cardiac hypertrophy in angiotensin type 1 A receptorknockout miceJ. Circulation, 1998, 97(19):19521959.3 Lopez B, Conzalez, Varo N, et al. Biochemical assessment ofmyocardial fibrosis in hypertensive heart diseaseJ. Hypertension,2001,38(5):12221226.4 Swynghedauw B. Mole