蘆根多糖的提取及其抗氧化活性的研究

1、蘆根多糖的提取及其抗氧化活性的研究         10-08-23 14:49:00     編輯：studa20                  作者：沈蔚， 任曉婷， 張建， 楊靖亞 【摘要】  目的利用微波法提取蘆根多糖，測(cè)定其含量，并研究蘆根多糖的抗氧化活性。方法通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)探

2、討蘆根多糖提取的最佳工藝，從清除抑制羥基自由基的產(chǎn)生、還原力和對(duì)脂質(zhì)體抗氧化活性的測(cè)定3個(gè)方面研究了蘆根多糖的體外抗氧化效果, 并同VC 進(jìn)行比較。結(jié)果蘆根多糖含量為0.798。微波法提取蘆根多糖的最佳工藝參數(shù)為料水比13，微波強(qiáng)度為大火，提取時(shí)間8 min。多糖還原能力僅稍次于抗壞血酸；多糖對(duì)羥自由基的清除能力較抗壞血酸來(lái)說(shuō)較弱；對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化的抑制作用在吸光度小于等于0.88時(shí)與多糖的濃度成正相關(guān)。結(jié)論微波法對(duì)蘆根中的多糖的提取有輔助作用，蘆根多糖具有一定的抗氧化活性。 【關(guān)鍵詞】  微波輔助提??； 蘆根多糖； 提取工藝； 抗氧化Abstract：ObjectiveTo study

3、 the antioxidant activity of Reed rhizome . MethodsThe prepration，purification and determination of polysaccharides in Reed rhizome were investigatedThe optimal technical parameters of extracting polysaccharides from Reed rhizome were determined through orthogonal testThe antioxidative activity of R

4、eed rhizome Polysaccharides were studied and compared with Vc including the experiment of inhibiting the formation of hydroxyl radical，reducing power and inhibiting formation of lipid peroxidation.ResultsThe result showed that the optimal technical parameters were liquidsolid ratio l：3 and the extra

5、cting time 8minutes under max power through microwave assistant extractionThe concentration of polysaccharide in Reed rhizome was 0.798Polysaccharides had obvious reducing capauty and was equal to Vc. Scavenging capability to hydroxyl radical of Polysaccharides was lower than Vc.When Abs was lower t

6、han 0.88,the inhibition to lipid peroxidation was equal to polysaccharide.ConclusionMicrowave method is helpful to extract the polysaccharides in the Reed rhizome, and it demonstrates the antioxidant activity of  the polysaccharides.Key words：Microwave assistant extraction；  Polysaccharide

7、s in Reed rhizome；  Extraction technology；  Anti-oxidation    蘆根是一種常用中藥。據(jù)醫(yī)書(shū)記載, 蘆根性味甘、寒入肺、胃經(jīng)。具有清熱、生津、除煩、止嘔、利尿等功效, 中醫(yī)學(xué)稱之為“火藥”?，F(xiàn)代藥理分析，蘆根含有薏苡素、天門冬酰胺等。它的藥用價(jià)值除退熱外, 還具有多種作用。蘆根是一味具有多種功能的食材和中藥材，它不僅在食用上具有多種搭配，而且在中醫(yī)藥學(xué)應(yīng)用研究方面具有巨大的貢獻(xiàn)1。     蘆根別名蘆茅根、葦根、蘆柴根、蘆菇根、順江龍、水蓈蔃、蘆通

8、、葦子根、蘆芽根、甜梗子，有清熱生津、除煩、止嘔、利尿的功能，主治熱病煩渴、胃熱嘔吐、肺熱咳嗽、肺癰吐膿、熱淋澀痛。其來(lái)源為禾本科植物蘆葦Phragmites communis Trin.的新鮮或干燥根莖。鮮蘆根呈長(zhǎng)圓柱形，有的略扁，長(zhǎng)短不一，直徑12 cm。表面黃白色，有光澤，外皮疏松可剝離，節(jié)呈環(huán)狀，有殘根及芽痕。體輕，質(zhì)韌，不易折斷。切斷面黃白色，中空，壁厚12 mm，有小孔排列成環(huán)。無(wú)臭，味甘。干蘆根呈扁圓柱形，節(jié)處較硬，節(jié)間有縱皺紋。蘆根多糖的使用還未被重視。迄今有關(guān)蘆根多糖的微波提取尚未見(jiàn)報(bào)道，筆者在前期實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上對(duì)蘆根多糖進(jìn)行了提取和含量測(cè)定研究，以期為蘆根的開(kāi)發(fā)利用提供理論依

9、據(jù)，并在此基礎(chǔ)上對(duì)提取的蘆根多糖進(jìn)行體外抗氧化的研究。1  儀器與材料1.1  儀器721紫外分光光度計(jì)，電子天平，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，烘箱，美的WP700IP17微波爐(功率700 W)，循環(huán)水式真空泵，數(shù)顯恒溫水浴鍋，電熱套，冷凝管。1.2  材料新鮮蘆根，挖掘自上海南匯蘆潮港，經(jīng)鑒定洗凈切碎待用。1.3  試劑苯酚(AR),濃硫酸(AR)、無(wú)水乙醇、氧仿、正丁醇、葡萄糖、95%乙醇、丙酮、乙醚(均為化學(xué)純)。2  方法與結(jié)果2.1  標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取充分干燥制恒重的10 mg葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品，加去離子水溶解，配制100 ml標(biāo)準(zhǔn)溶液，

10、標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為0.1 g/L。分別吸取配制好的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4 ml，分別加去離子水至2 ml,加入5%的苯酚溶液1 ml,搖勻后迅速加入5 ml濃硫酸顯色，振蕩5 min，在沸水浴上加熱15 min,取出后于冷水浴中冷卻30 min。以空白為參比，用紫外分光光度計(jì)在490 nm處測(cè)吸光度2。以吸光度(A)對(duì)葡萄糖濃度(C)做回歸處理，得回歸方程：A=9.883 3 C-0.018 7，相關(guān)系數(shù)r=0.997 3（n=7）。2.2  提取蘆根多糖的工藝流程 稱取適量蘆根，按一定的料水比(即蘆根質(zhì)量與水的質(zhì)量比)，調(diào)整料

11、水比、提取溫度、提取時(shí)間，進(jìn)行熱水浸提、抽濾, 濾液進(jìn)行減壓濃縮后, 攪拌下加入950 ml/L 乙醇,調(diào)醇含量至650 ml/L，靜置過(guò)夜,抽濾,濾渣先后用丙酮、無(wú)水乙醇洗3次3,即得蘆根多糖的粗品。將粗品置圓底燒瓶中(用Sevag 法去除蛋白質(zhì)) 。用氯仿-正丁醇(41) 溶液對(duì)其進(jìn)行回流40 min ,然后抽濾,棄去濾液, 該操作重復(fù)8 次。將濾渣干燥后,再溶于適量水, 過(guò)濾, 除去不溶物,濾液進(jìn)行減壓濃縮后, 攪拌下加入950 ml/L 乙醇,調(diào)醇含量至650 ml/L 。靜置過(guò)夜,抽濾,濾渣分別用丙酮、無(wú)水乙醇、乙醚洗3 次,干燥,即得蘆根多糖，計(jì)算得率。多糖(干質(zhì)量)提取率=mW。式中，m表示多糖干質(zhì)量，g；W為供試蘆根的質(zhì)量，g。蘆根中多糖含量為0.7984。     精密稱取蘆根多糖50. 0 mg置100 ml 容量瓶中,加蒸餾水至刻度,搖勻。準(zhǔn)確吸取1. 5 ,2. 5