三勒漿抗疲勞液對(duì)慢性疲勞動(dòng)物模型影響的實(shí)驗(yàn)研究(一)

1、三勒漿抗疲勞液對(duì)慢性疲勞動(dòng)物模型影響的實(shí)驗(yàn)研究(一)    作者：王崢屹，金毓芳，陳瑾璧，鄒敏，葉盛，白富強(qiáng)【摘要】 目的 觀察三勒漿抗疲勞液對(duì)慢性疲勞大鼠模型的多因素影響作用，為深入探討其藥理學(xué)作用的機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法 采用長時(shí)間反復(fù)強(qiáng)迫大鼠游泳及束縛四肢（限制大鼠的活動(dòng)）法，造成慢性疲勞的大鼠模型，懸尾法及力竭游泳法考查模型動(dòng)物行為學(xué)指標(biāo)，并采用ELISA法測(cè)定其細(xì)胞因子IL-1b、IL-6及神經(jīng)遞質(zhì)5-HT。結(jié)果 空白對(duì)照組動(dòng)物一般情況、行為學(xué)觀察及IL-1b、IL-6、5-HT等多項(xiàng)指標(biāo)與模型組比較差異有顯著性（P0.05或P0.01），證明模型

2、成立。而三勒漿抗疲勞液具有改善造模大鼠一般情況及行為學(xué)指標(biāo)的作用。同時(shí)上調(diào)血清中IL-1b及腦組織中5-HT，與模型對(duì)照組比較，差異有顯著性（P0.05或P0.01）。結(jié)論 用強(qiáng)迫大鼠游泳（30min/d）及束縛四肢法（3h/d）造模，所形成的慢性疲勞大鼠模型更趨向于因心理應(yīng)激所形成的機(jī)體癥狀性疲勞模型，三勒漿抗疲勞液對(duì)此種慢性疲勞大鼠模型的一般情況、行為學(xué)指標(biāo)均有明顯的改善作用，對(duì)IL-1b、5-HT的上調(diào)，可能為其藥理學(xué)作用機(jī)理?！娟P(guān)鍵詞】 三勒漿抗疲勞液；慢性疲勞；大鼠模型；實(shí)驗(yàn)研究Using chronic fatigue rat model to investigate the ph

3、armacologic mechanism of Sanajon oral liquid【Abstract】 Objective To observe the effect of chronic fatigue rat model which influenced by Sanajon oral liquid, to study the pharmacology mechanism. Methods Adopt force rat swim and bondage on four limbs repeatedly , to cause rat chronic fatigue ; By hang

4、ing rat tail and swimming exhaust physical strength approach, to observe rat ethology changes; Utilizing ELISA method, examination cytokine IL-1b, IL-6 and 5-HT.Results Comparing control group with chronic fatigue model group, there have significance difference about rat general condition, ethology

5、changes, IL-1b, IL-6 in serum and 5-HT in brain(P0.05 or P0.01). At the same time, all of above examination item can be improve by Sanajon oral liquid(P0.05 or P0.01).Conclusion This kind of chronic fatigue rat model have more psychological stress which induce to psychological fatigue, Sanajon oral

6、liquid can improve model rats general condition, ethology changes, IL-1b, IL-6 in serum and 5-HT in brain.【Key words】 anti-fatigue Sanajon oral liquid;chronic fatigue;rat model;experiment study三勒漿抗疲勞液為國內(nèi)抗疲勞產(chǎn)品中的知名品牌，在長期的臨床運(yùn)用中，顯示出較好的療效，為進(jìn)一步探討該產(chǎn)品抗慢性疲勞的作用機(jī)理，我們進(jìn)行了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的初步研究。1 實(shí)驗(yàn)材料1.1 動(dòng)物 SD大鼠，體重160180g，雌雄各

7、半，共50只，合格證號(hào)：SCXK（川）2004-11，供應(yīng)單位：成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供應(yīng)中心。1.2 供試品 三勒漿抗疲勞液，0.5g生藥/ml，30ml/支，紅棕色液體，批號(hào)：Y20040702，人臨床用量及給藥途徑：30ml/次，1天1次，口服。供應(yīng)單位：成都三勒漿藥業(yè)集團(tuán)四川華美制藥有限公司。1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器及試劑2 實(shí)驗(yàn)方法2.1 動(dòng)物分組 經(jīng)檢疫合格后，將50只大鼠計(jì)算機(jī)完全隨機(jī)分成5組，每組10只，分別為低、中、高三勒漿抗疲勞液組、模型對(duì)照組及空白對(duì)照組。分籠飼養(yǎng)，每籠動(dòng)物5只。正式試驗(yàn)前，各組動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)7天。2.2 劑量設(shè)置及給藥 按體表面積折算，大鼠用量為1.5g生藥

8、/kg；以此為低劑量，各組設(shè)置如下：低劑量組：1.5g生藥/kg；中劑量組：3g生藥/kg；高劑量組：6g生藥/kg,空白對(duì)照組及模型對(duì)照組灌服等體積純水。2.3 慢性疲勞動(dòng)物模型的建立 大鼠從第8天起，除空白對(duì)照組外，其他各組動(dòng)物開始接受23天不同的應(yīng)激性刺激，即單日冷水(21±1)，水深50cm游泳，每次30min；雙日束縛應(yīng)激1，用膠布束縛鼠四肢，每次3h，每天1次。造模同時(shí)，給藥組動(dòng)物灌胃對(duì)應(yīng)劑量的供試品連續(xù)23天，每天1次，空白對(duì)照組灌胃相同體積的生理鹽水。2.4 觀察指標(biāo)按照5-HT試劑盒要求檢測(cè)，于酶標(biāo)儀450nm處測(cè)OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并查出各樣品中相應(yīng)的含量。2.

9、5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 以統(tǒng)計(jì)軟件SPSS11.0單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1 一般情況研究結(jié)果 結(jié)果見表13。籠旁觀察，模型組大鼠較其他組動(dòng)物的活動(dòng)量明顯下降，對(duì)外界刺激反應(yīng)不敏感，遲鈍。從大鼠一般情況的數(shù)據(jù)分析來看，慢性疲勞造模組大鼠在飲水量、飲食量及體重等多方面均有較明顯的下降的趨勢(shì)，其中飲食及體重方面與空白對(duì)照組比較差異有顯著性；三勒漿抗疲勞液給藥組大鼠與模型對(duì)照組比較，總體情況有改善的趨勢(shì)，其中飲水量與模型對(duì)照組比較差異有顯著性，其他兩項(xiàng)指標(biāo)均值亦明顯高于模型對(duì)照組，但與模型對(duì)照組及空白對(duì)照組比較差異無顯著性，說明三勒漿抗疲勞液在改善慢性疲勞動(dòng)物模型的一般情況方面具有一定

10、的作用。3.2 一般行為學(xué)研究3.3 大鼠血清IL-1b檢測(cè) 試驗(yàn)結(jié)果見表6?？瞻讓?duì)照組及中劑量給藥組與模型對(duì)照組比較差異有非常顯著性（P0.01）；高劑量組與模型對(duì)照組比較差異有顯著性（P0.05）。表6 大鼠血清IL-1b檢測(cè)結(jié)果 注：有1份樣品出現(xiàn)溶血。采用SPSS11.0 One-way ANOVA-LSD分析。與模型對(duì)照組比較，*P0.05；與模型對(duì)照組比較，*P0.013.4 大鼠血清IL-6檢測(cè) 結(jié)果見表7。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，空白對(duì)照組與模型組比較差異有非常顯著性（P0.01）。各劑量給藥組大鼠血清中IL-6含量有上調(diào)的趨勢(shì)，但與模型對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。表7 大鼠血

11、清IL-6檢測(cè)結(jié)果注：采用SPSS11.0 One-way ANOVA-LSD分析。與模型對(duì)照組比較，*P0.013.5 大鼠血清5-HT檢測(cè) 結(jié)果見表8。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。表8 大鼠血清5-HT檢測(cè)結(jié)果注：采用SPSS11.0 One-way ANOVA-LSD分析；各組間差異無顯著性3.6 大鼠下丘腦、垂體5-HT檢測(cè) 結(jié)果見表9?？瞻讓?duì)照組、低劑量組及中劑量組與模型組比較，差異有非常顯著性（P0.01）；高劑量組與模型組比較差異有顯著性（P0.05）。模型對(duì)照組大鼠下丘腦及垂體中5-HT含量明顯低于其他各組動(dòng)物。表9 大鼠垂體、下丘腦中5-HT檢測(cè)結(jié)果

12、注：采用SPSS11.0 One-way ANOVA-LSD分析。與模型對(duì)照組比較，*P0.05；*P0.014 討論中醫(yī)學(xué)認(rèn)為慢性疲勞是一種涉及多臟腑、多系統(tǒng)功能失調(diào)的疾病，與氣機(jī)失調(diào)關(guān)系密切，其發(fā)病多與情志不遂、勞逸、外邪有關(guān)2。而西醫(yī)學(xué)認(rèn)為應(yīng)激是導(dǎo)致或誘發(fā)慢性疲勞的重要因素。其中又以長期的慢性應(yīng)激較急性應(yīng)激更為多見。本試驗(yàn)造模原理符合中、西醫(yī)學(xué)對(duì)慢性疲勞的認(rèn)識(shí)。本次實(shí)驗(yàn)，采用大鼠慢性應(yīng)激（反復(fù)應(yīng)激性刺激維持3周）的方法1，擬制造慢性疲勞大鼠模型。通過對(duì)大鼠一般情況的觀察，造模組與空白對(duì)照組之間存在明顯的差異：模型動(dòng)物活動(dòng)量、飲水量、飲食量及體重明顯低于空白對(duì)照組，說明慢性應(yīng)激已影響大鼠的生理機(jī)能，符合慢性疲勞大鼠機(jī)體整體的變化規(guī)律，為慢性疲勞大鼠模型的形成奠定了客觀的基礎(chǔ)。而大鼠因體重、飲食量的下降也是間接導(dǎo)致動(dòng)物的體力及抗疲勞能力下降的重要因素之一。三勒漿抗疲勞液給藥組大鼠對(duì)以上各指標(biāo)與模型對(duì)照組大鼠比較均有一定的改善趨勢(shì)，提示三勒漿抗