第7章細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則

1、第七章 細(xì)菌感染的檢查方法細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則與防治原則 要點(diǎn)要點(diǎn):1.了解致病菌的檢查程序2.掌握標(biāo)本的采集和送檢原則 實(shí)驗(yàn)室診斷主要內(nèi)容: 直接查細(xì)菌及其成分（抗原、產(chǎn)物、核酸） 細(xì)菌學(xué)診斷 用已知的抗體檢測(cè)標(biāo)本中未知的抗原 -血清學(xué)鑒定(serological identification) 間接查患者血清中特異性抗體 用已知的抗原檢測(cè)標(biāo)本中未知的抗體 -血清學(xué)診斷(serological diagnosis) 第一節(jié)第一節(jié) 細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷2細(xì)菌感染的檢驗(yàn)程序細(xì)菌感染的檢驗(yàn)程序3無(wú)菌采集采集適當(dāng)標(biāo)本早期，用抗生素以前采集雙份血清運(yùn)送注意保存，盡快送檢一、

2、一、標(biāo)本的采集和運(yùn)送原則標(biāo)本的采集和運(yùn)送原則 做好標(biāo)記 二、二、細(xì)菌的檢測(cè)細(xì)菌的檢測(cè)1.1.形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查2.2.分離培養(yǎng)鑒定分離培養(yǎng)鑒定3.3.細(xì)菌細(xì)菌抗原的抗原的檢測(cè)檢測(cè)4.4.細(xì)菌核酸檢測(cè)細(xì)菌核酸檢測(cè)5.5.生物芯片技術(shù)等其他檢測(cè)生物芯片技術(shù)等其他檢測(cè) 1.1.形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查形態(tài)結(jié)構(gòu)檢查一般程序：一般程序：標(biāo)本涂片標(biāo)本涂片 固定固定 染色染色 鏡檢鏡檢（觀察鏡下特征：菌體形態(tài)、排列、染色性形態(tài)、排列、染色性及特殊結(jié)構(gòu)特殊結(jié)構(gòu)等） 初步鑒定初步鑒定 2. 2.細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定 標(biāo)本（或增菌后）接種標(biāo)本（或增菌后）接種普通瓊脂平板普通瓊脂平板血瓊脂平板血瓊脂平板選

3、擇培養(yǎng)基平板選擇培養(yǎng)基平板 培養(yǎng)特征：培養(yǎng)特征： 生長(zhǎng)條件生長(zhǎng)條件 菌落特征菌落特征 溶血環(huán)特征等溶血環(huán)特征等生化試驗(yàn)生化試驗(yàn) Sugar Fermentation H2S Test Citrate utilization血清學(xué)鑒定血清學(xué)鑒定 用已知用已知AbAb檢測(cè)未知的純培養(yǎng)檢測(cè)未知的純培養(yǎng)細(xì)菌細(xì)菌AgAg ，以，以確定細(xì)菌的種、型。確定細(xì)菌的種、型。動(dòng)物試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn) 分離、鑒定細(xì)菌，分離、鑒定細(xì)菌，測(cè)定細(xì)菌毒力。測(cè)定細(xì)菌毒力。 藥敏試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定一般程序細(xì)菌分離培養(yǎng)與鑒定一般程序標(biāo)本（或增菌后） 接種普通瓊脂平板血瓊脂平板選擇培養(yǎng)基平板 培養(yǎng)特征：培養(yǎng)特征： 生長(zhǎng)條件 菌

4、落特征 溶血環(huán)特征等染色鏡檢：根據(jù)形態(tài)特征初步鑒定初步鑒定生化反應(yīng) ：如腸道桿菌的乳糖發(fā)酵試驗(yàn)12血清學(xué)鑒定：鑒定細(xì)菌的種、型毒力鑒定內(nèi)、外毒素檢測(cè)動(dòng)物試驗(yàn)：家兔、豚鼠等藥敏試驗(yàn)紙片法：只可定性試管法：可定量（測(cè)MBC、MIC）E-test： 可定量（只可測(cè)MIC）3. 3. 細(xì)菌抗原的檢測(cè)細(xì)菌抗原的檢測(cè)血清學(xué)鑒定血清學(xué)鑒定 用已知用已知AbAb檢測(cè)未知的純培養(yǎng)檢測(cè)未知的純培養(yǎng)細(xì)菌細(xì)菌AgAg ，以，以確定細(xì)菌的種、型。確定細(xì)菌的種、型。特點(diǎn)特點(diǎn)：特異性強(qiáng)：特異性強(qiáng) 敏感性高敏感性高 AgAg的檢出與病原菌的死活無(wú)關(guān)的檢出與病原菌的死活無(wú)關(guān)抗原檢測(cè)方法： 沉淀反應(yīng) 協(xié)同凝集試驗(yàn) 免疫熒光法 對(duì)

5、流免疫電泳4.4.細(xì)菌核酸的檢測(cè)細(xì)菌核酸的檢測(cè) 5.5.生物芯片技術(shù)等生物芯片技術(shù)等三、細(xì)菌感染的血清學(xué)診斷三、細(xì)菌感染的血清學(xué)診斷 用已知的細(xì)菌或其特異性抗原用已知的細(xì)菌或其特異性抗原去檢測(cè)患者體液中去檢測(cè)患者體液中有無(wú)相應(yīng)抗體有無(wú)相應(yīng)抗體以及抗以及抗體效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化可作為感染性疾病的體效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化可作為感染性疾病的輔助診斷。輔助診斷。 主要適用于抗原性較強(qiáng)的細(xì)菌和病主要適用于抗原性較強(qiáng)的細(xì)菌和病程較長(zhǎng)的感染性疾病的診斷。程較長(zhǎng)的感染性疾病的診斷。標(biāo)本：標(biāo)本：血清和其他體液血清和其他體液標(biāo)本要求標(biāo)本要求: :雙份血清雙份血清( (早期；恢復(fù)期早期；恢復(fù)期) )診斷：診斷：恢復(fù)期或一周后血清

6、恢復(fù)期或一周后血清AbAb效價(jià)比早期升高效價(jià)比早期升高4 4 倍及倍及4 4倍以上倍以上 現(xiàn)癥感染現(xiàn)癥感染凝集試驗(yàn)：凝集試驗(yàn)： 肥達(dá)試驗(yàn)肥達(dá)試驗(yàn)（ Widal test）-診斷傷寒、副傷寒診斷傷寒、副傷寒 外斐試驗(yàn)外斐試驗(yàn)（Well-Felix）-診斷立克次體病診斷立克次體病中和試驗(yàn)：中和試驗(yàn)：-診斷鏈球菌性風(fēng)濕病診斷鏈球菌性風(fēng)濕病補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)： -檢測(cè)檢測(cè)Q Q熱柯克斯體熱柯克斯體ELISAELISA： -檢測(cè)炭疽芽胞桿菌保護(hù)性抗體檢測(cè)炭疽芽胞桿菌保護(hù)性抗體 血清學(xué)診斷常用方法：血清學(xué)診斷常用方法：致病菌的檢驗(yàn)程序致病菌的檢驗(yàn)程序:20第二節(jié)第二節(jié) 細(xì)菌感染的特異性預(yù)防細(xì)菌感染的特異性預(yù)防( (自學(xué)自學(xué)) )思考題思考題1.試述檢測(cè)細(xì)菌的采