亞貢葉中總黃酮及總酚酸的含量測(cè)定

1、亞貢葉中總黃酮及總酚酸的含量測(cè)定作者：田芳 竇德強(qiáng) 遲玉新 吳陽 朱紅 丘鷹昆 康廷國 董鋒 【摘要】 目的建 立亞貢葉總黃酮、總酚酸的含量測(cè)定方法。方法利用分光光度計(jì)通過測(cè)定吸光 度計(jì)算總黃酮、總酚酸的含量。結(jié)果實(shí)驗(yàn)建立了總黃酮、總酚酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線， 測(cè)得亞貢葉中總黃酮平均含量為 3.2%, RSD=1.4%(作者：田芳 竇德強(qiáng) 遲玉新 吳陽 朱紅 丘鷹昆 康廷國 董鋒 【摘要】 目的建立亞貢葉總黃酮、總酚酸的含量測(cè)定方法。方法利用分 光光度計(jì)通過測(cè)定吸光度計(jì)算總黃酮、總酚酸的含量。結(jié)果實(shí)驗(yàn)建立了總黃 酮、總酚酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)得亞貢葉中總黃酮平均含量為 3.2%, RSD=1.4%(n=6);

2、總酚酸平均含量為4.5%, RSD=1.6%( n=6)。 結(jié)論建立了亞貢葉的 總黃酮、總酚酸含量測(cè)定方法，該法簡單、快捷，重現(xiàn)性好，可用于亞貢葉的 質(zhì)量控制和定量分析。關(guān)鍵詞】 亞貢 總黃酮 總酚酸Abstract ： ObjectiveTo establish the determination methods of total flavonoids and total phenolic acid from leaf of Yacon. MethodsThe content of total flavonoids and total phenolic acid were determine

3、d by spectrophotometry. ResultsCalibration graphs were constructed for total flavonoids and total phenolic acid. The content of total flavonoids was 3.6% and the total phenolic acid was 4.4%. ConclusionThe methods are rapid, reliable, accurate and suitable for analysis of total flavonoids and total

4、phenolic acid and quality control in Smallanthus sonchifolius.Key words：Yacon;Total flavonoids;Total phenolic acid亞貢 Smallanthus sonchifolius (Poeppet End1 )HRobinson 為菊科向日葵屬多年生草本植物，俗稱“雪蓮果”“雅龍果”，英文名為“YACO”N 。原產(chǎn)于南美洲安第斯山脈，是當(dāng)?shù)赜〉诎踩说膫鹘y(tǒng)根莖食品1。在我國云南地區(qū)有大面積種植，貴州、福建、湖南、臺(tái)灣等地也均有種植。民間用亞貢葉 加工成茶，沖泡飲用，有降血糖、預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的

5、功效。日本學(xué)者研究發(fā) 現(xiàn)，亞貢能有效地控制膽固醇增加 , 有減肥、防感冒、防骨質(zhì)疏松、降低高血壓 的功效, 對(duì)消化道和循環(huán)系統(tǒng)的疾病 ,以及結(jié)腸癌等 , 均具有一定的療效 2。目前國內(nèi)對(duì)于亞貢的文獻(xiàn)報(bào)道較少，本文對(duì)亞貢葉中總黃酮及總酚酸含量進(jìn)行 了測(cè)定，為其資源合理的開發(fā)利用及質(zhì)量控制提供理論依據(jù)。1儀器與試藥1.1 儀器UV-2100紫外分光光度計(jì)（上海UNICO） FA-1004分析天平（上海精科天平 廠）。1.2 試藥蘆丁對(duì)照品為自制，經(jīng) HPLC純度檢驗(yàn)為98.472%咖啡酸標(biāo)準(zhǔn)品購于中國藥品生物制品檢定所（批號(hào)110885-200102）。亞貢葉200509采自遼寧省鞍山市岫巖新甸鎮(zhèn)

6、大山村，經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院康廷國教授鑒 定為菊科亞貢Smallanthus sonchifolius的葉。所用試劑（硝酸鋁、亞硝酸鈉、氫氧化鈉、三氯化鐵六水合物、鐵氰化鉀、十二烷基磺酸鈉、鹽酸、甲醇）購于各試劑公司。2方法2.1 供試品的準(zhǔn)備精密稱取亞貢葉粉末約 2 g，加入石油醚100 ml，用 索氏提取器脫脂6 h。脫脂后粉末加入100 ml60%甲醇加熱回流兩次，各1.5 h。過濾，合并濾液，減壓濃縮并定容至 25 ml容量瓶。精密吸取1 ml再定容 至25 ml容量瓶中備用。2.2 總黃酮含量測(cè)定3。2.2.1 蘆丁對(duì)照品的準(zhǔn)備精密稱取蘆丁對(duì)照品，用 60%的甲醇溶解后定 容，配成

7、濃度為95卩g/ml的蘆丁對(duì)照品貯備液。精密吸取1 ml蘆丁對(duì)照品溶 液，定容至10 ml，制成濃度為9.5卩g/ml的蘆丁對(duì)照品溶液。2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密吸取濃度為 9.5卩g/ml蘆丁對(duì)照品溶液0,1.0，4.0 ml 及 95 卩 g/ml 的蘆丁對(duì)照品溶液 1.0，2.0，3.0，4.5 ml 于 7 只 10 ml具塞比色管中，分別加入 5% NaNO溶液0.3 ml，搖勻，放置6 min后各加 入10% Al（NO3）3溶液0.3 ml，搖勻放置6 min。分別加入4%NaO溶液4.0 ml，用60%?醇稀釋至刻度，搖勻，放置 10 min。在波長505 nm處測(cè)定吸光

8、度。回歸方程：丫 = 1.193 7X - 0.001 1，r= 0.999 7。其中丫為吸光度，X為蘆丁對(duì)照品溶液濃度（mg/ml）。結(jié)果表明：蘆丁在0.0010.043 mg/ml的 范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。2.2.3 方法學(xué)考察精密度實(shí)驗(yàn)：精密吸取95卩g/ml蘆丁對(duì)照品溶液1.0 ml置于10 ml具塞 比色管中，同“ 2.2.2 ”項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行顯色和測(cè)定，記錄吸光度 A,吸光度 A 的 RSD為 0.51%（n=5）。重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)：精密稱取 2 g 同一批藥材 5份，按“ 2.1 供試品的制備”及 含量分析項(xiàng)下進(jìn)行操作，制得 5份供試液，各取適量，同“ 2.2.2 ”項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)方 法進(jìn)行顯色和測(cè)定，記錄吸光度，吸光度 A的RSD為1.5%(n=5)。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：精密吸取 95 項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行顯色，分別在 明樣品在1560 min內(nèi)穩(wěn)定。卩g/ml蘆丁對(duì)照品溶液15， 20， 30， 45， 6