高通量藥物篩選與創(chuàng)新藥物研究--國家新藥篩選中心

1、高通量藥物篩選與創(chuàng)新藥物研究-國家新藥篩選中心 Microplates from Corning Matrix of Wells 864 96 384 1536 WellRowColumnVolume 96812300 3841624100 1536324810 Microplates 微孔板的顏色和材料 顏色類型 應(yīng)用 透明 光吸收檢測 不透明 黑色熒光檢測 白色化學(xué)發(fā)光檢測 底部透明 細(xì)胞實驗底部檢測 材料類型 應(yīng)用 聚苯乙烯PS 疏水性透明度高多用于篩選板 聚丙烯 PP 化學(xué)穩(wěn)定性高適合化合物儲存 UV透射材料 光吸收率低適合UV檢測 Microplates 微孔板微孔的設(shè)計和密度 微孔

2、板微孔密度的增加可以顯著提高單位時間內(nèi)篩選的通量 節(jié)約成本 提高篩選質(zhì)量 微孔密度 96孔 384孔 1536孔 3456孔 微孔容積 75-250 mL 20-100 mL 2-10 mL 1mL Microplates 微孔板材料的表面處理 類型 應(yīng)用 與生物分子無親和力 Corning公司NBSTM微孔板均相生化測試 與生物分子高親和力 非均相測試 例如ELISA DELFIA 為細(xì)胞組織培養(yǎng)特別處理 Corning公司的CelllBind微孔板提高細(xì)胞貼壁性 多聚賴氨酸表面 超低細(xì)胞親和力表面降低細(xì)胞貼壁能力 共價處理表面 與DNA碳鏈巰基有特異的親和力 微孔板設(shè)備 一般而言一個自動化

3、篩選系統(tǒng)的大多數(shù)組件總是圍繞微孔板而工作的它們均可稱為微孔板設(shè)備 獨立單元Stand-alone指象洗板器液體分配器Liquid Dispenser和酶標(biāo)儀等 工作站W(wǎng)orkstation能執(zhí)行多重功能通常指圍繞微孔板的部分 如液體轉(zhuǎn)移裝置Liquid Handling可圍繞微孔板執(zhí)行多重功能 History 1980s Zymark 世界上第一臺工作站是由Zymark公司開發(fā)的BenchmateTM系統(tǒng)它集成了精密天平單通道加液頭移液裝置振蕩器和HPLC進(jìn)樣器等通過一個機械臂可以將不同的容器從一個工作臺移至另一個工作臺但這一系統(tǒng)主要是針對管形反應(yīng)器設(shè)計而設(shè)計的并不適用于今天的微孔板 第一臺基

4、于于微孔板設(shè)計的工作站是由Beckman Coulter開發(fā)的Biomek1000它整合了單通道和多通道的吸液加液洗滌和單通道檢測密度測定等組件部分 Biomek2000 使用可變換工具后變得更加靈活如不同的吸收器分配器等其特點是可以針對不同的需要設(shè)計不同的操作程序 BiomekFX集成了更強大的功能如多通道可同時亦可執(zhí)行不同的任務(wù)雙手臂操作則更是增加了有效性和操作速度 Biomek 2000 Automation Workstation 自動化液體分配裝置 Beckman Biomek FX 96-channel pipetting head High-capacity for simult

5、aneous liquid transfer Span-8 pipettor Flexible with individual movement and liquid sensing capability for hit picking and plate reformatting 檢測系統(tǒng) UV-visible Light Absorbance Fluorescence Fluorescence Intensity Time-resolved Fluorescence TRF Fluorescence Polarization FP Luminescence Radioactivity Mi

6、croplate Readers Spectra Plus 384 UV absorbance Continuous 190 - 1000 nm Reads 96 wells 5 sec 384 wells16 sec Spectra Gemini XS Luminescence fluorescence and time-resolved fluorescence Continuous 250-850 nm Read 96 wells 27 sec 384 wells 2 min 30 sec VICTOR2 V Multi-label Reader Filter-based instrum

7、ent Five technologies Absorbance Luminescence Fluorescence Time-resolved fluorescence Fluorescence polarization Microplate reader 最新的微孔板檢測器具備高速高靈敏度通用的特點 PerkinElmer公司的EnVision 檢測器可以在36s內(nèi)完成對一塊1536孔板的熒光強度檢測 整合了光吸收熒光強度熒光偏振時間分辨熒光化學(xué)發(fā)光激光等多種檢測手段 EnVision PERKINELMER Safire2 TECAN Spectra M5 Molecular Devic

8、es 自動化系統(tǒng) Automated Robotic System 自動化系統(tǒng)是指集獨立單元工作站于一個特定的功能環(huán)境由一種總系統(tǒng)軟件控制由一至二個機械臂完成微孔板在獨立單元和工作站之間的轉(zhuǎn)移工作可重復(fù)編程的機械裝置系統(tǒng)能自動重復(fù)完成包括自動稱量液體轉(zhuǎn)移分離儀器硬件的轉(zhuǎn)移等 自動化系統(tǒng)的組成 機器人 控制器 機械手 伺服軌道 外圍設(shè)備 微孔板設(shè)備液體轉(zhuǎn)移裝置培養(yǎng)箱洗板器液體分配器和酶標(biāo)儀等 機器人類型 關(guān)節(jié)機器人 Articulated arm robots 圓柱坐標(biāo)機器人 Cylindrical coordinate robots 高架機器人 Overhead gantry robots 關(guān)

9、節(jié)機器人 Articulated arm robots ORCA Robot 圓柱坐標(biāo)機器人 Cylindrical coordinate robots SEICO Robot 高架機器人 Overhead gantry robots 機械手Gripper 線形伺服軌道Linear servo track 機器人通常被安裝到線形伺服軌道上使它可以移動到桌面的其他位置如前所述這一點極大增加了機器人的有效工作空間并使它在無人力干預(yù)的情況下為更多的儀器服務(wù) 典型的外圍設(shè)備Typical peripheral devices 微孔板存放裝置 Microplate storage unit 條形碼識別器

10、 Bar code scanner 液體轉(zhuǎn)移Liquid transfer 培養(yǎng)箱 incubator Microplate storage unit stacker carousel ORCASystem Thank You Vesicle to Plasma Membrane Translocation Example Pathway Therapeutic area GLUT4 Insulin Diabetes Receptor channel recycling Endosomal Many Target GLUT4 Host cell type CHO-hIR Stimulation

11、 Insulin Timescale 20 min A human GLUT4 assay in Xcellsyz Ltd conditionally immortalized human fat and muscle cell lines is under development Cytoplasm to Membrane Translocation Example Pathway Therapeutic area PKCa Phosphoinositide Cancer PKCb Phosphoinositide Diabetic complications PKCe Phosphoino

12、sitide Cardiovascular AktPKB Growth factor Cancer Diabetes Arno PI3-K Many b-Arrestin GPCRs Many Target Akt1 PKBa Host cell type CHO-hIR Stimulation IGF-1 insulin Timescale 5 min Assay read on IN Cell Analyzer with the Membrane Spot Analysis Module MSPO 要素二化合物樣品庫制備 結(jié)構(gòu)多樣性Chemical diversity 類藥性Drug-li

13、ke Lipinski規(guī)則 MW 500 ClogP 5 H bond donors 5 H bond acceptors 10 Properties of an Average Drug Undesirable Compounds Unstable Reactive Michael acceptor Toxic Liquid General metal chelator Polyaromatic metallocompound 篩選樣品來源 傳統(tǒng)化學(xué)合成分離 合成化合物 分離的天然產(chǎn)物純化合物和粗提物有效部位 組合化學(xué)合成 從化合物數(shù)量和結(jié)構(gòu)多樣性上充實供篩選的化合物庫 與其他機構(gòu)的合作交換

14、或購買 傳統(tǒng)化學(xué)合成和分離 單個合成分步純化 一個化學(xué)工作者一年合成化合物的數(shù)量從不足一百個 特點數(shù)量相對較少但各化合物相關(guān)數(shù)據(jù)全質(zhì)量較高 對特定的靶點SAR明確對一個全新靶點這些知識有助于產(chǎn)生新的先導(dǎo)化合物 組合化學(xué) 通過各反應(yīng)單體之間的不同組合方式在短時間內(nèi)生成大量的化合物純的單一化合物或單一化合物的混合物供醫(yī)藥研究或其他用途如圖示 特點 化合物數(shù)量大相對結(jié)構(gòu)多樣性 易于設(shè)計合成-100000 compounds and more in a year with a few chemists and automation SAR的產(chǎn)生 Drug-like 組合化學(xué) 發(fā)掘天然產(chǎn)物資源 大自然是

15、另外一個能提供具有結(jié)構(gòu)多樣性小分子有機化合物的主要來源 經(jīng)典方法-分離純化結(jié)構(gòu)鑒定活性測試-費時效率低遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足現(xiàn)代高通量篩選的需要這在一定程度上影響了天然產(chǎn)物來源的樣品在近年來的藥物研究中受重視程度 從結(jié)構(gòu)多樣性的角度考慮大自然可能給予我們的結(jié)構(gòu)多樣性大大高于組合化學(xué)因而天然產(chǎn)物或天然來源的樣品的重要性不容忽視這也是現(xiàn)代天然產(chǎn)物化學(xué)研究的新的切入點 天然化合物庫Nature Product Pool 盡管許多天然產(chǎn)物在一些特定生物模型上被篩選過但至今沒有多少化合物在所有現(xiàn)存的模型上被廣譜篩選過的事實似乎給我們這樣一種信息隨著新的藥物篩選模型的不斷涌現(xiàn)一些已知的天然化合物可能會被發(fā)現(xiàn)具有全新

16、的生物活性 天然產(chǎn)物對新藥發(fā)現(xiàn)和開發(fā)的重要性 天然產(chǎn)物特別是植物中的天然產(chǎn)物作為藥物用途的歷史非常古老為什么自然界能產(chǎn)生對人體疾病有效的物質(zhì) 為什么20世紀(jì)后半葉對從天然產(chǎn)物尋找新藥失去了興趣 為什么最近制藥企業(yè)又對來源于天然物的先導(dǎo)化合物產(chǎn)生了興趣 為什么自然界能產(chǎn)生對人體疾病有效的物質(zhì) 化學(xué)家和生物化學(xué)家對次級代謝產(chǎn)物所有非蛋白天然產(chǎn)物的產(chǎn)生提出了六種主要的假設(shè)Haslam歸納如下 1次級代謝產(chǎn)物是無特定生理功能的單純排泄物 2次級代謝產(chǎn)物曾經(jīng)起過功能代謝作用但目前其作用已失去 3次級代謝產(chǎn)物是所有體內(nèi)變化的產(chǎn)物在生物體內(nèi)沒有任何真正的作用 4次級代謝產(chǎn)物是進(jìn)化過程中的一例在新化合物產(chǎn)生之

17、前次級代謝物是為了保存進(jìn)化所必需的物質(zhì)而存在 5次級代謝產(chǎn)物為初級代謝所不需要的酶提供發(fā)揮作用的場所重要的是次級代謝過程而不是次級代謝產(chǎn)物 6次級代謝能產(chǎn)生防御物質(zhì)和其他重要的生理活性物質(zhì)對生物體的生存具有重要作用 為什么20世紀(jì)后半葉對從天然產(chǎn)物尋找新藥失去了興趣 20世紀(jì)70年代末興起的組合化學(xué)的發(fā)展使得短期有效合成上萬個化合物成為可能 隨著具有自動化系統(tǒng)的高通量篩選技術(shù)的發(fā)展每天可以篩選50000個以上的樣品為組合化學(xué)合成的樣品提供一種快速篩選方法 天然生理活性物質(zhì)分離的復(fù)雜化和大量生物材料獲得不易 天然產(chǎn)物研究的復(fù)活 天然產(chǎn)物研究的成功 天然產(chǎn)物研究的獨特性 新篩選方法的影響 根據(jù)新藥

18、的研發(fā)過程設(shè)計有效的天然產(chǎn)物研究方法 天然材料的獲得和提取 有效的篩選方法 天然生理活性物質(zhì)的分離 快速有效的結(jié)構(gòu)解析方法 生物學(xué)的評價 天然生理活性物質(zhì)的大量獲得 構(gòu)效關(guān)系研究 天然產(chǎn)物或其類似物作為藥品實例 61 of 877 small molecule drugs introduced worldwide during the period 1981-2002 can be traced to or were inspired by natural products 洛伐他汀 Lovastatin HMG-CoA抑制劑 CompactinR1 R2 H Mevinolin R1 CH3

19、R2 H Simvastin R1 CH3R2 CH3 Pravastatin Fluvastatin Cerivastin Atorvastin 環(huán)孢菌素ACyclosporine A 真菌Trichoderma polysporum分離 抑制器官移植排異反應(yīng)的免疫抑制劑 紫杉醇 紫杉醇 1 Paclitaxel Taxol 是從太平洋紅豆杉Taxus brevifolia樹皮中提取分離得到的天然二萜化合物 多西紫杉醇 2 Docetaxel Taxotere 是在紫杉醇的結(jié)構(gòu)修飾和改造過程中通過半合成方法得到的 2001年全世界紫杉醇年銷售額在20億美元以上多西紫杉醇年銷售額達(dá)到10億美元

20、以上這兩種藥物已經(jīng)成為當(dāng)前也是歷史上最為暢銷的抗癌藥物 喜樹堿及其衍生物 Camptothecin R1 R2 R3 H Topotecan R1 HR2 CH2N CH3 2R3 OH Irinotecan R1 CH2CH3R2 HR3 A 9-Aminocamptothecin R1 R3 HR2 NH2 9-Nitrocamptothecin R1 R3 HR2 NO2 A 喜樹堿及其衍生物是DNA局所異構(gòu)酶 DNA toposomerase 抑制劑 嗎啡生物堿 MorphineR H CodeineR CH3 Buprenorphone活性為Morphine 2550倍成癮性低于嗎啡

21、 Pentazocine活性僅為嗎啡的30但成癮性極低 天然產(chǎn)物研究的未來 利用組合化學(xué)合成非天然的天然物或類天然產(chǎn)物庫 多樣性導(dǎo)向合成 diversity-oriented synthesis Galanthamine 四環(huán)骨架化合物庫的建立和分泌途徑抑制劑及高爾基-質(zhì)膜運輸抑制劑Secramine A 的發(fā)現(xiàn) Shair M D and Kirchhausen T Nature chemical biology 2006 2 39-46 2527 compounds were synthesized Compound Storage Solid Long-term storage DMSO

22、 solution Long-term storage 10 year Working solutions Compound plates Mother Plates DMSO solutions from vendors Daughter Plates DMSO solutions 1 mgml Assay Plates Aqueous solutions 25 gmL compound 25 DMSO 20 L 80 Compounds 352 Compounds 88 Compounds Sample management technology 化合物庫是醫(yī)藥公司和研究機構(gòu)最寶貴的資產(chǎn)其

23、數(shù)量和質(zhì)量的重要性需要高可靠性的自動化儲存和檢索系統(tǒng) 專業(yè)的樣品管理公司可提供整套的樣品管理產(chǎn)品包括 自動化的儲存系統(tǒng) 大型系統(tǒng)可儲存60000000樣品 儲存環(huán)境溫度可達(dá)到-80 自動化樣品處理設(shè)備 樣品稱量溶解微孔板間復(fù)制封膜Cherry picking 軟件 儲存系統(tǒng)控制軟件樣品管理系統(tǒng)軟件 耗材 微孔板微試管封膜Barcode Sample management technology 瑞士Tecan公司的樣品自動化儲存系統(tǒng)產(chǎn)品 Click to view the video REMP Large-size storeTM LSS 要素三自動化 自動化技術(shù)的應(yīng)用提高篩選效率擺脫人為誤差因

24、素 微孔板Microplate 微孔板Microplate是許多方法和解決方案的最終決定因素盡管近年來的芯片技術(shù)發(fā)展很快但微孔板在生物醫(yī)藥研究中仍扮演著不可替代的角色正是微孔板的應(yīng)用使人們提出了將多個反應(yīng)管以平行方式同時處理的概念這些概念一定程度上大大促進(jìn)了自動化篩選系統(tǒng)和工作站的快速發(fā)展 對于所有開發(fā)的儀器而言微孔板是一個共同的標(biāo)準(zhǔn)同時標(biāo)準(zhǔn)化的要求也增加了現(xiàn)代自動化系統(tǒng)的可靠性其中96孔板和384孔板都已經(jīng)制定了相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn) Society of Biomolecular Screening task force "Standards" in Automation and

25、instrumentation 但是其他的高密度板如86415363456甚至9600孔板目前還沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)這些標(biāo)準(zhǔn)或準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)板的使用已經(jīng)大大地降低了篩選成本同時增加了通量 Microplates 微孔板是篩選的載體其制造技術(shù)也隨著篩選技術(shù)的發(fā)展而發(fā)展包括 微孔板的顏色和材料 微孔板微孔的設(shè)計和密度 微孔板材料的表面處理 Fluorogenic Quenched Substrate FRET Example of use of FRET in a protease assay Matayoshi et al Science 247 954 1990 時間分辨熒光共振能傳遞Time Resolv

26、ed FRET LANCE Assay for Kinase LANCE Assay for Transferase and Nuclear receptor LANCE Assay for Protease and Helicase AlphaScreen AlphaScreen for PIP3 AlphaScreen for cAMP BRET 閃爍親近檢測法 Scintillation Proximity Assay SPA FlashPlate - SPA without Beads Bind Receptor Or Target to Plate Radiolabeled Trac

27、er and Sample added Only bound Tracer is Measured 常用的蛋白水解酶檢測方法 常用的蛋白水解酶檢測方法 常用的激酶檢測方法 常用的磷酸酯酶檢測方法 以酶為靶點 以酶為靶點進(jìn)行的高通量篩選的優(yōu)化及標(biāo)準(zhǔn)化涉及以下幾個步驟 確定反應(yīng)條件如緩沖液pH溫度 天然或合成的底物的確定 酶動力學(xué) 信號窗口的評價 對已知抑制劑的反應(yīng)情況 底物轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物后分別使用顯色反應(yīng)熒光或放射性化學(xué)的方法等適用的靶點不僅包括蛋白酶激酶和磷酸酯酶也包括其它酶類如DNA連接酶和解旋酶 細(xì)胞水平檢測 熒光成像檢測 FLIPR 貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞中Fluo-3的熒光強度間接反映鈣離子的

28、濃度在FLIPR實驗中可以用96孔或384孔板對多個樣品同時檢測測定熒光強度的過程僅需1秒可進(jìn)行鈣離子內(nèi)流的動力學(xué)檢測 FLIPR functional screening assay L GTP GDP PLC inositol phosphates Ca2 Fluorescent dye fluorescent signal 報告基因 報告基因受一個可誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控從而響應(yīng)受體的活動并指導(dǎo)報告蛋白的合成 對應(yīng)不同的細(xì)胞株可有多種報告基因和載體可供選擇常用的有螢火蟲熒光素酶 luciferase 分泌型堿性磷酸酯酶 secreted alakaline phosphatase SEAP

29、氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶 chloramiphenicol acetyltransferase CAT -半乳糖苷酶 -galactosidase -內(nèi)酰胺酶和綠色熒光蛋白 GFP Reporter Gene Bait Protein Binding Domain Prey Protein Activation Domain Two hybrid proteins are generated with transcription factor domains Both fusions are expressed in a yeast cell that carries a reporter gene

30、whose expression is under the control of binding sites for the DNA-binding domain The Two-Hybrid System Reporter Gene Bait Protein Binding Domain Prey Protein Activation Domain The Two-Hybrid System Interaction of bait and prey proteins localizes the activation domain to the reporter gene thus activ

31、ating transcription Since the reporter gene typically codes for a survival factor yeast colonies will grow only when an interaction occurs Quantum dots Invitrogen 公司的Qdot技術(shù) Quantum dots 是一種與蛋白質(zhì)尺寸相當(dāng)?shù)陌雽?dǎo)體材料具有獨特的熒光特性已成為篩選藥物的有利工具 熒光持續(xù)時間時間長適合時間分辨檢測 顏色多樣在同一激發(fā)波下不同尺寸的微利可發(fā)出多種激發(fā)光加上其表面可以耦聯(lián)多種生物分子可同時標(biāo)記多個靶點 安全細(xì)胞毒性

32、低可用于活細(xì)胞或者體內(nèi)研究 Qdot的結(jié)構(gòu) High Content Screening High Content Screening Cellomics ArrayScan KineticScan Molecular Devices Discovery-1 Visualize and analyze cell populations Identify sub-cellular protein localization Perform multi-parameter analysis Live cell assays to detect translocation of signaling p

33、roteins primary screening lead profiling Pathway screening for functional effect rather than specific mode of action eg in vitro binding catalytic activity Modulation of protein translocation is an alternative to inhibition of catalytic activity protein translocation modulators Translocation Assay P

34、rotein Translocation is Essential for Intracellular Signaling The PKBAkt Pathway Greater Selectivity with Translocation Modulators Active Site inhibitors often lack specificity and selectivity unwanted side effects Many signalling proteins with very different functions share similar active sites - e

35、g Protein Kinase C family ATP and Substrate binding sites cPKC nPKC aPKC Other binding sites X X X X X X PKC catalytic inhibitors all act on ATP-binding site Other binding sites could be targets for specific selective inhibitors GFP Fusion Proteins for Detecting Translocations molecule of interest G

36、FP promoter Make stable transfected cell lines Quantify intracellular translocations of target in high throughput Membrane to Cytoplasm Translocation Example Pathway Therapeutic area PLCd Phosphoinositide Many MARCKS PKC Cancer Diabetes Membrane Receptors Receptor internalization Many Target PLC-PH

37、domain Host cell type CHO-hIR Stimulation ATP Timescale 5-20 sec Cytoplasm to Nucleus Translocation Example Pathway Therapeutic area p65 NFkB TNF etc Inflammation ERK1 MAPK Cancer p38 Stress Inflammation JNK cJun Cancer b-catenin Wnt Cancer Nuclear receptors RXR LXR estrogen etc Many TFs Transcripti

38、on Many Target Erk1 Host cell type HeLa Stimulation FCS hEGF Timescale 10 min 高通量藥物篩選與創(chuàng)新藥物研究 中國科學(xué)院上海藥物研究所 國家新藥篩選中心 李佳 內(nèi)容 高通量藥物篩選 模型建立化合物制備自動化數(shù)據(jù)處理 我國高通量藥物篩選的現(xiàn)狀 我們在高通量藥物篩選與創(chuàng)新藥物研究方面的策略 組合篩選模型體系分子家族篩選模型體系化學(xué)生物學(xué)方法研究活性化合物作用機制 我們在高通量藥物篩選與創(chuàng)新藥物研究方面的研究實例 化合物資源 藥物發(fā)現(xiàn) DRUG DISCOVERY 藥物開發(fā) DRUG DEVELOPMENT 1 臨床前研究

39、2 臨床研究 藥物候選化合物 藥 新 1藥物先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn) 2藥物先導(dǎo)化合物的結(jié)構(gòu)優(yōu)化 新藥研究的兩個階段 分子生物學(xué) 細(xì)胞生物學(xué) 基因組學(xué) 蛋白組學(xué) 生物信息學(xué) 結(jié)構(gòu)生物學(xué) 計算機輔助藥物設(shè)計 藥物化學(xué) 高通量篩選 技術(shù) 天然產(chǎn)物 化學(xué)合成 組合化學(xué) 化合物庫 篩選模型 結(jié)構(gòu)優(yōu)化 先導(dǎo)化合物 篩選 藥物發(fā)現(xiàn)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)高新技術(shù)集中的焦點 高通量篩選HTS 運用自動化的篩選系統(tǒng)在短時間內(nèi)在特定的篩選模型上完成數(shù)以千計甚至萬計化合物樣品的活性測試一般而言日篩選能力應(yīng)在10000次以上方可以稱為高通量篩選 The Evolution of HTS 高通量篩選 快速-每天篩選上萬藥次 微量-篩選樣品

40、需要量為微克級 靈敏-準(zhǔn)確判斷篩選樣品的活性和選擇性 經(jīng)濟(jì)-篩選費用低 常規(guī)篩選 高通量篩選 常規(guī)篩選和高通量篩選 高通量篩選的四個要素 樣品制備 自動化 HTS 模型建立 數(shù)據(jù)處理 要素一高通量篩選模型建立 針對某一特定靶點設(shè)計一種生物活性檢測方法并使之適用于高通量篩選 選擇高通量篩選的靶點 來源于基礎(chǔ)科學(xué)對于一種疾病進(jìn)行細(xì)致研究后的理解和發(fā)現(xiàn)根據(jù)這些結(jié)果我們可以選擇其中關(guān)鍵的生物效應(yīng)環(huán)節(jié)進(jìn)行干預(yù)這些靶點包括受體酶激素因子離子通道和蛋白間的相互作用等 Current Drug Targets Membrane Receptors45 Enzymes28 Hormones and Factors11 Ion