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1、第三章 消毒與滅菌_總結(jié)介紹幾個(gè)基本概念1滅菌:應(yīng)用物理或化學(xué)方法殺滅物體中所有的病原微生物、非病原微生物以及芽胞和霉菌孢子的方法。2消毒:應(yīng)用物理或化學(xué)方法殺滅物體中的病原微生物,而對(duì)非病原微生物及芽胞,孢子不要求全部殺死。3防腐:應(yīng)用物理或化學(xué)方法阻止和抑制微生物的生長繁殖的方法。4無菌操作法:防止或杜絕一切細(xì)菌進(jìn)入動(dòng)物體或其他物體的方法。5濾過除菌:液體或氣體通過濾過作用除去其中所存在的細(xì)菌。一般用0.22微米濾膜,但不能除去病毒,霉形體及L型細(xì)菌。 第一節(jié) 物理因素n 溫度n 干燥n 滲透壓 n 輻射 n 過濾n 其他物理因素一、溫度(一)高溫對(duì)微生物的影響n 高溫對(duì)微生物有明顯的致死
2、作用,其主要原因是高溫能使菌體蛋白質(zhì)變性或凝固,酶失去活性,核酸結(jié)構(gòu)遭到破壞等,從而導(dǎo)致其死亡。 n 多數(shù)細(xì)菌,酵母菌和霉菌的營養(yǎng)細(xì)胞和病毒在50-65 º10 min可以致死。n 細(xì)菌芽孢,在121 º下20min才能致死, n 同種微生物老齡菌比幼菌耐熱。n 干熱滅菌(dry heat sterilization ) 焚燒滅菌法:常用于廢棄物動(dòng)物尸體等處理。 燒灼滅菌法:是直接火焰滅菌,如接種環(huán)滅菌。 烘烤滅菌法;實(shí)驗(yàn)室用干燥箱烘。一般是1602小時(shí)即可達(dá)到滅菌目的。n 濕熱滅菌(mosist heatsterilization) 在同溫度下,濕熱滅菌的效果比干熱滅菌好
3、;因?yàn)椋篴比干熱更易使菌體蛋白凝固。b濕熱穿透力強(qiáng);c濕熱可以釋放大量潛熱。n 濕熱滅菌法 A. 高壓蒸汽滅菌法B. 煮沸消毒法C. 流通蒸汽消毒法D. 間歇蒸汽滅菌法E. 巴氏消毒法A、高壓蒸汽滅菌法 是濕熱滅菌中最好的方法,通常1.05kg/cm2,的壓力下面(此時(shí)溫度121º)處理1530min。要排冷空氣,否則會(huì)形成假壓力,雖然壓力達(dá)到要求,溫度卻達(dá)不到相應(yīng)溫度,而影響滅菌效果。B、煮沸消毒法 物品在水中煮沸 15min,可殺死所有營養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢。 在水中加入的a2CO3 或的石碳酸效果更好。此法適合注射器和解剖用具的消毒。 C、間歇滅菌法(fractional ste
4、rilization)a) 是用常壓蒸汽反復(fù)幾次進(jìn)行滅菌的方法。b) 主要用于不宜高壓滅菌的培養(yǎng)基,不耐熱的藥物和營養(yǎng)物等c) 方法是將待滅菌物品置于蒸鍋內(nèi)加熱到沸騰維持15-30min殺死營養(yǎng)細(xì)胞,取出冷卻后在37恒溫培養(yǎng)24小時(shí),使芽孢萌發(fā),再用此法滅菌,反復(fù)三次,即可達(dá)到滅菌目的。D、巴氏消毒法(pasteurization)a) 是食品(牛奶)釀造(啤酒)工業(yè)中常用的方法。b) 具體做法是6365處理30min或7172度處理15 s,速冷卻至10下。c) 這樣即可殺死病原微生物。又不致?lián)p壞營養(yǎng),可保留食品飲料原有風(fēng)味。d) 為節(jié)省時(shí)間,又達(dá)到巴氏消毒的效果,現(xiàn)多用高溫瞬時(shí)滅菌132下
5、1-2 s。(二)低溫對(duì)微生物的影響 常溫冰箱保存細(xì)菌和病毒:(細(xì)菌40;病毒2070)。 低溫保存食品應(yīng)迅速冷凍,否則擾亂細(xì)胞膠體狀態(tài),使水分形成結(jié)晶,冰結(jié)晶還能機(jī)械地刺傷菌體胞膜,胞壁。 冷凍真空干燥法:采取迅速冷凍和抽真空除水原理;如凍干疫苗和凍干菌種。二、干燥 水分是微生物的正常生命活動(dòng)必不可少的。干燥會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞失水而造成代謝停止以致死亡。 微生物的種類,環(huán)境條件,干燥的程度等均影響對(duì)微生物殺滅的效果。休眠孢子抗干燥能力也很強(qiáng),在干燥條件下可長期不死,這一特性已用于菌種保藏,如用砂土管來保藏有孢子的菌種。 在日常生活中也常用烘干、曬干和熏干等方法來保存食物。三、滲透壓 細(xì)菌處于低滲液中
6、,細(xì)胞會(huì)吸水膨脹乃至破裂,稱胞漿壓出。 細(xì)胞處于高滲液中會(huì)脫水,引起細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞壁分離,稱質(zhì)壁分離,導(dǎo)致死亡。 等滲溶液對(duì)微生物生長有利四、輻射 輻射是能量通過空間傳遞的一種物理現(xiàn)象。 可見光線 肉眼可見的光線是在紅外線和紫外線之間,波長為400800nm。 日光 利用日光暴曬是常用的簡易消毒方法,許多細(xì)菌繁殖體在日光直射下2h很易死亡。紫外線:波長200300m的紫外線具有殺菌作用殺菌機(jī)理:干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄特點(diǎn):紫外線穿透力較弱應(yīng)用范圍:不耐熱物品的表面消毒電離輻射:包括高速電子、x射線和 射線。殺菌機(jī)理:產(chǎn)生游離基,破壞DNA。應(yīng)用范圍:一次性醫(yī)用塑料制品的消毒,食品的消毒不破壞其營
7、養(yǎng)成分。 五、濾過除菌法n 濾菌器:用物理阻留的方法,將液體或空氣中的細(xì)菌除去,以達(dá)到除菌目的。含有微細(xì)小孔<0.22微米,只允許液體或氣體通過,而大于孔徑的細(xì)菌等顆粒不能通過。n 適用范圍:血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌。 六 、其他物理因素n 超聲波 超聲波是由超聲波發(fā)生器產(chǎn)生的,對(duì)細(xì)胞有破壞作用,能使大多數(shù)細(xì)胞裂解死亡。n 微波 微波是一種波長短而頻率較高的電磁波。微波對(duì)微生物的殺菌作用,主要是由于微生物在微波電磁場作用下,吸收微波的能量而產(chǎn)生熱效應(yīng)所致。第二節(jié) 化學(xué)因素n 各種消毒劑可按其作用水平分為3類: (1)高效消毒劑:可以殺滅一切微生物,包括細(xì)菌繁殖體、細(xì)菌芽孢、結(jié)核
8、桿菌、真菌和病毒等。這類消毒劑又稱為滅菌劑。 如甲醛、戊二醛、過氧乙酸和環(huán)氧乙烷等。 (2)中效消毒劑 除細(xì)菌芽孢外,可殺滅各種微生物。如乙醇、酚、含氯消毒劑和碘消毒劑等。 (3)低效消毒劑 可殺滅細(xì)菌繁殖體、真菌和有囊膜病毒,但不能殺滅細(xì)菌芽孢、結(jié)核桿菌和無囊膜病毒。如新潔爾滅、洗必太等。一、常用消毒劑的實(shí)用性能見下表消毒劑類別名稱濃度(%)用途重金屬鹽紅汞2皮膚、粘膜、小創(chuàng)面消毒硫柳汞0.01生物制品防腐氧化劑高錳酸鉀0.1皮膚、尿道、水果、蔬菜消毒過氧化氫3皮膚、粘膜、創(chuàng)傷消毒過氧乙酸0.20.5塑料、玻璃、人造纖維消毒鹵素類碘液2.5皮膚消毒醇類乙醇7075皮膚、體溫計(jì)消毒酚類石炭酸3
9、5地面、器皿表面和排泄物消毒來蘇爾35同上、也常用于手及皮膚消毒表面活性劑新潔爾滅0.1手術(shù)器械消毒酸堿類生石灰1020排泄物、地面消毒染料龍膽紫24表淺創(chuàng)傷消毒二、影響消毒劑作用的因素n 消毒劑的性質(zhì)n 消毒劑的濃度與作用時(shí)間n 微生物的類型及數(shù)量n 環(huán)境中有機(jī)物的存在三、選擇適當(dāng)?shù)南緞﹏ 殺菌譜廣、有效濃度低、作用快。n 性質(zhì)穩(wěn)定、易溶于水、不易受酸堿影響。n 無腐蝕性、無毒;不易殘留。n 價(jià)格低、便于運(yùn)輸,可長期保存。第三節(jié) 生物因素n 共生:兩種或多種生物生活在一起時(shí),彼此并不損害而相互有利,稱為共生。n 寄生:一種生物從另一種生物獲得所需的營養(yǎng),賴以為生,并對(duì)后者呈現(xiàn)傷害作用者,稱
10、為寄生。n 拮抗:當(dāng)兩種微生物生活在一起時(shí),一種微生物能抑制或殺死另一種微生物,此現(xiàn)象稱為拮抗。n 協(xié)同:兩種或多種生物在同一環(huán)境中,互相協(xié)助,共同完成某種作用,而為其任何一種所不能單獨(dú)達(dá)到。一、抗生素與細(xì)菌素(一)抗生素 是某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生的能抑制或殺滅其他微生物的一種化學(xué)物質(zhì)。它主要來源于放線菌、某些真菌和細(xì)菌等。n 抗生素的作用機(jī)理: a.干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成 b.影響細(xì)胞膜的通透性 c.阻礙菌體蛋白質(zhì)的合成 d.改變核酸代謝(二)細(xì)菌素 大腸桿菌產(chǎn)生的細(xì)菌素稱大腸菌素;葡萄球菌產(chǎn)生的稱葡萄球菌素;霍亂弧菌產(chǎn)生的稱弧菌素等,每類細(xì)菌素又可分為不同的型別;細(xì)菌素僅對(duì)近緣細(xì)菌有作用
11、。1928年A.Fleming發(fā)現(xiàn)青霉素澳大利亞病理學(xué)家霍華德.弗羅里與弗萊明1940提純出青霉素。共同獲得1945年諾貝爾生理學(xué)和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng). 三、 噬菌體病毒種類很多,根據(jù)病毒寄生的對(duì)象來分,有植物病毒、動(dòng)物病毒和微生物病毒。噬菌體:是病毒中的一種,一般把侵染細(xì)菌、放線菌的病毒叫噬菌體。(把侵染真菌的病毒叫噬真菌體)噬菌體在自然界廣泛存在,在1995年發(fā)表的ICTV的病毒分類與命名第六次報(bào)告中共報(bào)道了4000余種,分別劃歸為49個(gè)病毒科.據(jù)Bradley(1967)歸納,噬菌體共有六類形態(tài)。(一)噬菌體的形態(tài)結(jié)構(gòu)與組成1、組成:主要由蛋白質(zhì)和核酸組成。2、基本形態(tài):蝌蚪形、微球形和纖絲形。3、
12、蝌蚪形噬菌體的構(gòu)造以大腸桿菌T4噬菌體為例頭部:廿面體對(duì)稱結(jié)構(gòu),由蛋白質(zhì)衣殼構(gòu)成,內(nèi)含一條DNA。頸部:薄盤狀,附頸須。尾鞘:長95nm, 衣殼粒螺旋對(duì)稱;可伸縮。 尾髓:中空,DNA可由此進(jìn)入細(xì)胞?;? 六角形盤狀物,其上有刺突、尾絲。刺突: 有吸附功能。尾絲: 有識(shí)別吸附功能。大腸桿菌T4噬菌體構(gòu)造(二)、噬菌體(phage)的繁殖噬菌體并沒有個(gè)體的生長過程,而只有其基本成分的合成和裝配,即首先將各個(gè)部件合成出來,然后裝配,所以一般將噬菌體的繁殖稱做復(fù)制。根據(jù)噬菌體與宿主的關(guān)系:烈性噬菌體:指感染宿主細(xì)胞后,能夠使宿主細(xì)胞裂解的噬菌體.溫和噬菌體(或溶源性噬菌體):噬菌體感染細(xì)胞后,將其
13、核酸整合(附著)到宿主的核DNA上,并且可以隨宿主DNA的復(fù)制而進(jìn)行同步復(fù)制,在一般情況下,不引起寄主細(xì)胞裂解的噬菌體。1、烈性噬菌體的繁殖烈性噬菌體的繁殖過程一般分為五個(gè)階段:即吸附、侵入、復(fù)制、裝配和釋放?!疚谰渥印?走累的時(shí)候,我就到升國旗哪里的一角臺(tái)階坐下,雙手撫膝,再閉眼,讓心靈受到陽光的洗滌。懶洋洋的幸福。頂 3 收藏 2【唯美句子】 一個(gè)人踮著腳尖,在窄窄的跑道白線上走,走到很遠(yuǎn)的地方又走回來。陽光很好,溫暖,柔和。漫天的安靜。頂 7 收藏 7【唯美句子】 清風(fēng)飄然,秋水緩淌。一絲云起,一片葉落,剔透生命的空靈。輕輕用手觸摸,就點(diǎn)碎了河面的臉。落葉舞步婀娜不肯去,是眷戀,是裝點(diǎn)
14、?瞬間回眸,點(diǎn)亮了生命精彩。頂 11 收藏 9【唯美句子】 幾只從南方歸來的燕子,輕盈的飛來飛去,“幾處早鶯爭暖樹,誰家新燕啄春泥,”其樂融融的山林氣息,與世無爭的世外桃源,讓人心曠神怡。頂 0 收藏 2【唯美句子】 流年清淺,歲月輪轉(zhuǎn),或許是冬天太過漫長,當(dāng)一夜春風(fēng)吹開萬里柳時(shí),心情也似乎開朗了許多,在一個(gè)風(fēng)輕云淡的早晨,踏著初春的陽光,漫步在碧柳垂青的小河邊,看小河的流水因?yàn)榻忾_了冰凍而歡快的流淌, 清澈見底的的河水,可以數(shù)得清河底的鵝軟石,偶爾掠過水面的水鳥,讓小河蕩起一層層的漣漪。河岸換上綠色的新裝,剛剛睡醒的各種各樣的花花草草,悄悄的露出了嫩芽,這兒一叢,那兒一簇,好像是交頭接耳的議
15、論著些什么,又好象是在偷偷地說著悄悄話。頂 3 收藏 4【唯美句子】 喜歡海子寫的面朝大海春暖花開,不僅僅是因?yàn)槲蚁矚g看海,還喜歡詩人筆下的意境,每當(dāng)夜深人靜時(shí),放一曲純音樂,品一盞茶,在腦海中搜尋詩中的恬淡閑適。在春暖花開時(shí),身著一身素衣,站在清風(fēng)拂柳,蝶舞翩躚的百花叢中,輕吹一葉豎笛,放眼碧波萬里,海鷗,沙灘,還有揚(yáng)帆在落日下的古船,在心曠神怡中,做一簾紅塵的幽夢。頂 0 收藏 2【唯美句子】 繁華如三千東流水,你只在乎閑云野鶴般的采菊東籬、身心自由,置身置靈魂于曠野,高聲吟唱著屬于自己的歌,悠悠然永遠(yuǎn)地成為一個(gè)真真正正的淡泊名利、鄙棄功名利祿的隱者。頂 1 收藏 3【唯美句子】 世俗名利
16、和青山綠水之間,你選擇了淡泊明志,持竿垂釣碧泉綠潭;權(quán)力富貴和草舍茅廬之間,你選擇了寧靜致遠(yuǎn),曉夢翩躚姹紫嫣紅。頂 2 收藏 3【唯美句子】 那是一株清香的無名花,我看到了它在春風(fēng)夏雨中風(fēng)姿綽約的模樣,可突如其來的秋雨,無情的打落了它美麗的花瓣,看著它在空谷中獨(dú)自凋零,我莫名其妙的心痛,像針椎一樣的痛。秋雨,你為何如此殘忍,為何不懂得憐香惜玉,我伸出顫抖的雙手,將散落在泥土里的花瓣捧在手心。頂 4 收藏 5【唯美句子】 滴答滴答,疏疏落落的秋雨,趕著時(shí)間的腳步,嘩啦啦的下起來。聽著雨水輕輕地敲擊著微薄的玻璃窗,不知不覺,我像是被催眠了一樣,漸漸的進(jìn)入了夢鄉(xiāng)。頂 3 收藏 5【唯美句子】 在這極
17、致的悲傷里,我看到了世間最美的愛,可誰又能明白,此刻的我是悲傷還是歡喜,也許只有那撥動(dòng)我心弦的秋季,才知道潛藏在我心中的眼淚。頂 4 收藏 3【唯美句子】 看著此情此景,我細(xì)細(xì)地聆聽。像是聽到了落葉的呢喃,秋風(fēng)的柔軟,在這極短的瞬間,他們一起訴說著最美的愛戀,演繹著永恒的癡纏。當(dāng)落葉安詳?shù)奶稍诖蟮?,露出幸福的模樣,你看,它多像一個(gè)進(jìn)入夢鄉(xiāng)的孩子。突然發(fā)現(xiàn),秋風(fēng)并非是想象中的劊子手,原來它只是在葉子生命的最后一刻,讓它體會(huì)到愛的纏綿,飛翔的滋味。頂 1 收藏 1【唯美句子】 很感謝那些耐心回答我的人,公交上那個(gè)姐姐,還有那位大叔,我不知道他們是不是本地人,但我們遇到的一個(gè)交警協(xié)管,一位頭發(fā)花白的
18、大姐,她是上海本地人,很和善,并不像有些人說的上海人很排外。事實(shí)上,什么都不是絕對(duì)的。頂 2 收藏 0【唯美句子】 我嗅到濃郁的香奈爾,卻也被那種陌生嗆了一鼻。也許,我卻不知道,那時(shí)的感受了。那里沒有那么美好,沒有安全感,歸屬感。我想要的自由呢,不完全地體驗(yàn)到了。頂 2 收藏 1【唯美句子】 那些繁華的都市,車水馬龍,燈紅酒綠,流光溢彩,卻充斥著一種悲哀,浮夸。我看到各種奢華,卻也看到各種卑微,我看到友善親和,也看到暴躁粗魯,我看到金光熠【優(yōu)美語句】 踏過一片海,用博識(shí)的學(xué)問激起片片微瀾;采過一叢花,正在聰慧的碰碰外送來縷縷清噴鼻;無過一個(gè)夢,決定從那里啟程。頂 0 收藏 0【優(yōu)美語句】 人生如一本書,應(yīng)該多一些精彩的細(xì)節(jié),少一些乏味的字眼;人生如一支歌,應(yīng)該多一些昂揚(yáng)的旋律,少一些憂傷的音符;人生如一幅畫,應(yīng)該多一些亮麗的色彩,少一些灰暗的色調(diào)。 頂 0 收藏 0【優(yōu)美語句】 母愛是一滴甘露,親吻干涸的泥土,它用細(xì)雨的溫情,用鉆石的堅(jiān)毅,期待著閃著碎光的泥土的肥沃;母愛不是人生中的一個(gè)凝固點(diǎn),而是一條流動(dòng)的河,這條河造就了我們生命中美麗的情感之景。 頂
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