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1、熟悉血清-谷氨?;D(zhuǎn)移酶測(cè)定(重氮比色法)原理,操作方法及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。掌握其臨床意義-谷氨?;D(zhuǎn)移酶(-glutamyl transferase,GGT,EC2.3.2.2)催化-谷氨?;茡Q反應(yīng)。本法以L-谷氨酰-萘胺為底物,在GGT的催化下,-谷氨?;D(zhuǎn)移到雙甘肽分子上,釋放出游離-萘胺,后者與重氮試劑反應(yīng)產(chǎn)生紅色化合物,其紅色深淺與-萘胺的量成正比。根據(jù)-萘胺產(chǎn)生的量計(jì)算出血清GGT活性單位。萘胺- 谷氨氨酰甘氨酰甘氨- 雙甘肽 萘胺-谷氨-LGGT酰紅色化合物 重氮氮試 萘胺-紅色化合物 重氮氮試 萘胺-1、工作試劑的配制:每瓶基質(zhì)粉均用10ML蒸餾水溶解,混合均勻即為工作試劑。顯
2、色終止液的配制:取顯色終止液A10ML與顯色終止液B0.2ml混合均勻即成。試劑空白管試劑空白管標(biāo)準(zhǔn)管標(biāo)準(zhǔn)管樣品管樣品管基質(zhì)液ml111標(biāo)準(zhǔn)液ul40樣品ul40充分混合,37度水浴15分鐘顯色終止液ml222充分混合,37度水浴5分鐘,上機(jī)測(cè)定,測(cè)定波長(zhǎng)510nm標(biāo)標(biāo)測(cè)樣CAACC標(biāo)=0.06mmol/L參考范圍:8-50U/L人體各器官GGT含量不同,腎最高,其次是前列腺、胰、肝等器官。腎中GGT含量雖高,但腎臟疾病時(shí),血液中酶活性增高不明顯,可能是腎單位病變時(shí),GGT經(jīng)尿排出,所以測(cè)定尿中GGT活性可能有助于診斷腎疾病。血清GGT測(cè)定主要用于診斷肝膽疾?。?.原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性肝癌 血清中GGT可高于正常的幾倍至幾十倍,且GGT活性與腫瘤大小及病情嚴(yán)重程度呈平行關(guān)系,對(duì)GGT動(dòng)態(tài)觀察,有助于判斷療效及預(yù)后。2.阻塞性黃疸 肝內(nèi)或肝外性膽道阻塞,GGT明顯升高。一般講,阻塞發(fā)生愈快,GGT上升愈迅速,阻塞愈重,上升也愈顯著。3.病毒性肝炎和肝硬化 肝炎時(shí)血清GGT升高,上升幅度低于ALT,肝炎恢復(fù)期,GGT是惟一仍然升高的酶;如長(zhǎng)期升高可能有肝壞死的傾向。4.乙醇性肝炎 乙醇性肝硬化、肝炎者血清GGT幾乎都上升,為乙醇性肝病的特征。
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