祛風(fēng)消痛膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

1、    祛風(fēng)消痛膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究        摘要采用薄層色譜法鑒別防己、青風(fēng)藤等主要藥味，用薄層掃描法測定粉防己堿的含量。結(jié)果：定性鑒別斑點(diǎn)清晰，分離度好；定量測定的平均回收率為97.50%，RSD=1.36%(n=3)。此定性定量方法簡便、靈敏、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于控制制劑的質(zhì)量。關(guān)鍵詞祛風(fēng)消痛膠囊；薄層色譜；粉防己堿；薄層掃描法中號R927文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:1006-8783(2000)03-0206-03 祛風(fēng)消痛膠囊是由防己、青風(fēng)藤、黃芪等十多味中藥以一

2、定工藝制成的復(fù)方制劑，具有祛風(fēng)通絡(luò)、清熱利濕、祛淤止痛之功，主要用于治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎。為控制制劑的質(zhì)量，本文建立了防己、青風(fēng)藤、黃芪、當(dāng)歸和赤芍的薄層鑒別方法，以及粉防己堿的含量測定方法。1儀器和試藥CS-9000型薄層掃描儀(日本島津)，PBQ-型薄層自動鋪板器(重慶南岸新力實(shí)驗(yàn)儀器廠)，定量毛細(xì)管(Drummond USA)。硅膠G(青島海洋化工廠)；粉防己堿、防己諾林堿、青藤堿、阿魏酸、黃芪甲苷和芍藥苷對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供，祛風(fēng)消痛膠囊為自制，所用試劑均為分析純。2薄層色譜鑒別2.1防己、青風(fēng)藤的鑒別取膠囊內(nèi)容物1.0 g，加甲醇20 mL，超聲提取25 min，濾過，濾

3、液蒸干，加甲醇1 mL溶解，作為供試液。根據(jù)處方比例稱取藥材，按制劑制備工藝及供試液制備方法，制得缺防己、缺青風(fēng)藤的陰性對照液和防己、青風(fēng)藤藥材對照液。另取粉防己堿、防己諾林堿、青藤堿對照品適量，以甲醇溶解制成1 mg/mL的對照品溶液。吸取上述供試液、陰性對照液、藥材對照液各5 L，對照品溶液2 L，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以V(氯仿)V(乙酸乙酯)V(甲醇)=724為展開劑展開，取出，晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對照液無相應(yīng)斑點(diǎn)，見1。2.2當(dāng)歸的鑒別取膠囊內(nèi)容物0.5 g，加乙醚20 mL，超聲提取20 min，濾過，

4、濾液蒸干，加甲醇1 mL溶解作為供試液。根據(jù)處方比例稱取藥材，按制劑制備工藝及供試液制備方法，制得缺當(dāng)歸的陰性對照液和當(dāng)歸藥材對照液。另取阿魏酸對照品適量，以甲醇溶解制成1 mg/mL的對照品溶液。分別吸取供試液、陰性對照液、藥材對照液各5 L，對照品溶液2 L，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以V(苯)V(氯仿)V(冰乙酸)=651展開，取出，晾干，于365 nm紫外光燈下觀察。供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應(yīng)的位置上有相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對照液無相應(yīng)斑點(diǎn)，見2。2.3黃芪的鑒別取膠囊內(nèi)容物1 g，加水30 mL溶解，以乙醚萃取2次，每次20 mL，棄去乙醚液，再以水飽和的正丁醇萃取2次，

5、每次20 mL，合并正丁醇萃取液，以=0.5%氫氧化鈉溶液洗滌2次，每次15 mL，棄去堿水液，回收正丁醇至干，殘?jiān)蛹状? mL溶解作為供試液。根據(jù)處方比例稱取藥材，按制劑制備工藝及供試液制備方法，制得缺黃芪的陰性對照液和黃芪藥材對照液。另取黃芪甲苷對照品適量，以甲醇溶解制成1 mg/mL的對照品溶液。分別吸取供試液、陰性對照液、藥材對照液各5 L，對照品溶液2 L，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以V(氯仿)V(甲醇)V(水)=653510下層液為展開劑展開，取出，晾干，噴以=10%硫酸乙醇液，于105 烘5 min。供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對照液無

6、相應(yīng)斑點(diǎn)，見3。2.4赤芍的鑒別取膠囊內(nèi)容物0.5 g，加水30 mL溶解，用水飽和正丁醇萃取2次，每次20 mL，合并萃取液，蒸干，殘?jiān)约状? mL溶解作為供試液。根據(jù)處方比例稱取藥材，按制劑制備工藝及供試液制備方法，制得缺赤芍的陰性對照液和赤芍藥材對照液。另取芍藥苷對照品適量，以甲醇溶解制成1 mg/mL的對照品溶液。分別吸取供試液、陰性對照液、藥材對照液各5 L，對照品溶液2 L，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以V(氯仿)V(甲醇)=72展開，取出，晾干，噴以=5%香草醛硫酸液，于105 烘5 min。供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對照液無相應(yīng)斑點(diǎn)，

7、見4。1防己、青風(fēng)藤的鑒別1 粉防己堿2 防己諾林堿3 青藤堿4 供試液5 缺防己陰性對照液6 缺青風(fēng)藤陰性對照液7 防己藥材8 青風(fēng)藤藥材2當(dāng)歸的鑒別1 阿魏酸2 供試液3 陰性對照液4 當(dāng)歸藥材3黃芪的鑒別1 黃芪甲苷2 供試液3 陰性對照液4 黃芪藥材4赤芍的鑒別1 芍藥苷2 供試液3 陰性對照液4 赤芍藥材3粉防己堿的含量測定3.1薄層層析條件吸附劑，硅膠G-0.5% CMC-Na薄層板，用薄層自動鋪板器鋪制，厚0.6 mm，105 活化1 h；展開劑，V(氯仿)V(乙酸乙酯)V(甲醇)=724；展距，12 cm；顯色劑，稀碘化鉍鉀試液。3.2薄層掃描條件掃描方式，雙波長反射式鋸齒掃描

8、；檢測波長，S=515 nm，R=650 nm；狹縫，0.4 mm×0.4 mm；線性參數(shù)，SX=3；靈敏度，中。3.3對照品溶液的制備精密稱取粉防己堿對照品適量，加甲醇溶解定容，制成0.74 mg/mL的對照品溶液。3.4線性關(guān)系考察精密吸取粉防己堿對照品溶液1、2、3、4、5 L點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，依上述條件展開、顯色、掃描測定，以點(diǎn)樣量為橫坐標(biāo)，斑點(diǎn)峰面積積分值為縱坐標(biāo)，得回歸方程A=36 929.7c+4 664.9，r=0.999 2(n=5)。結(jié)果表明粉防己堿在0.743.70 g范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。3.5穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取粉防己堿對照品溶液3 L點(diǎn)于薄層板上，依

9、法測定斑點(diǎn)峰面積積分值，每隔15 min測1次，連續(xù)測9次，得RSD=3.82%，表明斑點(diǎn)顯色后在2 h內(nèi)穩(wěn)定。3.6精密度試驗(yàn)精密吸取粉防己堿對照品溶液，于同一薄層板上點(diǎn)相同量5點(diǎn)，每點(diǎn)3 L，依法測定斑點(diǎn)峰面積積分值，測得RSD=2.89%；對其中一點(diǎn)連續(xù)掃描測定5次，測得RSD=2.76%；精密吸取對照品溶液3 L，分別點(diǎn)于5個薄層板上，依法測定斑點(diǎn)峰面積積分值，測得RSD=2.05%。結(jié)果表明同板內(nèi)重現(xiàn)性、異板間精密度和儀器精密度均良好。3.7回收率試驗(yàn)精密稱取已知含量的膠囊內(nèi)容物0.8 g，準(zhǔn)確加入粉防己堿對照品溶液(1.22 mg/mL)0.4、0.5、0.6 mL，按樣品測定項(xiàng)下

10、方法制備供試液并進(jìn)行測定，測得回收率為99.14%、98.97%、96.40%，平均回收率為97.50%，RSD=1.36%(n=3)。3.8樣品測定取膠囊10粒，傾出內(nèi)容物并混勻，精密稱取1.5 g，加乙醇30 mL回流提取2次，每次1 h，合并提取液并蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⒍ㄈ葜? mL，作為供試液。精密吸取供試液4 L，對照品溶液2 L、4 L，分別點(diǎn)于同一薄層板上，依法測定斑點(diǎn)峰面積積分值，用外標(biāo)兩點(diǎn)法計(jì)算粉防己堿含量，結(jié)果見表1。表1樣品含量測定結(jié)果批號/(mg.g-1)RSD/%9901200.771 70.780 00.752 01.859903150.821 50.831 60

11、.804 31.699905100.748 50.735 40.720 21.934討論4.1采用本文方法可同時鑒別防己、青風(fēng)藤兩種藥材，使定性分析更為簡便。4.2防己為方中君藥，故測定其所含粉防己堿的含量以控制制劑質(zhì)量。粉防己堿的含量測定方法有HPLC法1、薄層掃描法2,3、薄層-紫外分光光度法4等多種，由于本制劑組成藥味多，成分復(fù)雜，本文采用前處理操作簡單的薄層掃描法進(jìn)行測定。實(shí)驗(yàn)中，比較氯仿、乙醇、甲醇3種提取溶劑和加熱回流提取、超聲提取兩種提取方式，以及V(苯)V(丙酮)V(二乙胺)=810.5、V(氯仿)V(甲醇)=51等多種展開系統(tǒng)，結(jié)果以文中所述的提取方法和展開系統(tǒng)效果最佳，測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。羅毅（湖北醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥學(xué)部，湖北 武漢 430060）張洪（湖北醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥學(xué)部，湖北 武漢 430060）羅順德（湖北醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥學(xué)部，湖北 武漢 430060）張華（湖北醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥學(xué)部，湖北 武漢 430060）參考文獻(xiàn)1江俊，喬明，劉超英.中藥防己中漢防己甲素的HPLC法定量分析