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文檔簡介

1、實驗九實驗九抗抗 酸酸 染染 色色一、實驗目的：一、實驗目的：1.掌握抗酸染色的原理和方法掌握抗酸染色的原理和方法2掌握結核分支桿菌痰涂片的報告方掌握結核分支桿菌痰涂片的報告方法。法。v分枝桿菌的細胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)，主要是分枝菌酸，它包圍在肽聚糖的外面，所以分枝桿菌一般不易著色，要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結合后，就很難被酸性脫色劑脫色，故名抗酸染色抗酸染色。v齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復紅牢固結合成復合物，用鹽酸酒精處理也不脫色。當再加堿性美蘭復染后，分枝桿菌仍然為紅色，而其他細菌及背景中的物質(zhì)為蘭色。三、實驗材料：三、實驗材

2、料：細菌：結核桿菌染液：石炭酸復紅液、3%鹽酸酒精、堿性美蘭溶液其它：接種環(huán)、酒精燈、載玻片等四、實驗方法：四、實驗方法：1、細菌涂片的制備、細菌涂片的制備 1）涂片：）涂片：20mm*25mm薄涂片或薄涂片或 20mm*15mm厚涂片厚涂片 2）干燥：自然干燥）干燥：自然干燥 3）固定：火焰固定）固定：火焰固定四、實驗方法：四、實驗方法：1、細菌涂片標本的制備、細菌涂片標本的制備 涂片涂片 干燥干燥 固定固定2、染、染 色色3、油鏡觀察油鏡觀察1）初染：用玻片夾夾持涂片標本，滴加石炭酸復紅）初染：用玻片夾夾持涂片標本，滴加石炭酸復紅2-3滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽滴，在火焰高

3、處徐徐加熱，切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽即暫時離開，若染液蒸發(fā)減少，應再加染液，以免即暫時離開，若染液蒸發(fā)減少，應再加染液，以免干涸，加熱干涸，加熱5-10分鐘，待標本冷卻后用水沖洗。分鐘，待標本冷卻后用水沖洗。2）脫色：）脫色： 3%鹽酸酒精脫色鹽酸酒精脫色301；用水沖洗。；用水沖洗。3）復染：用堿性美蘭溶液復染）復染：用堿性美蘭溶液復染1，用水沖洗后用吸，用水沖洗后用吸水紙吸干。水紙吸干。五、實驗結果：五、實驗結果：結核桿菌呈紅色結核桿菌呈紅色，常堆積成團，排列無序，偶呈分枝狀生長。背景及非抗酸性細菌呈蘭色。六、注意事項：六、注意事項：1、無菌操作、無菌操作2、涂片厚度要適中、涂片厚度要適中3、固定、固定4、沖洗、沖洗5、染色時間、染色時間6、初染加熱的溫度，勿沸騰、初染加熱的溫度，勿沸騰準備v細菌：卡介苗

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