主管檢驗師臨床醫(yī)學檢驗免疫學和免疫檢驗第二十三章超敏反應性疾病及其免疫檢測

1、如文檔對你有用，請下載支持！第二十三章超敏反應性疾病及其免疫檢測第一節(jié)I型超敏反應第二節(jié)n型超敏反應第三節(jié)m型超敏反應第四節(jié)W型超敏反應第一節(jié)I型超敏反應超敏反應，又稱為變態(tài)反應，是指機體對某些抗原初次應答致敏后，再次接觸相同抗原刺激時，所出現(xiàn)的一種以生理功能紊亂或組織細胞損傷為主的異常免疫應答。I型超敏反應主要由特異性IgE抗體介導產生，其發(fā)生速度最快，常在第二次接觸相同抗原后數分鐘內即出現(xiàn)臨床反應，其反應可發(fā)生于局部，亦可發(fā)生于全身，故又稱速發(fā)型超敏反應，習慣上又稱過敏反應。一、I型超敏反應發(fā)生機制（一）參與I型超敏反應的主要成分1 .變應原某些藥物或化學物質，如青霉素吸入性變應原，如花粉

2、顆粒食物變應原，如奶2 .抗體引起I型超敏反應的特異性IgE型抗體稱為變應素。IgE的產生依賴于Th2細胞受變應原刺激活化后分泌的細胞因子IL-4,IL-4刺激特異性B細胞增殖分化成漿細胞產生特異性IgE。Th1細胞分泌的細胞因子IFN-丫可抑制Th2細胞分泌IL-4。因此，提高Th1細胞活性，減少IL-4的分泌，可降低IgE的產生，阻斷IgE介導的I型超敏反應。3 .細胞參與I型超敏反應的有肥大細胞和嗜堿性粒細胞及嗜酸性粒細胞。（二）I型超敏反應發(fā)生過程1 .致敏階段當變應原首次進入機體后，可選擇性誘導B細胞產生IgE抗體，使機體處于對該變應原的致敏狀態(tài)。2 .激發(fā)階段處于致敏狀態(tài)的機體當再

3、次接觸相同變應原時，變應原即與致敏靶細胞膜表面的兩個或兩個以上相鄰的IgE抗體特異性結合，使細胞內各種酶活化，鈣離子內流，導致細胞脫顆粒，釋放生物活性介質。（1）靶細胞顆粒內預先合成的儲備介質主要有組胺和激肽原酶。（2）細胞內新合成的介質主要有白三烯、前列腺素和血小板活化因子。3 .效應階段根據效應作用發(fā)生的快慢和持續(xù)時間的長短，可將I型超敏反應分為早期相（速發(fā)相）反應和晚期相（遲發(fā)相）反應兩種類型。早期相反應通常在接觸相同變應原后數秒或數分鐘內發(fā)生，可持續(xù)數小時。該種反應主要由組胺、前列腺素等引起。晚期相反應主要發(fā)生在變應原刺激后612小時，可持續(xù)數天或更長時間。二、常見I型超敏反應性疾?。?/p>

4、一）全身超敏反應1. 藥物過敏性休克2. 血清過敏性休克（二）局部性超敏反應1. 呼吸道過敏反應2. 消化道過敏反應3. 皮膚過敏反應三、I型超敏反應免疫學檢測（一）皮膚試驗1.1 型超敏反應皮膚試驗原理當變應原通過皮膚挑刺、劃痕、皮內注射等方法進入致敏者皮膚，與吸附在肥大細胞和（或）嗜堿性粒細胞上的特異性IgE高變區(qū)結合，導致肥大細胞或嗜堿性粒細胞脫顆粒，釋放生物活性介質。在2030分鐘內局部皮膚出現(xiàn)紅暈、紅斑、風團及瘙癢，數小時后消失。若出現(xiàn)此現(xiàn)象者判斷為皮試陽性，即對該變應原過敏；未出現(xiàn)紅暈、紅斑、風團及瘙癢者為陰性，即對該變應原不過敏。2. 皮內試驗方法（1）I型超敏反應皮內試驗皮膚消

5、毒后，用注射器將變應原提取液注入皮內。一般多選擇受試者前臂內側為注射部位，操作時應注意勿使注入部位出血或將液體注入皮下。并于注射后1525分鐘觀察結果。I型超敏反應皮內試驗的陽性結果以風團為主。（2）挑刺試驗（pricktest）：也稱點刺試驗主要用于檢測I型超敏反應。試驗時將抗原和對照液滴于受試者前臂內側皮膚上，然后在該處用針尖透過抗原液滴，與皮膚呈45。進針點刺，以不出血為度，1分鐘后拭去抗原液，15分鐘后觀察結果。I型超敏反應挑刺試驗的陽性結果以紅暈為主。3. 臨床意義（ 1）尋找變應原（ 2）預防藥物或疫苗過敏（二）血清總IgE檢測1. 測定方法（1）化學發(fā)光免疫測定法（2）酶聯(lián)免疫吸

6、附法2. 臨床意義IgE升高常見于過敏性哮喘、過敏性鼻炎、特發(fā)性皮炎、濕疹、藥物性間質性肺炎、支氣管肺曲霉病、寄生蟲感染、急慢性肝炎和IgE型多發(fā)性骨髓瘤等。（三）特異性IgE檢測1. 測定方法（ 1）放射變應原吸附試驗（RAST）（ 2）免疫印跡測定法2. 臨床意義特異性IgE的增高對I型超敏反應疾病的診斷有重要價值。用RAST僉測特異性IgE特異性強、敏感性高、影響因素少，其結果與變應原皮試和支氣管激發(fā)試驗之間符合率高達80%左右，但不能完全代替后兩種試驗，因后兩種試驗更能反映機體的整體情況。第二節(jié)n型超敏反應n型超敏反應又稱細胞毒型（cytotoxictype）或細胞溶解型（cytoly

7、tictype）超敏反應，它是由靶細胞表面的抗原與相應IgG或IgM類抗體結合后，在補體、巨噬細胞和NK細胞參與下，引起的以細胞溶解或組織損傷為主的病理性免疫反應。一、n型超敏反應發(fā)生機制（一）靶細胞及其表面抗原1 .同種異型抗原2 .共同抗原3 .變性自身抗原4 .外來抗原（二）抗體參與n型超敏反應的抗體主要是IgG和IgM,少數為IgA。（三）發(fā)生過程1 .補體介導的細胞溶解作用2 .巨噬細胞的吞噬作用3 .ADCC作用4 .刺激或抑制靶細胞二、常見n型超敏反應性疾病1 .輸血反應2 .新生兒溶血癥3 .自身免疫性溶血性貧血4 .藥物過敏性血細胞減少癥5 .肺出血腎炎綜合征6 .甲狀腺功能

8、亢進三、n型超敏反應免疫學檢測）抗血細胞抗體的檢測1 .Rh抗體的檢測2 .抗球蛋白檢測11）直接Coombs試驗（2）間接Coombs試驗（二）臨床意義伴有溶血性貧血的患者，Coombs試驗檢測為陽性，說明體內產生有抗紅細胞抗體，可幫助自身免疫性溶血性貧血的診斷。在Rh血型不合所致的新生兒溶血癥中，母親為Rh陰性血型，但體內產生了抗Rh抗體。為及早發(fā)現(xiàn)胎兒有胎內溶血，應盡早對孕婦Rh抗體進行監(jiān)測。第三節(jié)m型超敏反應出型超敏反應是指由可溶性免疫復合物沉積于局部或全身多處毛細血管基底膜，通過激活補體，并在血小板、嗜堿性粒細胞、中性粒細胞等的參與下，引起的以充血水腫、局部壞死和中性粒細胞浸潤為主要

9、特征的炎癥反應和組織損傷。一、出型超敏反應發(fā)生機制（一）中等大小可溶性免疫復合物的形成血液循環(huán)中的可溶性抗原與相應的IgG或IgM類抗體結合，形成可溶性抗原一抗體復合物（即免疫復合物）。（二）中等大小可溶性免疫復合物的沉積中等大小可溶性免疫復合物的沉積與下列因素有關：1. 局部解剖學與血流動力學因素2. 血管活性胺類物質作用（三）免疫復合物沉積引起的組織損傷1. 補體的作用C3a、C5a免疫復合物通過經典途徑激活補體，產生裂解片段C3a、C5a等過敏毒素。C3a和C5a與肥大細胞或嗜堿性粒細胞上的C3a和C5a受體結合，使其釋放組胺等炎性介質，導致局部毛細血管通透性增加、滲出增多，出現(xiàn)水腫。C

10、3a和C5a是中性粒細胞趨化因子，可吸引中性粒細胞聚集于免疫復合物沉積部位，引起組織損傷。2. 中性粒細胞的作用聚集的中性粒細胞在吞噬免疫復合物的同時，還釋放蛋白水解酶、膠原酶、彈性纖維酶和堿性蛋白酶等，使血管基底膜及周圍組織發(fā)生損傷。3. 血小板的作用免疫復合物和Cab可使血小板活化，釋放血管活性胺類物質，引起血管擴張、通透性增加導致水腫；也可以使血小板聚集、激活凝血機制，形成微血栓，引起局部組織缺血、出血及壞死。二、常見出型超敏反應性疾病（一）局部免疫復合物病1 .Arthus反應2 .類Arthus反應（二）全身免疫復合物病1. 血清病通常是在初次大量注射異種動物抗毒素（免疫血清）后12

11、周發(fā)生，其主要臨床癥狀是發(fā)熱、皮疹、淋巴結腫大、關節(jié)腫痛和一過性蛋白尿等。這是由于患者體內產生的抗毒素抗體和體內抗毒素結合形成可溶性免疫復合物所致。2. 鏈球菌感染后腎小球腎炎一般多發(fā)生于A族溶血性鏈球菌感染后23周內，體內產生抗鏈球菌抗體，該抗體與鏈球菌可溶性抗原結合形成循環(huán)免疫復合物，沉積在腎小球基底膜上，引起免疫復合物腎炎。其他微生物如葡萄球菌、肺炎鏈球菌、乙型肝炎病毒、瘧原蟲等感染也可引起類似的腎小球腎炎。3. 類風濕關節(jié)炎病因尚未完全查明，可能與病毒或支原體的持續(xù)感染有關。目前認為，上述病原體或其代謝產物能使體內IgG分子發(fā)生變性，從而刺激機體產生抗IgG的自身抗體，此類自身抗體以I

12、gM為主，也可以是IgG或IgA類抗體，臨床上稱為類風濕因子（RF）。自身變性IgG與類風濕因子結合形成免疫復合物，沉積予關節(jié)滑膜，引起類風濕關節(jié)炎。4. 系統(tǒng)性紅斑狼瘡系統(tǒng)性紅斑狼瘡是由于體內持續(xù)出現(xiàn)DNA抗DNAM合物，沉積于腎小球、關節(jié)或其他部位血管基底膜，引起腎小球腎炎、關節(jié)炎等多臟器損害。三、出型超敏反應免疫學檢測（一）免疫復合物的檢測檢測組織中固定的免疫復合物常用免疫組織化學技術。循環(huán)免疫復合物的檢測方法分為抗原特異性方法和非抗原特異性方法。臨床上多采用抗原非特異性方法。（二）抗原非特異性循環(huán)免疫復合物的檢測檢測的方法可分為物理法、補體法、抗球蛋白法和細胞法。（三）臨床意義有些疾病

13、血清中可檢測到一定數量的免疫復合物，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕關節(jié)炎、急性腎小球腎炎、慢性活動性肝炎、硬皮病、某些惡性腫瘤、白血病、肝癌等。第四節(jié)IV型超敏反應IV型超敏反應又稱遲發(fā)型超敏反應（DTH,是效應T細胞與特異性抗原結合后，引起的以單個核細胞浸潤和組織損傷為主要特征的炎癥反應。其特點是：炎癥反應發(fā)生較慢，通常在接觸相同抗原后2472小時出現(xiàn)炎癥反應，炎癥消失也慢；此型超敏反應與抗體和補體無關；而與效應T細胞和炎癥細胞因子參與致病有關。一、IV型超敏反應發(fā)生機制參與IV型超敏反應的效應T細胞主要有CD4Th1（TDTH細胞和CD8Tc（CTD細胞。（一）抗原與效應細胞引起IV型超敏反應的

14、抗原主要有胞內寄生菌、病毒、寄生蟲和化學物質。（二）T細胞介導炎癥反應和組織損傷1 .CD4+Th1細胞介導的炎癥反應和組織損傷效應性CD4Th1細胞識別抗原后活化，可釋放IFN-丫、TNF、淋巴毒素（LT）、IL-3、GM-CSF單核細胞趨化蛋白-1（MCP-。等多種細胞因子。IL-3和GM-CS用T刺激骨髓產生單核細胞，使巨噬細胞的數量增加。MCP-1可趨化單個核細胞到達抗原部位。TNF和LT可使局部血管內皮細胞黏附分子的表達增加，促進巨噬細胞和淋巴細胞聚集至抗原存在部位，可直接對靶細胞及其周圍組織細胞產生細胞毒作用，引起組織損傷。IFN-丫和TNF可使巨噬細胞活化，釋放前炎癥細胞因子IL

15、-1、IL-6、IL-8和TNF等加重炎癥反應。CD4Th1細胞也可借助FasL殺傷表達Fas的靶細胞。2 .CD8+Tc細胞介導的細胞毒作用效應CD8Tc細胞與特異性抗原結合，通過活化、脫顆粒并釋放穿孔素和顆粒酶等介質，使靶細胞溶解死亡或凋亡。也可活化后表達FasL,與靶細胞表面表達的Fas結合，誘導靶細胞發(fā)生凋亡。二、常見IV型超敏反應性疾?。ㄒ唬└腥拘赃t發(fā)型超敏反應多發(fā)生于胞內寄生病原體感染，如結核分枝桿菌、病毒、原蟲。（二）接觸性皮炎接觸性皮炎為典型的接觸性遲發(fā)型超敏反應。通常是由于接觸小分子半抗原物質，如油漆、染料、農藥、化妝品和某些藥物如磺胺和青霉素等引起。這些小分子半抗原與體內蛋

16、白質結合成完全抗原，使T細胞致敏。（三）移植排斥反應移植排斥反應是遲發(fā)型超敏反應的一個典型臨床表現(xiàn)，在同種異體間的移植排斥反應中，受者的免疫系統(tǒng)首先被供者的組織抗原（HLA）致敏，受者體內的致敏T細胞識別移植器官上的異體抗原，導致淋巴細胞和單核細胞局部浸潤等炎癥反應，形成移植排斥反應，可造成移植器官的壞死。三、IV型超敏反應免疫學檢測（一）IV型超敏反應皮膚試驗原理IV型超敏反應皮膚試驗是用皮內注射、皮膚斑貼等方法使變應原進入已致敏機體，體內致敏的T細胞再次接觸到變應原后，釋放多種細胞因子，造成局部以單核細胞和淋巴細胞浸潤為主的炎癥反應。2448小時后局部出現(xiàn)紅腫、硬結、水皰等現(xiàn)象，以此來判斷變應原是否引起機體IV型超敏反應或機體的細胞免疫功能狀態(tài)。（二）方法1. 結核菌素皮試抗原用舊結核菌素或結核分枝桿菌的純蛋白衍生物，在一定濃度下，于前臂內側皮內注射，4872小時后觀察結果。W型超敏反應皮內試驗的陽性結果以紅腫和硬結為主。2. 斑貼試驗主要用于檢測IV型超敏反應，尋找接觸性皮炎的變應原。取一定大小紗布