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1、古鉤藤鎮(zhèn)痛抗炎藥理作用的實驗研究                  作者:張興? 周芳 廖月葵 李麗 熊靖云 藍國亮 陳武棠 韋江惠 覃莉萍 梁飛【摘要】  目的研究古鉤藤水煎液的鎮(zhèn)痛抗炎藥理作用。方法采用小鼠熱板法和扭體法鎮(zhèn)痛實驗,觀察古鉤藤水煎液的鎮(zhèn)痛作用,觀察對小鼠毛細血管通透性和二甲苯對小鼠耳廓腫脹的影響,觀察其抗炎作用。結果古鉤藤水煎液能顯著提高小鼠痛閾值,降低毛細血管通透性,抑制由二甲苯所致的炎癥反應,可

2、顯著減輕小鼠耳廓腫脹。結論古鉤藤水煎劑有明顯的鎮(zhèn)痛和抗炎作用。 【關鍵詞】  古鉤藤; 鎮(zhèn)痛抗炎; 藥理作用Abstract:ObjectiveTo study the anti?inflammatory and analgesia actions of the Chinese medicine Gu Gou Teng solution. Methods The effect of Gu Gou Teng solution on analgesia was observed with the response of writhes and hot-plate tests. The e

3、ffect of anti-inflammation was observed by mice inflammation models caused by dimethy benzene and mice models with reinforce permeability of abdominal cavity capillary caused by acetic acid. ResultsGu Gou Teng solution had a prominent analgesia effect. It could restrain the capillary permeability re

4、sulted from imflammation by dimethybenzene.ConclusionGu Gou Teng  solution has significant effects of analgesia and anti-inflammatory on experimental mice.Key words:  Gu Gou Teng;   Anti?inflammation and analgesic test;  Pharmacology    古鉤藤又名海上霸王、白葉藤、牛角藤、大暗消等等

5、, 為蘿摩科植物古鉤藤Cryptolepis buchananiiRoem. et Schult 的地上部分。論文論文參考網多生于陽坡,攀援于其他樹上,分布于廣東、廣西、云南、貴州等地。具有舒筋活絡,消腫止痛,解毒等功效,用于治療腰痛、腹痛、跌打損傷、骨折、癰瘡、癬等疾病1。目前,鎮(zhèn)痛抗炎作用的藥物多為西藥,且副作用多,而中草藥古鉤藤民間使用也有這方面的作用,應該是值得研究、開發(fā)的鎮(zhèn)痛抗炎藥,國內外尚無對其這方面藥理作用研究的詳細報道。本科技研究小組對古鉤藤的鎮(zhèn)痛抗炎作用進行了實驗研究, 旨在對其進一步開發(fā)和臨床應用提供一定的理論依據。1  材料1.1  動物 小鼠,雌雄兼

6、用,體重(20±2) g,均由廣西中醫(yī)學院實驗動物中心提供,動物證號1104,根據實驗性質和性別分籠喂養(yǎng),自由采食飲水。1.2  儀器臺式離心機;XZB?2B型自控溫度熱板儀,山東省醫(yī)學科學院設備供應維修站制造,設備號為:3?109?1?7?6;722型光柵分光光度計,上海第三分析儀器廠,設備號為:3?109?4?4?931.3   藥品與試劑  干燥古鉤藤,采自廣西百色地區(qū)田林縣郊外;硫酸羅通定注射液,廣東省博羅先鋒藥業(yè)集團有限公司生產,批號020902;醋酸地塞米松,浙江仙琚制藥股份有限公司生產,批號040405。  &

7、#160; 試劑:醋酸, 長春市化學試劑廠。伊文思藍, 上?;瘜W試劑公司進口分裝, 批號F?9800。二甲苯,齊魯石化公司研究院試劑公司。生理鹽水, 濟南永寧制藥廠。1.4   制備古鉤藤水煎劑  古鉤藤根和莖各200 g,加8倍水浸泡1 h,煎煮40 min, 煎煮2次,合并藥液過濾濃縮至200 ml(1.00g/m l),按所需要的劑量配成根溶液和莖溶液大劑量均為30 g/kg,小劑量均為15 g/kg,以備用。2  方法和結果2.1  小鼠熱板法鎮(zhèn)痛實驗2取雌性小鼠,放入(55±0.5)熱板測痛儀中,以舔后足作為疼痛反應指標,預

8、測小鼠藥前痛閾值。以痛閾值小于30 s視為合格小鼠,將痛閾值合格的60只小鼠隨機分為6組,每組10只。分別是古鉤藤根大劑量組,劑量為30 g/kg;古鉤藤根小劑量組,劑量為15 g/kg;古鉤藤莖大劑量組,劑量為30 g/kg;古鉤藤莖小劑量組,劑量為15 g/kg;陽性對照藥羅通定組,劑量0.03 g/kg;生理鹽水對照組,劑量為30 ml/kg。灌胃給藥兩次,時間間隔為4 h。末次給藥后30,60,90,120 min分別測定痛閾值。在測定中,如60 s內無痛反應,應立即取出,并以60 s計算。各給藥組與對照組比較,統(tǒng)計數據以 ±s表示,統(tǒng)計方法用Dunnet t檢驗法。結果見表

9、1。    痛閾值提高百分率(%)=(藥后痛閾值-藥前痛閾值)藥前痛閾值×100%    表1結果表明,古鉤藤根大劑量組在藥后90,120 min能顯著提高小鼠痛閾值,而古鉤藤根小劑量組和莖小劑量組在藥后30,60,90,120 min對小鼠痛閾值提高不明顯,古鉤藤莖大劑量組在藥后120 min有提高小鼠痛閾值的趨勢。從本實驗結果中可以提示本藥的鎮(zhèn)痛作用不穩(wěn)定。論文論文參考網 2.2  小鼠扭體法鎮(zhèn)痛實驗2 取體重1822 g健康小鼠60只,雌雄各半,隨機分為6組,分組及給藥方法同2.1項。末次給藥后30 min腹

10、腔注射0. 7%冰醋酸0. 2 ml/只,同時用秒表計時,記錄小鼠出現第1次扭體反應的時間(即潛伏期)及15 min內出現的扭體次數。各給藥組與對照組比較,統(tǒng)計數據以±s表示,統(tǒng)計方法用Dunnet t檢驗法。結果見表2。    表2結果表明, 除古鉤藤莖大劑量組對冰醋酸致痛小鼠疼痛潛伏期無明顯延長外,古鉤藤根、莖其他各劑量組均能延長冰醋酸致痛小鼠疼痛潛伏期,并能顯著減少小鼠的扭體次數,具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。從各劑量組的鎮(zhèn)痛百分率來看,也都有較為明顯的鎮(zhèn)痛作用。2.3  小鼠二甲苯耳廓腫脹實驗2  取健康1822 g雄性小鼠60只,陽性

11、對照組藥物改地塞米松,劑量為6.75 mg/kg,其他分組與給藥均同2.1項。第8天每只小鼠右耳廓前后均勻涂擦當日配制的二甲苯0. 1 ml /只,致炎15 min后將小鼠脫頸椎處死,剪下小鼠左右耳,用打孔器(直徑6 mm)分別在左、右耳同一部位打下等大的圓形耳片,分別在電子天平上稱重后,計算耳廓腫脹度。各給藥組與對照組比較,統(tǒng)計數據以±s表示,統(tǒng)計方法用Dunnet t檢驗法。耳廓腫脹度= 右耳重量-左耳重量。腫脹抑制率(%)=(對照組腫脹度-給藥組腫脹度)/對照組腫脹度×100%。結果見表3。 表1  古鉤藤對熱板法致痛小鼠的鎮(zhèn)痛作用(略)與生理鹽水

12、組比較, *P< 0. 05,P < 0. 01;n=8表2  古鉤藤對冰醋酸致痛小鼠的鎮(zhèn)痛作用(略)與生理鹽水組比較, *P< 0. 05,P < 0. 01;n=8表3  古鉤藤對小鼠耳廓腫脹的影響(略)與生理鹽水組比較, *P< 0. 05,P < 0. 01;n=8    表3結果表明, 古鉤藤根、莖各劑量組均能明顯抑制由二甲苯引起的小鼠耳廓腫脹。從抑制率看,各劑量組也都具備一定抑制耳廓腫脹的趨勢,其中以古鉤藤根大劑量組的抑制率為最佳。2.4  對小鼠毛細血管通透性影響的實驗2 取體重182

13、2 g健康小鼠60只,雌雄各半,分組及給藥方法同2.3項。第8天,每只小鼠尾靜脈注射2.5%伊文思藍0. 1 ml /10 g(體重),并同時腹腔注射0. 7%冰醋酸0. 2 ml /只, 15 min后用6 ml蒸餾水腹腔注射,輕柔小鼠腹部,然后斷頭處死小鼠,剪開腹腔,用吸管吸取腹腔洗出液約56 ml,3 000 r /min離心5 min,取上清液3 ml在722分光光度計590 nm處測定吸收度(OD值) 。各給藥組與對照組比較,統(tǒng)計數據以 ±s表示,統(tǒng)計方法用Dunnet t檢驗法。結果見表4。表4  古鉤藤對小鼠毛細血管通透性的影響(略)與生理鹽水組比較, *P&

14、lt;0. 05,P< 0. 01;n=8    表4結果表明,古鉤藤根大、小劑量組均能降低小鼠毛細血管通透性,減少腹腔液體的滲出,具有明顯的抗炎作用。古鉤藤莖大劑量組效果不明顯,而莖小劑量組也同樣具體有明顯的作用。3  討論    上述實驗結果顯示,古鉤藤的根、莖水煎液都具備一定的鎮(zhèn)痛抗炎作用,或有這種作用的趨勢,但從中也看到其鎮(zhèn)痛抗炎作用不穩(wěn)定,另外其鎮(zhèn)痛抗炎作用機制有待進一步研究?,F在用的是水煎液,其他提取物如醇提液是否有效或更有效也還值得進一步研究。    古鉤藤是瑤族人民民間長期使用的藥材, 有舒筋活絡,消腫止痛等功效,主要用于治療腰腿痛、風濕痛、痛經、軟組織扭傷

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