測(cè)量甲硝唑根管消毒控釋系統(tǒng)藥物釋放度方法的評(píng)價(jià)

1、    測(cè)量甲硝唑根管消毒控釋系統(tǒng)藥物 釋放度方法的評(píng)價(jià)        摘要目的:對(duì)測(cè)量甲硝唑根管消毒控釋系統(tǒng)藥物釋放度的方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。方法:作體外釋放實(shí)驗(yàn)、離體牙根周釋藥實(shí)驗(yàn)及自行設(shè)計(jì)的體內(nèi)釋藥實(shí)驗(yàn),求1、3、7、10天的甲硝唑釋放度,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:體外與離體牙、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的累積釋藥百分率在不同的時(shí)間均有極明顯顯著性差異(P<0.01);離體牙與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的累積釋藥百分率間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。結(jié)論:利用離體牙,將釋放介質(zhì)生理鹽水控制在37

2、,pH7.4,測(cè)定甲硝唑釋放度的方法更接近于體內(nèi)情況,是一種測(cè)定根管消毒控釋系統(tǒng)藥物釋放度的有效方法。關(guān)鍵詞根管藥物控釋系統(tǒng)釋放度Evaluation of Methods of Drug Release Rate in Root Canal DisinfectionControlled-release Delivery System Containing MetronidazoleWang Zhuping, Wang Duo, Gao Jing, et alDepartment of Stomatology, Shangdong Medical UniversityAbstractObjec

3、tive: To measure the release rate of drug in controlled-release delivery system containing metronidazole. Methods: Drug release tests in vitro, in vivo and through the roots of extracted teeth were performed. The release rate of metronidazole was calculated after 1 day, 3 days, 7 days and 10 days, a

4、nd the results were statistically analyzed. Results: Significante difference was observed among the total drug release rate in vitro, in vivo and through the roots of extracted teeth (P<0.01). There was no statistically significant difference between the release test in vivo and through the roots

5、 of extracted teeth in vitro (P>0.05). Conclusion: The method of using extracted teeth and the controlled release medium at 37, pH7.4 was close to the situation in vivo, and it was an effective method to measure the drug release rate of the root canal disinfection controlled-release delivery syst

6、em.Key words:rootdrug controlled-release delivery systemrelease rate根管消毒控釋系統(tǒng)是將制劑置于根管,藥物直接作用于靶器官(根管及根周組織)的一種制劑方式。藥物的溶出及擴(kuò)散依賴于牙本質(zhì)小管及根尖孔與組織液及滲出液的溝通,其作用環(huán)境具有一定的特殊性。通常采用的體外釋放度測(cè)定方法能否較好地反映根管消毒控釋系統(tǒng)的體內(nèi)釋藥情況,及采用何種測(cè)定方法將更接近于體內(nèi)情況是一個(gè)值得探討的問(wèn)題。作者利用滲透泵原理,采用膜控新技術(shù),以牙膠尖為載體,研制了一種根管消毒控釋系統(tǒng),命名為甲硝唑控釋牙膠尖(controlled-release dili-

7、very gutta-percha point containing metronidazole,CRDGM)。本文利用CRDGM對(duì)測(cè)定甲硝唑釋放度的方法進(jìn)行了探討。1材料和方法1.1材料和設(shè)備紫外分光光度計(jì)(U-2000型,日立公司生產(chǎn)),超級(jí)恒溫水浴箱(501型,上海實(shí)驗(yàn)儀器廠生產(chǎn)),甲硝唑(分析純,上海第十八制藥廠生產(chǎn)),CRDGM:由山東醫(yī)科大學(xué)口腔系研制,每支含甲硝唑2013 g,離體牙8顆:為發(fā)育成熟的健康單根管牙,拔除后立即于冠根交界處冠方2 mm處截開(kāi),保留根部,并作常規(guī)根管預(yù)備,貯存于4生理鹽水中,時(shí)間不超過(guò)1周。1.2甲硝唑釋放度實(shí)驗(yàn)1.2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制以0.1 mol/

8、L HCl為溶媒并以其作對(duì)照,制備甲硝唑標(biāo)準(zhǔn)溶液后,在277 nm處測(cè)吸光度。以濃度C對(duì)吸光度A作線性回歸分析,得回歸方程為C=25.4859 A-0.3314, r=0.9999。1.2.2體外釋放實(shí)驗(yàn)取100 ml生理鹽水放入容量瓶中置恒溫水浴箱預(yù)熱至37,作為釋放介質(zhì)。內(nèi)放6支CRDGM,分別于1、3、7、10天取樣1.0 ml,并補(bǔ)加等量釋放介質(zhì),樣品以0.1 mol/L HCl稀釋后,在277 nm處測(cè)量吸光度,求其平均值,根據(jù)回歸方程求得甲硝唑濃度,換算出百分率及相應(yīng)累積釋藥百分率。1.2.3離體牙根周釋放實(shí)驗(yàn)離體牙根周釋放實(shí)驗(yàn)之前先進(jìn)行干擾測(cè)定。干擾測(cè)定取離體牙1顆拭干根管后內(nèi)置

9、不含藥物的空白控釋劑1支,丁氧膏密封根管口,置入盛有3 ml釋放介質(zhì)的離心管中,12小時(shí)后取出空白控釋劑放入研缽中研破,同釋放介質(zhì)一起移入容量瓶?jī)?nèi),以0.1 mol/L HCl稀釋,并以它為對(duì)照取樣在200400 nm掃描,與甲硝唑標(biāo)準(zhǔn)溶液的掃描曲線對(duì)比,結(jié)果該方法對(duì)甲硝唑吸光度的測(cè)定無(wú)干擾。離體牙根周釋放實(shí)驗(yàn)取離體牙6顆,根管內(nèi)各置1支CRDGM,丁氧膏密封根管口,放入3 ml釋放介質(zhì)中,于1、3、7、10天定時(shí)取樣,另取1顆牙內(nèi)置1支空白控釋劑為對(duì)照,如上法求得平均甲硝唑濃度,計(jì)算累積釋藥百分率。1.2.4體內(nèi)釋放實(shí)驗(yàn)選擇臨床上慢性根尖周炎單根管患牙24顆,開(kāi)髓、拔髓,沖洗并拭干后置CRD

10、GM于根管內(nèi),以丁氧膏暫封。將牙齒隨機(jī)分為1、3、7、10天復(fù)診組,各6顆牙,復(fù)診時(shí)取出CRDGM,如上述實(shí)驗(yàn)方法求得甲硝唑含量,取6顆牙齒的平均值,記作,則體內(nèi)甲硝唑釋放量為x-,計(jì)算累積釋藥百分率。2結(jié)果體外實(shí)驗(yàn)與離體牙、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的累積釋藥百分率在1、3、7、10天時(shí)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01);而離體牙與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的累積釋藥百分率間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。CRDGM在離體牙和體內(nèi)的釋放量及釋放速率均明顯低于在體外的釋放(表1)。表110天內(nèi)體外、離體牙和體內(nèi)累積釋藥百分率(%)釋放度實(shí)驗(yàn)1天3天7天10天體外釋放實(shí)驗(yàn)68.2489.3298.1899.40離體牙釋放實(shí)

11、驗(yàn)9.4930.0263.0480.10體內(nèi)釋放實(shí)驗(yàn)11.7333.0265.9684.273討論 藥物釋放度是評(píng)價(jià)控釋制劑性能的重要指標(biāo)之一。體外實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)單易行、可重復(fù)性好,但能否較真實(shí)地反映體內(nèi)釋藥情況是一值得探討的問(wèn)題。對(duì)根管消毒控釋系統(tǒng)一般均采用將控釋裝置放于37、pH7.4生理鹽水的釋放介質(zhì)中來(lái)測(cè)定藥物釋放度的體外實(shí)驗(yàn)方法。但牙體是一特殊環(huán)境,牙齒的根管由牙本質(zhì)包繞,根管消毒控釋系統(tǒng)置入根管后,其藥物的溶出和擴(kuò)散有賴于牙本質(zhì)小管和根尖孔與組織液及滲出液的溝通,因此這種體外實(shí)驗(yàn)方法所設(shè)計(jì)的測(cè)試環(huán)境與體內(nèi)應(yīng)用情況有較大差異。作為根管消毒劑要求具有強(qiáng)的滲透性,藥物能滲透到牙本質(zhì)小管深層、

12、側(cè)支根管及根尖周?chē)M織。藥物在根管內(nèi)的擴(kuò)散與藥物分子的大小及重量亦有一定關(guān)系,因此這種體外實(shí)驗(yàn)方法也不能真實(shí)地反映藥物在根管內(nèi)的滲透情況。國(guó)內(nèi)凌均?等1為探索新型藥物控釋根充尖用于牙髓尖周病治療的可行性,作了離體牙根周釋放實(shí)驗(yàn)。作者認(rèn)為可用這種方法來(lái)評(píng)價(jià)根管消毒控釋系統(tǒng)藥物的釋放度,因?yàn)樗M了牙體環(huán)境,也符合根管消毒劑要有強(qiáng)的滲透性的要求。有研究表明根部牙本質(zhì)結(jié)構(gòu)與冠部牙本質(zhì)相似,對(duì)于根管內(nèi)的藥物具有擴(kuò)散作用2,3。進(jìn)一步的研究還表明,藥物擴(kuò)散的途徑是通過(guò)牙本質(zhì)小管和根尖孔,而最大的擴(kuò)散途徑是通過(guò)根部牙本質(zhì)小管4。由于不同性別的牙齒根部牙本質(zhì)小管的數(shù)目不隨著年齡的增長(zhǎng)而發(fā)生變化,因此對(duì)于牙根

13、發(fā)育成熟的牙齒,年齡和性別不影響根管內(nèi)藥物通過(guò)牙本質(zhì)小管和根尖孔的滲透性5。牙本質(zhì)小管作為擴(kuò)散通道還具有時(shí)間的相對(duì)穩(wěn)定性,牙齒在拔除后34周對(duì)根部牙本質(zhì)的滲透性沒(méi)有影響6。因此作者在作離體牙根周釋放實(shí)驗(yàn)時(shí)選擇牙根發(fā)育完成的健康單根管牙,拔除后立即截去牙冠,保留根部作根管預(yù)備,貯存于4、pH7.4生理鹽水中,貯存時(shí)間加實(shí)驗(yàn)時(shí)間不超過(guò)4周,將CRDGM置入離體牙根管內(nèi),密封根管口放入釋放介質(zhì)中來(lái)測(cè)定CRDGM中甲硝唑的釋放度。為評(píng)價(jià)上述兩種藥物釋放度的測(cè)量方法,作者設(shè)計(jì)了體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。因在體內(nèi)不能直接測(cè)定其藥物釋放量,故采用了逆推法,即測(cè)定取出的CRDGM尚剩余的藥量來(lái)間接獲得其釋放量的方法。結(jié)果表明

14、CRDGM在離體牙根周的釋放與體內(nèi)相近,具有簡(jiǎn)單易行、可重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn),是一種測(cè)定根管消毒控釋系統(tǒng)藥物釋放度的有效方法。作者單位:山東醫(yī)科大學(xué)口腔系250012參考文獻(xiàn)1凌均?,樊明文,魏國(guó)賢,等.新型藥物控釋根充尖用于牙髓尖周病治療的可行性研究.牙體牙髓牙周病學(xué)雜志,1995, 5(4):1951972Weslcy DJ, Marshall FJ, Rosen S. The quantitation of formocresol as a root canal medicament. Oral Surg, 1970, 29:6036123Harrison JW, Madonia JV.The

15、 toxicity of parachlorophe-nol. Oral Surg, 1971,32:90994Abbott PV, Hume WR, Heithersay GS. Effects of combining Ledermix and calcium hydroxide pastes on the diffusion of corticosteroid and tetracycline through human tooth roots in vitro. Endod Dent Traumatol, 1989, 5:1881925Abbott PV, Heithersay GS, Hume WR. Release and diffusion through human tooth roots in vitro of corticosteroid and tetracycline trace molecules from Leder