芳香胺類藥物鑒別試驗(yàn)

1、藥品檢驗(yàn)技術(shù)課程單元教學(xué)設(shè)計(jì)情境：芳香胺類藥物的分析（07） 任務(wù)：芳香胺類藥物鑒別試驗(yàn)(02) 教學(xué)目標(biāo)設(shè)計(jì)序號(hào)5上課地點(diǎn)理實(shí)一體化教室授課形式講授、學(xué)生操作練習(xí)教 學(xué) 目 標(biāo)技能目標(biāo)知識(shí)目標(biāo)能夠依據(jù)藥典，對(duì)芳胺類典型藥物、對(duì)苯乙胺類藥物、對(duì)氨基醚衍生物類藥物進(jìn)行鑒別。芳香胺類藥物鑒別試驗(yàn)方法教 學(xué) 重 點(diǎn)讓同學(xué)們掌握芳香胺類藥物鑒別試驗(yàn)方法教 學(xué) 難 點(diǎn)同學(xué)們能夠依據(jù)藥典，對(duì)芳胺類典型藥物、對(duì)苯乙胺類藥物、對(duì)氨基醚衍生物類藥物進(jìn)行鑒別。能力訓(xùn)練任務(wù)及案例通過(guò)案例分析和知識(shí)點(diǎn)的講解讓同學(xué)們更好的掌握芳香胺類藥物的鑒別教學(xué)進(jìn)程設(shè)計(jì)（下面各格均可合并）步驟教學(xué)內(nèi)容教學(xué)方法教學(xué)手段學(xué)生活動(dòng)時(shí)間分配

2、基礎(chǔ)知識(shí)講解鑒別實(shí)驗(yàn)的原理教師舉例、點(diǎn)評(píng)、歸納概括引出知識(shí)點(diǎn)。任務(wù)引導(dǎo)做好課堂筆記，跟著老師的思路分析20分鐘案例分析例如：鹽酸普魯卡因的鑒別同學(xué)們分組實(shí)驗(yàn)操作，可以讓同學(xué)們更好的掌握知識(shí)基礎(chǔ)和操作技能25分鐘芳胺類藥物的鑒別試驗(yàn)1重氮化-偶合反應(yīng)分子結(jié)構(gòu)中具有芳伯氨基和潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生重氮化-偶合反應(yīng)。即在酸性條件下與亞硝酸鈉試液發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成的重氮鹽再與堿性-萘酚偶合生成有色的偶氮染料。（1）苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普卡因和鹽酸普魯卡因胺苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸氯普卡因和鹽酸普魯卡因胺，結(jié)構(gòu)中含有芳伯氨基，可直接用該反應(yīng)鑒別例1：鹽酸普魯卡因的鑒別取供試品約50

3、mg，加稀鹽酸1mL，必要時(shí)緩緩煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成橙黃到猩紅色沉淀。（2）對(duì)乙酰氨基酚和醋氨苯砜對(duì)乙酰氨基酚和醋氨苯砜，結(jié)構(gòu)中具有潛在的芳伯氨基，在鹽酸或硫酸中加熱水解后也能用該反應(yīng)鑒別。例2：對(duì)乙酰氨基酚的鑒別取本品約0.1g，加稀鹽酸5mL，置水浴中加熱40min，放冷；取0.5mL，滴加亞硝酸鈉試液5滴，搖勻，用水3mL稀釋后，加堿性-萘酚試液2mL，振搖，即顯紅色。2三氯化鐵反應(yīng)對(duì)乙酰氨基酚結(jié)構(gòu)中含有酚羥基，可與三氯化鐵試液反應(yīng)顯藍(lán)紫色。其反應(yīng)式如下：例3：對(duì)乙酰氨基酚的鑒別 本品的水溶液加三氯化鐵試液，即顯

4、藍(lán)紫色。3水解產(chǎn)物的反應(yīng)鹽酸普魯卡因和苯佐卡因結(jié)構(gòu)中具有酯鍵結(jié)構(gòu)，可利用其水解產(chǎn)物的特性進(jìn)行鑒別。（1）鹽酸普魯卡因 其具有對(duì)氨基苯甲酸酯的結(jié)構(gòu)，遇氧化鈉試液即析出普魯卡因白色沉淀，加熱變?yōu)橛蜖钗?，繼續(xù)加熱則水解，產(chǎn)生揮發(fā)性的二乙氨基乙醇，能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色，同時(shí)生成可溶于水的對(duì)氨基苯甲酸鈉，放冷，加鹽酸酸化，即析出對(duì)氨基苯甲酸白色沉淀。其鑒別試驗(yàn)方法為：取本品約0.1g，加水2mL溶解后，加10%氫氧化鈉溶液1mL，即生成白色沉淀；加熱，變?yōu)橛蜖钗?；繼續(xù)加熱，發(fā)生的蒸氣能使?jié)駶?rùn)的紅色石蕊試紙變?yōu)樗{(lán)色；熱至油狀物消失后，放冷，加鹽酸酸化，即析出白色沉淀。（2）苯佐卡因 其在氫氧化鈉

5、試液中加熱水解生成乙醇，乙醇可與碘發(fā)生碘仿反應(yīng)，生成黃色的碘仿沉淀，并具有特殊臭氣。其鑒別試驗(yàn)方法為：取本品約0.1g，加氫氧化鈉試液5mL，煮沸，即有乙醇生成；加碘試液，加熱，即生成黃色沉淀，并發(fā)生碘仿的臭氣。4與重金屬離子反應(yīng) （1）與銅和鈷離子反應(yīng) 分子中含有芳酰胺結(jié)構(gòu)的鹽酸利多卡因，在碳酸鈉試液中與硫酸銅反應(yīng)生成藍(lán)紫色配位化合物，該配合物轉(zhuǎn)溶入氯仿中顯黃色。其鑒別試驗(yàn)方法為：取本品0.2g，加水20mL溶解后，取溶液2mL，加硫酸銅試液0.2mL與碳酸鈉試液1mL，即顯藍(lán)紫色；加三氯甲烷2mL，振搖后放置，三氯甲烷層顯黃色。此外，鹽酸利多卡因，還可在酸性溶液中與氯化鈷試液反應(yīng)，生成亮綠

6、色細(xì)小鈷鹽沉淀。（2）羥肟酸鐵鹽反應(yīng) 鹽酸普魯卡因胺分子中具有芳酰胺結(jié)構(gòu)，加入濃過(guò)氧化氫溶液，緩緩加熱至沸后，先被氧化為羥肟酸，再與三氯化鐵作用形成配位化合物羥肟酸鐵，其溶液顯紫紅色，隨即變?yōu)榘底厣磷睾谏?。?）與汞離子反應(yīng) 鹽酸利多卡因的水溶液加硝酸酸化后，加硝酸汞試液煮沸，顯黃色；對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物顯紅色或橙黃色，可與之區(qū)別。5紫外-可見分光光度法本類藥物分子結(jié)構(gòu)中均具有苯環(huán)，因此具有紫外吸收特征。紫外-可見分光光度法，也是本類藥物常用的鑒別方法之一。例4：鹽酸布比卡因的鑒別取本品，精密稱定，按干燥品計(jì)算，加0.01mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1mL中約含0.40mg的溶液，

7、在263nm與271nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；其吸光度分別為0.530.58與0.430.48。例5：醋氨苯砜的鑒別取本品，加無(wú)水乙醇制成每1mL中約含5g的溶液，在256nm與284nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。6紅外分光光度法本類藥物的官能團(tuán)在紅外光區(qū)有特征吸收，均可采用紅外分光光度法進(jìn)行鑒別，其紅外吸收光譜與對(duì)照?qǐng)D譜一致。鹽酸普魯卡因的紅外圖譜見圖7-1，鹽酸丁卡因的紅外圖譜見圖7-2。圖7-1 鹽酸普魯卡因紅外圖譜圖7-2 鹽酸丁卡因的紅外圖譜苯乙胺類藥物的鑒別1與三氯化鐵反應(yīng)腎上腺素和鹽酸去氧腎上腺素等藥物的分子結(jié)構(gòu)中含有酚羥基，與Fe3+離子配位顯色，若加入堿性溶液，隨即被Fe3+氧化而顯

8、紫色或紫紅色等，見表7-2。表7-2 苯乙胺類藥物與三氯化鐵的反應(yīng)藥物方法與現(xiàn)象腎上腺素在鹽酸溶液（91000）中顯翠綠色，加氨試液顯紫色，最后變成紫紅色重酒石酸去甲腎上腺素翠綠色，加碳酸氫鈉試液顯藍(lán)色，最后變成紅色鹽酸去氧腎上腺素紫色鹽酸多巴胺墨綠色，加1%氨溶液，轉(zhuǎn)變成紫紅色鹽酸異丙腎上腺素/鹽酸異丙腎上腺素注射液深綠色，滴加新制的5%碳酸氫鈉，顯藍(lán)色，然后變成紅色硫酸沙丁胺醇/硫酸沙丁胺醇片/硫酸沙丁胺醇注射液/硫酸沙丁胺醇膠囊/硫酸沙丁胺醇緩釋片紫色，加碳酸氫鈉試液，顯橙黃色渾濁2氧化反應(yīng)本類藥物含有酚羥基，易被碘、過(guò)氧化氫、高錳酸鉀、鐵氰化鉀等氧化劑氧化而呈現(xiàn)不同的顏色。且隨著酸堿條

9、件的不同，氧化反應(yīng)及現(xiàn)象也有所不同。例9：鹽酸異丙腎上腺素的鑒別取本品10mg，加水10mL溶解后，取溶液2mL，加鹽酸滴定液（0.1mol/L）0.1mL，再加0.1 mol/L碘溶液1mL，放置5min，加0.1 mol/L硫代硫酸鈉溶液4mL，即顯淡紅色。例10：重酒石酸去甲腎上腺素的鑒別取本品約1mg，加酒石酸氫鉀的飽和溶液10mL溶解，加碘試液1mL，放置5min后，加硫代硫酸鈉試液2mL，溶液為無(wú)色或僅顯微紅色或淡紫色（與腎上腺素或異丙腎上腺素的區(qū)別）。3硫酸銅配位反應(yīng)某些含有氨基醇結(jié)構(gòu)的本類藥物，可在堿性溶液中與硫酸銅溶液反應(yīng)，生成有色的配位化合物，結(jié)構(gòu)式如下：例11：鹽酸去氧腎

10、上腺素的鑒別取本品10mg，加水1mL溶解后，加硫酸銅試液1滴與氫氧化鈉試液1mL，搖勻，即顯紫色；加乙醚1mL振搖，乙醚層不顯色。4與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)重酒石酸間羥胺分子中具有脂肪伯胺基，可用其專屬反應(yīng)亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)進(jìn)行鑒別。其鑒別方法為：取本品約5mg，加水0.5mL使溶解，加亞硝基鐵氰化鈉試液2滴、丙酮2滴與碳酸氫鈉0.2g，在60的水浴中加熱1min，即顯紅紫色。5紫外-可見分光光度法與紅外分光光度法中國(guó)藥典2010年版（二部）收載的采用紫外-可見分光光度法進(jìn)行鑒別的本類藥物見表7-3。除腎上腺素、重酒石酸腎上腺素外的苯乙胺類藥物均可采用紅外吸收光譜法進(jìn)行鑒別。表7-3 用紫外-可

11、見分光光度法鑒別的苯乙胺類藥物藥物溶劑濃度(g/mL)max(nm)A重酒石酸間羥胺H2O100272鹽酸異丙腎上腺素H2O502800.50鹽酸多巴胺0.5% H2SO4溶液30280鹽酸克倫特羅0.1 mol/L HCl溶液30243，296鹽酸苯乙雙胍H2O10234硫酸特布他林0.1 mol/L HCl溶液100276硫酸沙丁胺醇H2O80276氨基醚衍生物類藥物的鑒別試驗(yàn)1與酸的呈色反應(yīng)例20：鹽酸苯海拉明的鑒別取本品約5mg，加硫酸1滴，初顯黃色，隨即變成橙紅色；滴加水，即成白色乳濁液。例21：茶苯海明的鑒別取本品0.1g，加鹽酸1mL與氯酸鉀0.1g，置水浴上蒸干，加氨試液數(shù)滴，即顯紫紅色。2紫外-可見分光光度法例22：鹽酸苯海拉明的鑒別取本品，加0.01mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋制成每1mL中約含0.5mg的溶液，照紫外-可見分光光度法（附錄IV A）測(cè)定，在253nm與258nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。3紅外分光光度法鹽酸苯海拉明的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集365圖）一致。茶苯海明的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集271圖）一致。4氯化物的鑒別反應(yīng)例23：鹽酸苯