堿性磷酸酶的分離提取ppt課件_第1頁
堿性磷酸酶的分離提取ppt課件_第2頁
堿性磷酸酶的分離提取ppt課件_第3頁
堿性磷酸酶的分離提取ppt課件_第4頁
堿性磷酸酶的分離提取ppt課件_第5頁
已閱讀5頁，還剩10頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、勻漿液上清液沉淀粗酶液管 號01234567 pNP含量 (mol)00.050.10 0.15 0.20 0.25 0.30 0.35 0.5mol/mL pNP (mL)00.10.20.30.40.50.60.7 H2O (mL)0.80.70.60.50.40.30.20.1 Na2CO3-NaHCO3 (mL)各管參與1.0 mL 20 mmol/L MgCl2 (mL)各管參與0.2 mL 0.1 mol/L NaOH (mL)各管參與2.0 mL OD 405 nm以對硝基苯酚的絕對量(mol數)為橫坐標，OD405nm值為縱坐標，繪制規(guī)范曲線。求出pNP的克分子消光系數()值。

2、8.80103( mol/L)-1cm-1管 號空白1235 mM pNPP(mL)各0.2mL Na2CO3-NaHCO3 (mL)各管參與1.0 mL 20 mmol/L MgCl2 (mL)各管參與0.2 mL H2O (mL)各0.50mL 酶液mL/各0.1mL 0.1 mol/L NaOH (mL)各管參與2.0 mL 酶液mL0.1mL OD 405 nm2.2.2 酶活力的測定酶活力的測定以0號管調零點，測定各管的OD405nm值，從對照規(guī)范曲線求出產物的mol數，算出酶活力。AVC= (mg/mL)VtB=(U/mL) 21蛋白濃度酶活力計算：式中：A為稀釋倍數，B為由規(guī)范曲

3、線查得的pNP mol數，t為反響時間，C為由規(guī)范曲線查得的蛋白mg數，V1為測定酶活力所用的酶量(mL數) V2為測定酶活力所用的酶量(mL數)酶的比活力U/mg 純化倍數=各步比活力/第一步比活力得率%=各步總活力*100/第一步總活力 酶活力U/mL蛋白濃度mg/mL步驟總體積 mL蛋白mg/mL總蛋白mg酶活力U/mL總活力U比活力U/mg純化倍數得率%勻漿過濾液4007.24 20.3 正丁醇處置上清液470 33.8 0.35飽和(NH4)2SO4上清液440 35.3 0.7飽和(NH4)2SO4沉淀溶解透析上清液40.3 314.7 DEAE-32酶液9.63.82 1002.2 Sephadex G

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論