油鏡使用及細(xì)菌形態(tài)觀察

1、油鏡使用及細(xì)菌形態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?了解顯微鏡的基本構(gòu)造和使用方法了解顯微鏡的基本構(gòu)造和使用方法 掌握油鏡的原理和使用方法掌握油鏡的原理和使用方法 了解細(xì)菌的三種基本形態(tài)了解細(xì)菌的三種基本形態(tài)實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理顯微鏡的構(gòu)造顯微鏡的構(gòu)造機(jī)械裝置機(jī)械裝置光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng)鏡座鏡座載物臺載物臺鏡臂鏡臂標(biāo)本夾和標(biāo)本移動(dòng)尺標(biāo)本夾和標(biāo)本移動(dòng)尺粗調(diào)螺旋和細(xì)調(diào)螺旋粗調(diào)螺旋和細(xì)調(diào)螺旋聚光鏡升降螺旋聚光鏡升降螺旋接目鏡接目鏡接物鏡及鏡頭轉(zhuǎn)換器接物鏡及鏡頭轉(zhuǎn)換器聚光鏡聚光鏡虹彩光圈虹彩光圈反光鏡反光鏡1、增加照明亮度、增加照明亮度2、增加顯微鏡的分辨率、增加顯微鏡的分辨率實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理2NA 實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材1、

2、標(biāo)本片、標(biāo)本片球菌（球菌（Coccus）桿菌（桿菌（Bacterium）螺旋菌（螺旋菌（Spirillum）2、顯微鏡、顯微鏡3、香柏油和二甲苯、香柏油和二甲苯4、鏡頭紙、鏡頭紙操作步驟操作步驟 放置好顯微鏡放置好顯微鏡 調(diào)節(jié)好光源調(diào)節(jié)好光源 低倍鏡觀察低倍鏡觀察 高倍鏡觀察高倍鏡觀察 油鏡觀察油鏡觀察 清潔顯微鏡清潔顯微鏡 還原顯微鏡還原顯微鏡實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 革蘭氏染色革蘭氏染色實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?了解革蘭氏染色反應(yīng)的原理了解革蘭氏染色反應(yīng)的原理 掌握革蘭氏染色的方法掌握革蘭氏染色的方法 革蘭氏染色是革蘭氏染色是Gram發(fā)明的一種細(xì)菌發(fā)明的一種細(xì)菌鑒別染色法，通過染色，可將細(xì)菌分為兩鑒別染色法，

3、通過染色，可將細(xì)菌分為兩大類：一類被染成紫色，稱為革蘭氏陽性大類：一類被染成紫色，稱為革蘭氏陽性細(xì)菌，另一類被染成紅色，稱為革蘭氏陰細(xì)菌，另一類被染成紅色，稱為革蘭氏陰性細(xì)菌。這種染色的結(jié)果主要與細(xì)菌的細(xì)性細(xì)菌。這種染色的結(jié)果主要與細(xì)菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成有關(guān)。胞壁結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成有關(guān)。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材1、枯草芽孢桿菌（、枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）4、載玻片、載玻片5、顯微鏡等、顯微鏡等2、大腸桿菌（、大腸桿菌（Escherichia coli）3、革蘭氏染色液（一套）、革蘭氏染色液（一套）操作步驟操作步驟涂片涂片蒸餾水蒸餾水接種環(huán)接種環(huán)草酸銨草酸銨結(jié)晶

4、紫結(jié)晶紫 碘碘 液液95%乙醇乙醇 沙沙 黃黃自然干燥自然干燥媒染媒染1min脫色脫色2030s固定固定初染初染1min復(fù)染復(fù)染2min干燥干燥鏡檢鏡檢注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)革蘭氏染色成敗與否與許多因素有關(guān)革蘭氏染色成敗與否與許多因素有關(guān) 菌齡菌齡 涂片厚薄涂片厚薄 脫色時(shí)間（最為關(guān)鍵）脫色時(shí)間（最為關(guān)鍵）實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三 微生物細(xì)胞的鏡檢計(jì)數(shù)法微生物細(xì)胞的鏡檢計(jì)數(shù)法實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康牧私庋蛴?jì)數(shù)板的構(gòu)造了解血球計(jì)數(shù)板的構(gòu)造掌握其使用方法掌握其使用方法實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 微生物細(xì)胞數(shù)量測定方法很多，常用的有微生物細(xì)胞數(shù)量測定方法很多，常用的有鏡檢直接計(jì)數(shù)法和平板菌落計(jì)數(shù)法。鏡檢直接鏡檢直接計(jì)數(shù)法和平板菌落計(jì)

5、數(shù)法。鏡檢直接計(jì)數(shù)法適用于各種含單細(xì)胞菌體的純培養(yǎng)懸浮計(jì)數(shù)法適用于各種含單細(xì)胞菌體的純培養(yǎng)懸浮液，但對雜菌和雜質(zhì)則不易分辯。菌體較大的液，但對雜菌和雜質(zhì)則不易分辯。菌體較大的細(xì)胞常采用血球計(jì)數(shù)板。細(xì)胞常采用血球計(jì)數(shù)板。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 血球計(jì)數(shù)板是一塊特制厚玻片，中部平臺上有兩血球計(jì)數(shù)板是一塊特制厚玻片，中部平臺上有兩個(gè)方格網(wǎng)，每個(gè)方格網(wǎng)中央有一個(gè)正方形大方格，個(gè)方格網(wǎng)，每個(gè)方格網(wǎng)中央有一個(gè)正方形大方格，面積為面積為1m2，等分成，等分成400個(gè)小方格，每小格面積為個(gè)小方格，每小格面積為1/400m2。計(jì)數(shù)池深度為，所以，每小格的體積是。計(jì)數(shù)池深度為，所以，每小格的體積是1/4000mm3。因

6、此，使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)需先測定。因此，使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)需先測定一定數(shù)量小格中的微生物細(xì)胞數(shù)，求得平均值，再一定數(shù)量小格中的微生物細(xì)胞數(shù)，求得平均值，再換算成每毫升菌液中微生物細(xì)胞數(shù)量。換算成每毫升菌液中微生物細(xì)胞數(shù)量。每毫升樣品中微生物細(xì)胞數(shù)每毫升樣品中微生物細(xì)胞數(shù)每小格細(xì)胞平均數(shù)每小格細(xì)胞平均數(shù) 4000 1000 稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材1、啤酒酵母（、啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）菌懸液）菌懸液2、血球計(jì)數(shù)板和蓋玻片、血球計(jì)數(shù)板和蓋玻片4、吸水紙、吸水紙3、顯微鏡、顯微鏡操作步驟操作步驟 調(diào)節(jié)好菌液濃度調(diào)節(jié)好菌液濃度 放置好計(jì)數(shù)板放置好計(jì)數(shù)板 加樣

7、加樣 低倍鏡觀察低倍鏡觀察 高倍鏡計(jì)數(shù)高倍鏡計(jì)數(shù) 清潔計(jì)數(shù)板清潔計(jì)數(shù)板 還原顯微鏡還原顯微鏡實(shí)驗(yàn)四實(shí)驗(yàn)四 微生物細(xì)胞大小的測定微生物細(xì)胞大小的測定實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆绽脺y微尺測定微生物細(xì)胞大小的方法掌握利用測微尺測定微生物細(xì)胞大小的方法增強(qiáng)對微生物細(xì)胞大小的感性認(rèn)識增強(qiáng)對微生物細(xì)胞大小的感性認(rèn)識實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 微生物細(xì)胞大小是微生物的基本形態(tài)特征微生物細(xì)胞大小是微生物的基本形態(tài)特征,其測定需借助于測微尺，包括目尺和臺尺。其測定需借助于測微尺，包括目尺和臺尺。 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 由于不同的目鏡和物鏡組合放大倍數(shù)不由于不同的目鏡和物鏡組合放大倍數(shù)不同，目尺每小格所代表的實(shí)際長度也不同，同，目尺

8、每小格所代表的實(shí)際長度也不同，因此，用目尺測量微生物細(xì)胞大小時(shí)，必須因此，用目尺測量微生物細(xì)胞大小時(shí)，必須先用臺尺進(jìn)行校正，以求出該顯微鏡在一定先用臺尺進(jìn)行校正，以求出該顯微鏡在一定放大倍數(shù)目鏡和物鏡下，目尺每小格所代表放大倍數(shù)目鏡和物鏡下，目尺每小格所代表的相對長度。然后再根據(jù)微生物細(xì)胞相對于的相對長度。然后再根據(jù)微生物細(xì)胞相對于目尺的格數(shù)，計(jì)算出細(xì)胞的實(shí)際長度。目尺的格數(shù)，計(jì)算出細(xì)胞的實(shí)際長度。 實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材1、啤酒酵母（、啤酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）2、目鏡測微尺、目鏡測微尺5、吸水紙、吸水紙4、顯微鏡、顯微鏡3、鏡臺測微尺、鏡臺測微尺6、載玻片和蓋玻

9、片、載玻片和蓋玻片操作步驟操作步驟 調(diào)整好顯微鏡，調(diào)節(jié)好光源調(diào)整好顯微鏡，調(diào)節(jié)好光源 裝好目尺裝好目尺 校正目尺校正目尺（1）放置好臺尺）放置好臺尺（2）校正）校正（3）計(jì)算）計(jì)算 菌體大小測定菌體大小測定 測定完畢測定完畢實(shí)驗(yàn)五實(shí)驗(yàn)五 培養(yǎng)基的制備及滅菌培養(yǎng)基的制備及滅菌實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆张囵B(yǎng)基制備的原理和方法掌握培養(yǎng)基制備的原理和方法了解滅菌方法了解滅菌方法實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 不同的微生物生長繁殖都需要提供一定的營養(yǎng)不同的微生物生長繁殖都需要提供一定的營養(yǎng)條件，在實(shí)驗(yàn)室中，微生物的營養(yǎng)是由培養(yǎng)基來提條件，在實(shí)驗(yàn)室中，微生物的營養(yǎng)是由培養(yǎng)基來提供的。培養(yǎng)基是按照微生物生長繁殖所需要的營養(yǎng)供的

10、。培養(yǎng)基是按照微生物生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)，用人工方法配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。物質(zhì)，用人工方法配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。 除營養(yǎng)條件以外，微生物必須在最適酸堿度范除營養(yǎng)條件以外，微生物必須在最適酸堿度范圍內(nèi)才表現(xiàn)出最大生命力，因此，應(yīng)針對不同的微圍內(nèi)才表現(xiàn)出最大生命力，因此，應(yīng)針對不同的微生物將培養(yǎng)基的生物將培養(yǎng)基的pHpH值調(diào)節(jié)到適當(dāng)范圍。值調(diào)節(jié)到適當(dāng)范圍。 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 培養(yǎng)基的種類較多，根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀培養(yǎng)基的種類較多，根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)可分為三種：態(tài)可分為三種： 液體培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基： 半固體培養(yǎng)基：加半固體培養(yǎng)基：加0.20.5%瓊脂，瓊脂， 固體培養(yǎng)基：加固體培養(yǎng)基：加1.52.

11、0%瓊脂。瓊脂。實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材1、藥品、藥品2、其他、其他 牛肉膏、蛋白胨、牛肉膏、蛋白胨、NaClNaCl、瓊脂、瓊脂、1N NaOH1N NaOH、1N 1N HClHCl。 培養(yǎng)皿、試管、三角瓶、吸管、燒杯、漏斗、培養(yǎng)皿、試管、三角瓶、吸管、燒杯、漏斗、量筒、硅膠塞、天平、包裝紙、包裝繩等。量筒、硅膠塞、天平、包裝紙、包裝繩等。操作步驟操作步驟按培養(yǎng)基按培養(yǎng)基配方稱量配方稱量加水加加水加熱熔化熱熔化調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)pH值值過濾過濾分裝分裝包裝包裝滅菌滅菌檢查滅菌檢查滅菌徹底與否徹底與否實(shí)驗(yàn)六實(shí)驗(yàn)六 土壤微生物的純系分離土壤微生物的純系分離實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康牧私饧兿捣蛛x的原理、掌握其方法了解純系分

12、離的原理、掌握其方法實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 在自然條件下，微生物常以群落的形式與其他的在自然條件下，微生物常以群落的形式與其他的微生物混雜在一起。為了研究某種微生物的特征，必微生物混雜在一起。為了研究某種微生物的特征，必須獲得該種微生物的純培養(yǎng)。純培養(yǎng)就是從自然界或須獲得該種微生物的純培養(yǎng)。純培養(yǎng)就是從自然界或已染雜菌的培養(yǎng)體中分離出生產(chǎn)、科研所需的單一微已染雜菌的培養(yǎng)體中分離出生產(chǎn)、科研所需的單一微生物個(gè)體，進(jìn)行培養(yǎng)并產(chǎn)生大量的后代。生物個(gè)體，進(jìn)行培養(yǎng)并產(chǎn)生大量的后代。 獲得純培養(yǎng)的方法稱為微生物的純系分離法。獲得純培養(yǎng)的方法稱為微生物的純系分離法。實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 純系分離的方法很多，常用的有稀釋平板純系分離的方法很多，常用的有稀釋平板分離法和平板劃線分離法。這些方法都是根分離法和平板劃線分離法。這些方法都是根據(jù)微生物生長所需營養(yǎng)和環(huán)境條件不同而人據(jù)微生物生長所需營養(yǎng)和環(huán)境條件不同而人為的加以控制，以便某一種微生物在培養(yǎng)基為的加以控制，以便某一種微生物在培養(yǎng)基上出現(xiàn)單個(gè)菌落。上出現(xiàn)單個(gè)菌落。實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材 無菌培養(yǎng)皿、天平、無菌培養(yǎng)皿、天平、90ml90ml無菌水，無菌無菌水，無菌吸管、接種環(huán)、酒精燈、牛肉膏蛋白胨固體吸管、接種環(huán)、酒精燈、牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基、土壤。培養(yǎng)基、土壤。操作步驟操作步驟稱取稱取10g土樣土樣加入加入90ml無菌水中