紅掌愈傷組織誘導(dǎo)和芽的分化

1、園藝學報2003, 30(1 :107109收稿日期:2001-12-10; 修回日期:2002-06-21基金項目:中國科學院“西部之光”項目資助(990302252144 ; 西南創(chuàng)新基地項目資助(2000205紅掌愈傷組織誘導(dǎo)和芽的分化蘭芹英1李啟任2何惠英1張艷軍1解星云3(1中國科學院西雙版納熱帶植物園, 勐臘666303; 2云南大學生物技術(shù)系, 昆明650091; 3云南省茶葉科學研究所,勐海666201摘要:對影響紅掌愈傷組織誘導(dǎo)及芽分化的幾個因素進行了研究。, 其葉柄愈傷組織誘導(dǎo)率、芽分化率、分化時間均明顯優(yōu)于葉片。有影響, 葉背向下放置, 光照時間24h/d 和10h/d

2、, 97對葉柄愈傷組織誘導(dǎo)無顯著影響, 但光照24h/d 和10h/d 。葉柄培養(yǎng)以N 6, K C 和1/2MS 培養(yǎng)基為佳。葉片培養(yǎng)則以P , N 6, 從接種到叢芽分化共49d , 較已有報道提前1131d 關(guān)健詞:紅掌; 愈傷組織; ; 芽分化中圖分類號:S A :05132353X (2003 01201072031目的紅掌(Anthurium andraeanum Linden 又名花燭, 安祖花。本試驗對影響紅掌愈傷組織誘導(dǎo)和芽分化的因素進行研究, 為紅掌試管苗的工廠化生產(chǎn)和規(guī)模化種植提供依據(jù)。取盆栽苗充分展開、半展開和未展開的葉片, 常規(guī)消毒滅菌后將葉片剪成0. 51cm 見方

3、小塊,葉柄剪成長1cm 的切段接種在P 1+BA 2mg/L +2,42D 0. 2mg/L 培養(yǎng)基中, 誘導(dǎo)愈傷組織形成和芽分化, 研究葉片外植體成熟度的影響。待芽長成小苗后, 再用無菌小苗的葉片(0. 51cm 見方 和葉柄(長約1cm 作外植體進行不同放置方式、光照時間及培養(yǎng)基等的研究。培養(yǎng)溫度(28±2 , 光強2000lx 。在芽的增殖和生長中常伴有根的形成, 因此, 發(fā)育正常的小苗可直接移栽, 若根生長不好的則轉(zhuǎn)入1/2MS +I AA 0. 2mg/L 培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)。2結(jié)果與討論2. 1葉片外植體對愈傷組織的形成和芽分化的影響由表1結(jié)果可知, 葉柄的愈傷組織誘導(dǎo)

4、率高于葉片, 每塊愈傷組織分化的芽數(shù)也高于葉片。半展開葉和未展開葉的葉柄愈傷組織誘導(dǎo)率都為100%, 展開葉片的葉柄愈傷組織誘導(dǎo)率為81. 87%。葉柄接種9d 后, 切口兩端開始膨大, 28d 后愈傷組織分化芽。展開葉片的愈傷組織分化叢芽需91d , 而未展開葉共需49d 。2. 2葉片放置方式和光照時間對葉片愈傷組織誘導(dǎo)率的影響將長33. 5cm 的無菌小苗葉片作為外植體, 在光照0、10、24h/d 條件下, 葉片背面向上放置, 愈傷組織誘導(dǎo)率分別為43. 35%、47. 06%、54. 54%; 葉片背面向下時愈傷組織誘導(dǎo)率分別為56%、96. 55%、100%。因此, 我們認為葉背向

5、下, 光照10h/d 以上有利于愈傷組織的誘導(dǎo)(表2 。2. 3 光照時間對葉柄愈傷組織誘導(dǎo)及芽生長的影響無菌小苗葉柄外植體在P +BA 2mg/L +2,42D 0. 2mg/L 培養(yǎng)基和光照0、10和24h/d 條件下培養(yǎng)兩個月的結(jié)果表明:光照對葉柄愈傷組織誘導(dǎo)沒有影響, 但對叢芽的分化影響較大, 24h/d 光照芽分化最多, 黑暗條件下最少(表3 。2. 4基本培養(yǎng)基對葉片, 葉柄愈傷組織誘導(dǎo)和叢芽分化的影響外植體接種在MS 、1/2MS 、P 、N 6、B 5、K C 附加BA 2mg/L +2,42D 0. 2mg/L 培養(yǎng)基中, 光照10h/d , 兩個月后統(tǒng)計結(jié)果(表4 所示:P

6、 、K C 、N 6和1/2MS 對葉片愈傷組織誘導(dǎo)效果較好; 芽數(shù)較多的為P 培養(yǎng)基。葉柄培養(yǎng)在P 、N 6、K C 、1/2MS 培養(yǎng)基中, 愈傷組織誘導(dǎo)率和芽分化率較高, MS 較低, B 5芽分化率為0; 芽數(shù)較多的是N 6、K C 、1/2MS 。表1外植體成熟度對愈傷組織的形成和芽分化的影響T able 1The effect of explant m aturity on inducing callus and differentiation of bud 外植體成熟度Explant maturity 接種數(shù)N o.explants誘導(dǎo)愈傷組織數(shù)N o. calli 愈傷組織誘導(dǎo)

7、率Callus induction Percent (% 分化芽的塊數(shù)N o. of bud 芽分化bud 芽數(shù)/塊N o. shoot/callus 未展開葉片F(xiàn) olded leave 18844. 4463314葉柄Petiole 24241001050半展開葉片Partly folded leave 22167340. 91228葉柄Petiole 191973. 68545展開葉片Un folded leave 24161041. 671021葉柄Petiole81. 1045. 46850表2T able 2of laying w ay leave and light timeon

8、 callus induction 放置方式Laying way 光照時間Light time(h/d 接種數(shù)N o. explants 誘導(dǎo)愈傷組織數(shù)N o. calli 誘導(dǎo)率N o. callus percent (% 葉背向上0341647. 06Abaxial of leave 10301343. 33facing up 24331054. 44葉背向下0251456. 00Abaxial of leave 10292896. 55facing down 242424100表3光照時間對葉柄愈傷組織誘導(dǎo)率的影響T able 3The effect of petiole on call

9、us induction in different light 光照時間Light time (h/d 接種數(shù)N o. explants 誘導(dǎo)愈傷組織數(shù)N o. calli 誘導(dǎo)率N o. callus percent (% 每塊愈傷組織的芽數(shù)N o. buds 0494795. 92+10302893. 33+24323196. 86+表4不同基本培養(yǎng)基對葉片, 葉柄愈傷組織誘導(dǎo)和芽分化的影響T able 4The effect of leave and petiole on callus inductionand differentiation of bud in different b

10、ase mediu 外植體Explant 培養(yǎng)基M edium 愈傷組織Callus 誘導(dǎo)率Induction percent rate (% >0. 5cm (% 芽分化Bud differentiation 分化率Differentiation percent rate (% 芽數(shù)N o. buds 葉片MS 4252. 3861. 91+Leave 1/2MS 9649. 9256. 72+K C100500-N 697. 579. 4994. 92+P1009696+B 56835. 290-葉柄MS 505535+Petiole 1/2MS 9245. 6571. 74+K C

11、 97. 589. 789. 74+N 6100100100+P 1007276+B 575. 5600-自1974年P(guān)ierik 1首次培養(yǎng)紅掌取得成功以來, 國內(nèi)外對紅掌愈傷組織誘導(dǎo)的絕大多數(shù)的研究報道是:外植體愈傷組織愈傷組織增殖芽完整植株15。從外植體誘導(dǎo)愈傷組織, 再分化出芽最快需6080d 6, 而我們的試驗結(jié)果是, 未展開葉的葉柄作外植體, 一個月后愈傷組織誘導(dǎo)率為100%, 49d 后愈傷組織分化出叢芽, 比前人的結(jié)果提前了1131d 。本試驗結(jié)果表明, 葉背向下, 光照有利于愈傷組織的誘導(dǎo), 葉背向上光照對愈傷組織誘導(dǎo)率沒有影響, 這可能與葉片的結(jié)構(gòu)和功能有關(guān)。葉片和葉柄培養(yǎng)

12、在不同氨鹽含量的培養(yǎng)基B 5(NH 4 2S O 4134mg/L 和MS (NH 4NO 31680mg/L 中, 愈傷組織誘導(dǎo)率較低。前人的研究結(jié)果表明, 低濃度的氨鹽對很多紅掌愈傷組織誘導(dǎo)有利, 206825mg/L 較為合適, 大于825mg/L 或小于206mg/L 將不利于愈傷組織的誘導(dǎo)2。本試驗結(jié)果與前801園藝學報30卷人的相似。芽的分化及再生植株照片見插頁4。參考文獻:1Pierik R L M , S teegmans H H M , Van Der meys J A J. Plantlet formation in callus tissues Anthurium and

13、raeanum Lind. Scientia H orticulturae , 1974, 2:1931982Pierik R L M. Anthurium andraeanum plantlets produced from cultivated in vitro. Physiol. Plant , 1976, 37:80823K uehnle A R , Sugii N. Callus induction plantlet regeneration in tissue cultures of hawaiian anthuriums. H ortscience , 26(7 :9199214

14、苓益群, 蔣如敏, 鄧志龍, 等. 安祖花離體增殖的形態(tài)發(fā)生與理化因子效應(yīng). 園藝學報, 1993, 20(2 :1871925浩仁塔本, 余偉蒞. 安祖花的組織培養(yǎng)和快速繁殖. 植物生理學通訊, 1991, (6 :4326楊濤, 陳德海, 吳荔萍. 安祖花的組織培養(yǎng)及其細胞和葉綠體發(fā)育過程的電鏡觀察. 亞熱帶植物通訊, 1998, 27(1 :17The C allus I nduction of Anthurium andraeanum and Lan Qinying 1, Li Qiren 2, He Huiying 1, Zhang Y anjun 1, and 3(1Xishuan

15、gbanna Tropic Botanical Garden , The Academy o f Sciences , , China 2o f Biology Technology ,Kunming 650091, China ; 3Tea Reserch Institute o f Yunnan , , Abstract :The factors that in and bud differentiation of Anthurium andraeanum Linden were studied. results than blade in callus induction , bud d

16、ifferentiation and duration callus induction on blade was in fluenced by the way of placement on medium and period for , and highest percentage (100%and 97% for callus induction were recorded under the condition that downside of blade were against the medium and with 24h/d and 10h/d light. Differnet

17、 light treatments did not affect the callus induction of petiole significantly. H owever , the 24h/d and 10h/d light treatment obviously im proved the bud differentiation com pared to the treatment with no light. Promising results am ong several mediums tested were recorded :N 6, K C and 1/2MS for p

18、etiole and P , N 6and 1/2MS for blade , respectively. The time from explant to bud differentiation were 49d , which was 11-31d earlier than time previously reported.K ey w ords :Anthurium andraeanum Linden ; Inducing of callus ; Differentiating bud歡迎購閱下列新書4-1花卉無土栽培23元4-2花卉組織培養(yǎng)23元4-3花卉化學控制23元4-4花卉貯藏保鮮23元4-5月季27元4-6菊花29元4-7香石竹31元4-8球根類37元4-9多漿花卉48元4-10宿根花卉44元4-11溫室花卉52元4-12藤蔓花卉37元4-13中小型苗圃林果苗木繁育實用技術(shù)手冊25元4-14中國果樹志棗卷56元4-15中國果樹志李卷100元4-16中國果樹志核桃卷76元4-17中國果樹志山楂卷56元4-18中國果樹志荔枝卷67元4-19中國果樹志龍眼、枇杷卷80元4-21中國果樹志蘋果卷134元4-22中國果樹志桃卷110元4-23中國木本植物種子200元4-24新型芽苗菜-體芽菜生產(chǎn)技術(shù)圖冊