第2章中藥制劑的鑒別ppt課件

1、 第二章第二章 中藥制劑的鑒別中藥制劑的鑒別 本章重點：本章重點：1 1、了解中藥制劑的氣相色譜、高效液相、了解中藥制劑的氣相色譜、高效液相色譜定性鑒別的方法。色譜定性鑒別的方法。 2 2、熟習中藥制劑的性狀鑒別、顯微鑒別、熟習中藥制劑的性狀鑒別、顯微鑒別、熒光鑒別、可見熒光鑒別、可見紫外光譜鑒別的方法。紫外光譜鑒別的方法。3 3、掌握如何建立中藥制劑的薄層色譜定、掌握如何建立中藥制劑的薄層色譜定性鑒別方法。性鑒別方法。中藥制劑的鑒別：是指利用一定的方法來中藥制劑的鑒別：是指利用一定的方法來確定中藥制劑原料藥的組成，從而判別該確定中藥制劑原料藥的組成，從而判別該制劑的真?zhèn)?。制劑的真?zhèn)?。目的：?/p>

2、的： 檢定制劑的真實性。檢定制劑的真實性。方法：方法： 1、性狀鑒別、性狀鑒別 2、顯微鑒別、顯微鑒別 3、理化鑒別、理化鑒別 化學反響法化學反響法 升華法升華法 光譜法光譜法 色譜法色譜法 第一節(jié)第一節(jié) 性狀鑒別性狀鑒別 中藥制劑的性狀是指除去包裝后的性狀。性中藥制劑的性狀是指除去包裝后的性狀。性狀鑒別包括大小、色澤、外表特征、質地、氣味狀鑒別包括大小、色澤、外表特征、質地、氣味等方面。制劑的性狀能初步反映其質量情況。等方面。制劑的性狀能初步反映其質量情況。 丸劑或有包衣的片劑還應描畫除去包衣后的顏丸劑或有包衣的片劑還應描畫除去包衣后的顏色和氣味，硬膠囊劑寫明內容物的性狀。色和氣味，硬膠囊劑

3、寫明內容物的性狀。 制劑色澤假設是以兩種顏色組合的，描寫時以制劑色澤假設是以兩種顏色組合的，描寫時以后者為主。如棕紅色，以紅色為主。棕黃色，以后者為主。如棕紅色，以紅色為主。棕黃色，以黃色為主。黃色為主。一、性狀鑒別的內容：一、性狀鑒別的內容：顏色：從單一色到組合色不等，如紅色、深褐色顏色：從單一色到組合色不等，如紅色、深褐色、紅棕色等。、紅棕色等。形狀：形狀描畫多種多樣。同為液體，就可分為形狀：形狀描畫多種多樣。同為液體，就可分為粘稠液體、液體、廓清液體、澄明液體等。粘稠液體、液體、廓清液體、澄明液體等。外形：與制備模具有關，如栓劑有球形、魚雷形外形：與制備模具有關，如栓劑有球形、魚雷形、卵

4、形、鴨嘴形等。、卵形、鴨嘴形等。氣：可分為香、芳香、清香、腥、臭、特異、氣氣：可分為香、芳香、清香、腥、臭、特異、氣微、芳香濃郁等。微、芳香濃郁等。味：可分為甜、酸、苦、澀、辛、涼、咸、辣、味：可分為甜、酸、苦、澀、辛、涼、咸、辣、麻等。麻等。其他：光澤感、滑膩感等也可用來描畫性狀。其他：光澤感、滑膩感等也可用來描畫性狀。二、各種劑型的性狀描畫：在描畫制劑性狀時，二、各種劑型的性狀描畫：在描畫制劑性狀時，應以中醫(yī)藥實際為指點。應以中醫(yī)藥實際為指點。三、物理常數(shù)的測定：物理常數(shù)包括折光率、旋三、物理常數(shù)的測定：物理常數(shù)包括折光率、旋光度、比旋度、凝點、熔點、相對密度等。同一光度、比旋度、凝點、熔

5、點、相對密度等。同一種物質，物理常數(shù)不變。測定物理常數(shù)不僅對藥種物質，物理常數(shù)不變。測定物理常數(shù)不僅對藥品具有鑒別意義，也反映藥品的純度，是評價藥品具有鑒別意義，也反映藥品的純度，是評價藥質量量的主要目的之一。質量量的主要目的之一。 顯微鑒別是利用顯微鏡來察看中藥制劑中原藥顯微鑒別是利用顯微鏡來察看中藥制劑中原藥材組織碎片、細胞或內含物等特征，從而鑒別制劑材組織碎片、細胞或內含物等特征，從而鑒別制劑的處方組成。顯微鑒別操作簡單、直觀、耗費少，的處方組成。顯微鑒別操作簡單、直觀、耗費少，是藥典常用的鑒別方法之一。但如今運用越來越少。是藥典常用的鑒別方法之一。但如今運用越來越少。一、特點：一、特點

6、：1、在本鑒別中，只需藥材原有組織構造特征能保管、在本鑒別中，只需藥材原有組織構造特征能保管到制劑中，才有鑒別意義。故由溶劑提取的制劑，到制劑中，才有鑒別意義。故由溶劑提取的制劑，不能用此法進展鑒別。不能用此法進展鑒別。 第二節(jié) 顯微鑒別2 2、中藥制劑普通多由兩味以上中藥材制備而成，、中藥制劑普通多由兩味以上中藥材制備而成，制劑中各原藥材和輔料的顯微特征會產生相互影制劑中各原藥材和輔料的顯微特征會產生相互影響或干擾。應選擇沒有干擾又能闡明該味藥存在響或干擾。應選擇沒有干擾又能闡明該味藥存在的顯微特征作為鑒別根據。的顯微特征作為鑒別根據。3 3、不同劑型其制片方法不同。、不同劑型其制片方法不同

7、。二、制片方法：二、制片方法：1 1、散劑、膠囊劑：取粉末，直接加甘油醋酸或、散劑、膠囊劑：取粉末，直接加甘油醋酸或水合氯醛透化裝片。水合氯醛透化裝片。2 2、片劑：用刀片直接從藥片斷面刮取少量粉末、片劑：用刀片直接從藥片斷面刮取少量粉末或研碎后取少量樣品透化裝片?；蜓兴楹笕∩倭繕悠吠富b片。3 3、水丸、錠劑：研成粉末后取少量直接透化裝、水丸、錠劑：研成粉末后取少量直接透化裝片。片。4 4、蜜丸：取蜜丸切碎，加水攪拌，洗滌后，置、蜜丸：取蜜丸切碎，加水攪拌，洗滌后，置離心管中離心分別沉淀。如此反復處置以除去離心管中離心分別沉淀。如此反復處置以除去蜂蜜后透化裝片。蜂蜜后透化裝片。 三、運用實例

8、： 六味地黃丸的顯微定性鑒別 顯微鑒別 取本品置顯微鏡下察看，(1)薄壁組織棕色至黑棕色，細胞多伸展，內含棕色核狀物。 (熟地黃) (2)果皮表皮細胞橙黃色，外表觀類多 多角形，垂周壁略連珠狀增厚。 (山茱萸) (3)淀粉粒三角狀卵形或矩圓形，直 徑2440um，臍點短縫狀或人字狀。 (山藥) 3a草酸鈣針晶束3b淀粉粒 (4)草酸鈣簇晶存在于無色薄壁細胞 中 中，有時數(shù)個陳列成行。(牡丹皮) (5)不規(guī)那么分枝狀團塊無色，遇水合 氯醛溶化；菌絲無色，直徑4-6um。 (茯苓) (6)薄壁細胞類圓形，有橢圓形紋孔， 集成紋孔群。(澤瀉) 第三節(jié) 理化鑒別中藥制劑的理化鑒別：利用物理的、化學的中

9、藥制劑的理化鑒別：利用物理的、化學的或物理化學的方法對制劑中所含的化學成分或物理化學的方法對制劑中所含的化學成分進展定性鑒別，從而判別制劑的真?zhèn)?。進展定性鑒別，從而判別制劑的真?zhèn)巍?包括化學反響法、升華法、光譜法和色包括化學反響法、升華法、光譜法和色譜法等。其中以薄層色譜法最常用。譜法等。其中以薄層色譜法最常用。一、化學反響法：是利用中藥制劑中某一藥味所一、化學反響法：是利用中藥制劑中某一藥味所含化學成分有效成分或目的性成分與適宜試含化學成分有效成分或目的性成分與適宜試劑發(fā)生化學反響，產生顏色或生成沉淀來作為該劑發(fā)生化學反響，產生顏色或生成沉淀來作為該制劑鑒別根據的方法。制劑鑒別根據的方法。(

10、 (一一) )常用的鑒別反響按化學成分分有蒽醌類成分常用的鑒別反響按化學成分分有蒽醌類成分遇堿性試劑的呈色反響，黃酮類成分的鹽酸遇堿性試劑的呈色反響，黃酮類成分的鹽酸鎂粉反響，香豆素和其它內酯類成分的異羥肟酸鎂粉反響，香豆素和其它內酯類成分的異羥肟酸鐵反響，皂苷類成分的鐵反響，皂苷類成分的LBLB反響，氨基酸的茚三反響，氨基酸的茚三酮反響，糖類的酮反響，糖類的-萘酚濃硫酸反響、生物堿的萘酚濃硫酸反響、生物堿的碘化鉍鉀反響及鞣質和明膠的沉淀反響等。碘化鉍鉀反響及鞣質和明膠的沉淀反響等。 ( (二二) )化學反響鑒別法多在試管中進展，制劑樣品要先化學反響鑒別法多在試管中進展，制劑樣品要先制成適宜的

11、供試液。制成適宜的供試液。制備供試液的常用方法如下：制備供試液的常用方法如下：1 1、以、以5050-70-70乙醇回流提?。禾崛〕龆鄶?shù)化學成分乙醇回流提?。禾崛〕龆鄶?shù)化學成分. .2 2、以酸性乙醇回流提?。禾崛∮袡C酸、生物堿等。、以酸性乙醇回流提?。禾崛∮袡C酸、生物堿等。3 3、以水提?。菏覝亟荩簷z驗氨基酸、蛋白質。、以水提?。菏覝亟荩簷z驗氨基酸、蛋白質。6060熱水提?。簷z驗單糖、多糖、皂苷、鞣質及其熱水提取：檢驗單糖、多糖、皂苷、鞣質及其它苷類。它苷類。4 4、以乙醚提?。?、以乙醚提?。?濾液檢驗酯、內酯、苷元。濾液檢驗酯、內酯、苷元。藥渣揮去乙醚，醇回流提取各種苷類。藥渣揮去乙醚

12、，醇回流提取各種苷類。5 5、以升華法提?。荷A的成分，如游離蒽醌苷元等。、以升華法提?。荷A的成分，如游離蒽醌苷元等。6 6、以水蒸氣蒸餾法提?。簱]發(fā)性成分。、以水蒸氣蒸餾法提?。簱]發(fā)性成分。( (三三) )普通化學反響法用于中藥制劑鑒別應留意：普通化學反響法用于中藥制劑鑒別應留意： (1) (1)慎重運用專屬性不好的分析反響，如泡沫生成慎重運用專屬性不好的分析反響，如泡沫生成反響、三氯化鐵顯色反響等。反響、三氯化鐵顯色反響等。 (2) (2)在分析前對樣品進展分別、精制，除去干擾分在分析前對樣品進展分別、精制，除去干擾分析反響的物質，借此改善鑒別方法的專屬性。析反響的物質，借此改善鑒別方法

13、的專屬性。 (3) (3)采用陰性對照和陽性對照的方式，對擬定的鑒采用陰性對照和陽性對照的方式，對擬定的鑒別方法進展反復驗證，防止出現(xiàn)假陽性。別方法進展反復驗證，防止出現(xiàn)假陽性。二、升華法二、升華法: : 又稱微量升華法?？设b別中藥制劑中某些具又稱微量升華法。可鑒別中藥制劑中某些具有升華性質的化學成分。升華物具有以下四個條有升華性質的化學成分。升華物具有以下四個條件之一，可用此法鑒別：件之一，可用此法鑒別：1 1、在顯微鏡下察看具有一定的外形。、在顯微鏡下察看具有一定的外形。2 2、在可見光下察看具有一定的顏色。、在可見光下察看具有一定的顏色。3 3、在紫外燈下察看顯出不同顏色熒光。、在紫外燈

14、下察看顯出不同顏色熒光。4 4、加一定試劑處置后顯出不同顏色或熒光。、加一定試劑處置后顯出不同顏色或熒光。 操作方法：取金屬片安放在有圓孔操作方法：取金屬片安放在有圓孔( (直徑約直徑約2cm)2cm)的石棉板上，在金屬片上放一小金屬圈的石棉板上，在金屬片上放一小金屬圈( (內徑約內徑約1.5cm1.5cm，高約，高約0.8cm)0.8cm)，對準石棉板上的，對準石棉板上的圓孔，圈內放入預先研細成粉末的中藥制劑一圓孔，圈內放入預先研細成粉末的中藥制劑一薄層，圈上覆蓋載玻片，在石棉板下圓孔處用薄層，圈上覆蓋載玻片，在石棉板下圓孔處用酒精燈漸漸加熱，至粉末開場變焦，去火待冷酒精燈漸漸加熱，至粉末開

15、場變焦，去火待冷，載玻片上有升華物凝集。將載玻片反轉后，載玻片上有升華物凝集。將載玻片反轉后，置顯微鏡下察看結晶外形、色澤，或取升華物置顯微鏡下察看結晶外形、色澤，或取升華物加試液察看反響。加試液察看反響。三、光譜法：三、光譜法： 利用光譜法對中藥制劑進展定性利用光譜法對中藥制劑進展定性鑒別。主要包括熒光法、可見鑒別。主要包括熒光法、可見紫外紫外分光光度法，紅外分光光度法。分光光度法，紅外分光光度法。1 1、熒光法：、熒光法：適用范圍：組成中藥制劑的中藥材中含有能產生熒適用范圍：組成中藥制劑的中藥材中含有能產生熒光的化學成分，在可見光、紫外光照射下能發(fā)出熒光，光的化學成分，在可見光、紫外光照射

16、下能發(fā)出熒光，或經試劑處置后發(fā)出熒光。含有這類藥材的中藥制劑或經試劑處置后發(fā)出熒光。含有這類藥材的中藥制劑可用熒光法進展鑒別?？捎脽晒夥ㄟM展鑒別。操作方法：取制劑的提取液點在濾紙上或試紙上，操作方法：取制劑的提取液點在濾紙上或試紙上，置可見光、紫外光燈下置可見光、紫外光燈下(365nm(365nm或或254nm)254nm)察看或加一定察看或加一定的試劑后再進展察看。的試劑后再進展察看。 2 2、可見、可見紫外分光光度法：紫外分光光度法： 中藥制劑含有芳香族或其它有不飽和共軛構中藥制劑含有芳香族或其它有不飽和共軛構造的化學成分，在可見造的化學成分，在可見紫外光區(qū)有選擇性吸收紫外光區(qū)有選擇性吸收

17、，可產生吸收光譜。共軛體系長短不同，導致吸，可產生吸收光譜。共軛體系長短不同，導致吸光度不同光度不同, ,利用吸收光譜的特征即可鑒別制劑中某利用吸收光譜的特征即可鑒別制劑中某些成分。但制劑中成分的復雜性及吸收度的加和些成分。但制劑中成分的復雜性及吸收度的加和性，使這一方法專屬性差。為提高專屬性，可選性，使這一方法專屬性差。為提高專屬性，可選擇適當?shù)姆椒▽悠芳兓鬁y定吸收光譜。此法擇適當?shù)姆椒▽悠芳兓鬁y定吸收光譜。此法分以下五種情況：分以下五種情況： 規(guī)定吸收波長法：樣品經適當處置后，測定其吸規(guī)定吸收波長法：樣品經適當處置后，測定其吸收光譜，在一定波優(yōu)點有最大吸收。收光譜，在一定波優(yōu)點有最

18、大吸收。對照品對比法：最常用分光光度定性鑒別法。取對照品對比法：最常用分光光度定性鑒別法。取對照品或對照藥材及供試品經一樣方法處置后，對照品或對照藥材及供試品經一樣方法處置后，制成對照品溶液及供試品溶液，分別測定吸收光制成對照品溶液及供試品溶液，分別測定吸收光譜，比較二者吸收光譜的一致性。譜，比較二者吸收光譜的一致性。規(guī)定吸收波長和吸收度法：規(guī)定吸收波長和吸收度法：規(guī)定吸收波長和吸收度比值法：規(guī)定吸收波長和吸收度比值法：多溶劑光譜法：多溶劑光譜法：3 3、紅外分光光度法：、紅外分光光度法：在在40004000400cm-1400cm-1范圍間測定中藥制劑樣品紅范圍間測定中藥制劑樣品紅外吸收光譜

19、。外吸收光譜。制樣方法：取樣品直接制樣或溶劑提取后制制樣方法：取樣品直接制樣或溶劑提取后制樣。樣。該法具有取樣量少、快速、簡便、準確等特該法具有取樣量少、快速、簡便、準確等特點，但因儀器較少，目前用于中藥制劑鑒別的點，但因儀器較少，目前用于中藥制劑鑒別的報道不多。報道不多。四、色譜法：包括薄層色譜法、紙色譜法、薄四、色譜法：包括薄層色譜法、紙色譜法、薄層掃描法、氣相色譜法和高效液相色譜法。其層掃描法、氣相色譜法和高效液相色譜法。其中薄層色譜法最常用。中薄層色譜法最常用。( (一一) )紙色譜：紙色譜：以紙為載體，以紙上所含水或其他物質為固以紙為載體，以紙上所含水或其他物質為固定相，用展開劑進展

20、展開的分配色譜。定相，用展開劑進展展開的分配色譜。用比移值用比移值RfRf表示各組成成分的位置，因表示各組成成分的位置，因影響比移值的要素較多，故普通采用在一樣實影響比移值的要素較多，故普通采用在一樣實驗條件下與對照物質對比的方法以確定其異同。驗條件下與對照物質對比的方法以確定其異同。 二薄層色譜法：1、運用本法鑒定中藥制劑，通常是在同一塊薄層板上點入樣品和適宜的對照物，采用同一條件依法層析展開，經顯色或用其他方法檢出色譜斑點后，將樣品與對照物所得的色譜圖進展對比，作出鑒定。2、在中藥制劑的鑒別中，薄層色譜法為最常用方法。3、為了保證實驗的重現(xiàn)性、準確度及分別度，薄層色譜法要進展規(guī)范化操作。

21、1 1樣品供試液的制備：樣品供試液的制備：樣品的提取：采用常用的提取方法，如冷浸法樣品的提?。翰捎贸Ｓ玫奶崛》椒ǎ缋浣?、回流提取法等，詳見第一章。、回流提取法等，詳見第一章。供試液的凈化：供試液的凈化：單一溶劑萃取法：用單一溶劑萃取。單一溶劑萃取法：用單一溶劑萃取。分段萃取法：利用藥品各個部分不同的溶解度，分段萃取法：利用藥品各個部分不同的溶解度，用不同極性的溶劑分段萃取，到達樣品供試液凈用不同極性的溶劑分段萃取，到達樣品供試液凈化的目的?；哪康?。液液液萃取法：液萃取法：固固液萃取法：液萃取法：2 2薄層色譜法運用的資料：薄層色譜法運用的資料：薄層板：最好用厚度薄層板：最好用厚度1 12

22、mm2mm的優(yōu)質平板玻璃。的優(yōu)質平板玻璃。規(guī)格：規(guī)格：10cm10cm10cm10cm、10cm10cm15cm15cm、20cm20cm10cm10cm或或20cm20cm20cm20cm。吸附劑或載體：最常用的是硅膠吸附劑或載體：最常用的是硅膠G(G(加有作為黏合劑加有作為黏合劑的煅石膏的煅石膏) )、另外還有硅膠、另外還有硅膠GF254(GF254(硅膠硅膠G G中加熒光劑中加熒光劑) )、硅膠、硅膠H H不含黏合劑、硅膠不含黏合劑、硅膠HF254 (HF254 (硅膠硅膠H H中加中加熒光劑熒光劑) )等。等。有的吸附劑中還可參與作黏合劑的羧甲基纖維素鈉有的吸附劑中還可參與作黏合劑的羧

23、甲基纖維素鈉、酸、堿或緩沖溶液等。、酸、堿或緩沖溶液等。涂布器：手工、半自動兩種薄層涂布器。涂布涂布器：手工、半自動兩種薄層涂布器。涂布的厚度有固定厚度和可以調理的兩種。的厚度有固定厚度和可以調理的兩種。點樣器材：點樣器材：定量點樣毛細管：常用規(guī)格：定量點樣毛細管：常用規(guī)格：.L、.L 、.L 、.L 、.L 、.L 、L 。要求：標示容量準確，管端平整光滑，管。要求：標示容量準確，管端平整光滑，管壁干凈，液流通暢，無堵塞，無污染。壁干凈，液流通暢，無堵塞，無污染。微量注射器：應選用針尖平頭適宜薄層點樣的。微量注射器：應選用針尖平頭適宜薄層點樣的。展開箱層析缸：包括平底展開箱、雙槽展開展開箱層

24、析缸：包括平底展開箱、雙槽展開箱、程度式展開箱。箱、程度式展開箱。顯色儀器：顯色儀器：噴霧法：用噴霧瓶在一定的壓力下使試劑噴成均噴霧法：用噴霧瓶在一定的壓力下使試劑噴成均勻的細霧狀。通常用此法。勻的細霧狀。通常用此法。浸漬法：用浸漬槽將展開后的薄層板平穩(wěn)放入有浸漬法：用浸漬槽將展開后的薄層板平穩(wěn)放入有顯色劑的浸漬槽內數(shù)十秒至分鐘后取出顯色。顯色劑的浸漬槽內數(shù)十秒至分鐘后取出顯色。3 3操作方法：操作方法：薄層板的制備：將薄層板的制備：將1 1份吸附劑如硅膠份吸附劑如硅膠G G加加3 3份左右的水在研缽中用研杵沿一個方向充分研份左右的水在研缽中用研杵沿一個方向充分研磨，調成均勻糊狀物，倒入已預備

25、好的涂布器磨，調成均勻糊狀物，倒入已預備好的涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地以直線方向挪動涂布器，中，在玻板上平穩(wěn)地以直線方向挪動涂布器，使硅膠漿均勻地涂布。薄層厚度普通為使硅膠漿均勻地涂布。薄層厚度普通為0.20.20.3mm 0.3mm ，涂布好的薄層板于室溫下在程度臺上，涂布好的薄層板于室溫下在程度臺上晾干，再于晾干，再于105105110110活化約活化約3030分鐘，置枯燥分鐘，置枯燥器中備用。器中備用。 點樣：點樣通常用定量微升毛細管，樣點間點樣：點樣通常用定量微升毛細管，樣點間隔底邊以隔底邊以1cm1cm為宜，點間間隔視情況為為宜，點間間隔視情況為1 1、1.51.5或或2cm2cm，原

26、點直徑應不大于，原點直徑應不大于3mm3mm；如樣品容量較大；如樣品容量較大，或為了改善分別度，也可點成寬約，或為了改善分別度，也可點成寬約2 23mm3mm不不同長度的條帶。點樣時須留意盡量不要損害薄同長度的條帶。點樣時須留意盡量不要損害薄層外表。層外表。 展開：多采用上行展開，展開劑最初的前沿距展開：多采用上行展開，展開劑最初的前沿距原點約原點約5mm5mm，展開至規(guī)定展距后立刻將薄層板取，展開至規(guī)定展距后立刻將薄層板取出，晾干，以備檢測。多數(shù)種類展距出，晾干，以備檢測。多數(shù)種類展距7 79cm9cm已夠已夠普通普通10cm10cm板。少數(shù)需用長度為板。少數(shù)需用長度為1515或或20cm2

27、0cm的板的板，展距可適當延伸至，展距可適當延伸至121214cm14cm。樣品。樣品RfRf值以值以0.30.30.70.7為最正確。通常是將薄層板與展開缸同時為最正確。通常是將薄層板與展開缸同時飽和，方法是首先將薄層板放在雙槽展開缸的沒飽和，方法是首先將薄層板放在雙槽展開缸的沒有溶劑的一側，待飽和后，將展開缸稍傾斜使展有溶劑的一側，待飽和后，將展開缸稍傾斜使展開溶劑從另一槽內流入放有薄層板的槽內，展開開溶劑從另一槽內流入放有薄層板的槽內，展開。飽和時間普通。飽和時間普通15153030分鐘。分鐘。 展開用的溶劑需運用分析純并于臨用前配制展開用的溶劑需運用分析純并于臨用前配制，不可多次反復運

28、用。展開劑如需分層，那么放，不可多次反復運用。展開劑如需分層，那么放置分層后按要求分取上層或下層，備用。置分層后按要求分取上層或下層，備用。檢測：主要有三種方法：檢測：主要有三種方法：A A、色譜斑點本身有顏色者可直接在日光下察看、色譜斑點本身有顏色者可直接在日光下察看色譜中的色斑。色譜中的色斑。B B、色譜斑點在紫外光激發(fā)下可發(fā)射熒光者可直、色譜斑點在紫外光激發(fā)下可發(fā)射熒光者可直接置紫外光燈下察看熒光色譜。接置紫外光燈下察看熒光色譜。C C、需加試劑方能顯色或發(fā)射熒光者，那么需將、需加試劑方能顯色或發(fā)射熒光者，那么需將試劑均勻噴灑于薄層板面，直接察看、加熱顯色試劑均勻噴灑于薄層板面，直接察看

29、、加熱顯色后察看或紫外燈下察看。后察看或紫外燈下察看。 含羧甲基纖維素鈉的薄層板加熱溫度過高或含羧甲基纖維素鈉的薄層板加熱溫度過高或加熱時間過長易焦化，而加硫酸等顯色劑也易呵加熱時間過長易焦化，而加硫酸等顯色劑也易呵斥板面炭化而影響顯色效果，需求特別留意。斥板面炭化而影響顯色效果，需求特別留意。 薄層色譜圖記錄與保管：因薄層色譜較難長薄層色譜圖記錄與保管：因薄層色譜較難長時間保管，故顯色后，盡快用照相、掃描或描時間保管，故顯色后，盡快用照相、掃描或描畫等方法保管色譜結果。畫等方法保管色譜結果。影響薄層色譜分析的主要要素：薄層色譜由影響薄層色譜分析的主要要素：薄層色譜由于有同板同時檢測多個樣品，

30、分析時間短，固于有同板同時檢測多個樣品，分析時間短，固定相吸附劑相對價廉，可即用即棄等優(yōu)點定相吸附劑相對價廉，可即用即棄等優(yōu)點而在中藥分析方面被廣泛運用。但另一方面，而在中藥分析方面被廣泛運用。但另一方面，由于它是一種由于它是一種“敞開系統(tǒng)的色譜技術，外界敞開系統(tǒng)的色譜技術，外界環(huán)境條件對被分別物質的層析行為影響很大；環(huán)境條件對被分別物質的層析行為影響很大；其次是由于分析的全過程是多步驟操作，所以其次是由于分析的全過程是多步驟操作，所以操作技巧也明顯的影響色譜質量。為了提高色操作技巧也明顯的影響色譜質量。為了提高色譜的分別度和重現(xiàn)性，留意控制影響色譜質量譜的分別度和重現(xiàn)性，留意控制影響色譜質量

31、的要素就顯得非常重要。的要素就顯得非常重要。 樣品的預處置及供試液的制備：中藥的成分樣品的預處置及供試液的制備：中藥的成分復雜，未知成分多，使供試液得以凈化，往往復雜，未知成分多，使供試液得以凈化，往往是一個重要的有時甚至是關鍵的步驟。樣品供是一個重要的有時甚至是關鍵的步驟。樣品供試液凈化的方法通常有單一溶劑萃取法、分段試液凈化的方法通常有單一溶劑萃取法、分段萃取法、液液萃取法、固液萃取法。應根據供萃取法、液液萃取法、固液萃取法。應根據供試品的成分不同，選擇適當?shù)膬艋椒?。試品的成分不同，選擇適當?shù)膬艋椒ā?薄層色譜的點樣技術：點樣是薄層色譜的第薄層色譜的點樣技術：點樣是薄層色譜的第一步，也

32、是關鍵的一步，由于不良的點樣是測一步，也是關鍵的一步，由于不良的點樣是測定誤差的最主要的來源。定誤差的最主要的來源。 點樣應留意：點樣應留意：A A、常規(guī)薄層板上原點的直徑不大于、常規(guī)薄層板上原點的直徑不大于3mm3mm，高效，高效薄層板要求原點直徑不大于薄層板要求原點直徑不大于2mm2mm。 B B、點樣量不宜過大，最好控制在、點樣量不宜過大，最好控制在10l10l以下。以下。C C、如在一個位置反復多次點樣時，須留意盡量、如在一個位置反復多次點樣時，須留意盡量不將原點點成一個空心圈。不將原點點成一個空心圈。 D D、選用溶劑沸點不宜太高如正丁醇或太低、選用溶劑沸點不宜太高如正丁醇或太低如乙

33、醚。如乙醚。 吸附劑的活性與相對濕度的影響：吸附劑的活性與相對濕度的影響：A A、吸附劑的活性是由吸附劑的外表能和外表積決、吸附劑的活性是由吸附劑的外表能和外表積決議的。常用吸附劑如硅膠的硅醇基是親水性基團，議的。常用吸附劑如硅膠的硅醇基是親水性基團，很易吸附水分子而成為水合硅醇基而失去活性。故很易吸附水分子而成為水合硅醇基而失去活性。故自制的硅膠薄層板需在自制的硅膠薄層板需在105105110110加熱活化約加熱活化約3030分分鐘，就是使水合硅醇基脫水變?yōu)橛坞x硅醇基而活化鐘，就是使水合硅醇基脫水變?yōu)橛坞x硅醇基而活化。硅膠外表吸附水份的作用是可逆的。硅膠外表吸附水份的作用是可逆的。 B B、

34、在日常操作時，當活化后的硅膠薄層板從枯、在日常操作時，當活化后的硅膠薄層板從枯燥器中取出，自開場點樣到展開前，薄層板普燥器中取出，自開場點樣到展開前，薄層板普通是暴露在實驗室的大氣中，其活性取決于實通是暴露在實驗室的大氣中，其活性取決于實驗室環(huán)境的相對濕度。有些薄層色譜重現(xiàn)性差驗室環(huán)境的相對濕度。有些薄層色譜重現(xiàn)性差，在不同的相對濕度下點樣和展開即是主要緣，在不同的相對濕度下點樣和展開即是主要緣由之一。故實驗記錄中必需有展開時相對濕度由之一。故實驗記錄中必需有展開時相對濕度的記錄的記錄, ,應盡量做到鑒定一樣成分時在一樣相對應盡量做到鑒定一樣成分時在一樣相對濕度環(huán)境中進展。濕度環(huán)境中進展。溫度

35、的影響：溫度能影響被分別物質的溫度的影響：溫度能影響被分別物質的RfRf值值和物質的相互分別度以及斑點的分散等，目前和物質的相互分別度以及斑點的分散等，目前還沒有可以控制溫度的展開安裝，因此記錄展還沒有可以控制溫度的展開安裝，因此記錄展開時的溫度也是保證良好重現(xiàn)性的一個措施。開時的溫度也是保證良好重現(xiàn)性的一個措施。 對照品的選擇：對照品的選擇：對照品對照：用知中藥制劑某一藥材的某一有對照品對照：用知中藥制劑某一藥材的某一有效成分或特征成分對照品制成對照液，與樣品在效成分或特征成分對照品制成對照液，與樣品在同一條件下展開，比較在一樣位置上有無同一顏同一條件下展開，比較在一樣位置上有無同一顏色熒光

36、斑點，以此來檢測制劑中能否含有某色熒光斑點，以此來檢測制劑中能否含有某原料藥材。原料藥材。陰陽對照：采用陽性對照液只含需鑒別藥材陰陽對照：采用陽性對照液只含需鑒別藥材和陰性對照液不含需鑒別藥材進展對照鑒和陰性對照液不含需鑒別藥材進展對照鑒別。陽性對照液與陰性對照液均是按制劑供試品別。陽性對照液與陰性對照液均是按制劑供試品的方法制得，三者在同一條件下層析，察看樣品的方法制得，三者在同一條件下層析，察看樣品在同一位置上與陽性對照液有無一樣顏色斑點，在同一位置上與陽性對照液有無一樣顏色斑點，以決議樣品中有無該味藥的成分，并且察看陰性以決議樣品中有無該味藥的成分，并且察看陰性對照液中有無干擾，確定該鑒

37、別的專屬性。對照液中有無干擾，確定該鑒別的專屬性。采用對照藥材和對照品同時對照：為了準確采用對照藥材和對照品同時對照：為了準確檢驗出制劑投料的真實性，有時只需對照品無檢驗出制劑投料的真實性，有時只需對照品無法鑒別，需求添加原藥材的陽性對照液才可以法鑒別，需求添加原藥材的陽性對照液才可以。如鑒別同時含有黃連和黃柏的制劑，因二者。如鑒別同時含有黃連和黃柏的制劑，因二者都含有小檗堿，只用對照品無法區(qū)分。必需添都含有小檗堿，只用對照品無法區(qū)分。必需添加對照藥材，按規(guī)定條件展開，區(qū)分兩者。加對照藥材，按規(guī)定條件展開，區(qū)分兩者。三薄層掃描法：三薄層掃描法：1 1、原理：用一定波長的光照射在薄層板上，對、原

38、理：用一定波長的光照射在薄層板上，對薄層色譜中可吸收紫外線或可見光的斑點，或薄層色譜中可吸收紫外線或可見光的斑點，或經激發(fā)后能發(fā)射出熒光的斑點進展掃描，將掃經激發(fā)后能發(fā)射出熒光的斑點進展掃描，將掃描得到的圖譜用于中藥制劑的鑒別。描得到的圖譜用于中藥制劑的鑒別。2 2、操作方法：薄層板制備、操作方法：薄層板制備樣品液與對照液樣品液與對照液制備制備點樣點樣展開展開顯色顯色上機掃描上機掃描色譜峰確認。比薄層色譜法多了上機掃描色譜峰確認。比薄層色譜法多了上機掃描和色譜峰確認兩項。和色譜峰確認兩項。3 3、分類：有單波長掃描和雙波長掃描兩種。雙、分類：有單波長掃描和雙波長掃描兩種。雙波長最常用，是兩束不同波長的光，一束丈量波長最常用，是兩束不同波長的光，一束丈量樣品稱測定波長樣品稱測定波長SS；另一束作為對照，稱；另一束作為對照，稱參比波長參比波長RR。兩束光經過斬光器交替照射。兩束光經過斬光器交替照射到斑點上，以吸收峰峰面積之差到斑點上，以吸收峰峰面積之差AA測定。雙波測定。雙波長可以消除薄層不均勻的影響，使基線變得平長可以消除薄層不均勻的影響，使基線變得平穩(wěn)。測定波長普通選該測定組分的最大吸收波穩(wěn)。測定波長普通選該測定組分的最大吸收波長，參比波長可選在此組分無吸收的位置，可長，參比波長可選在此組分無吸收的位置，可