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文檔簡介
1、基因工程訓(xùn)練題1下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的敘述中正確的是 A用限制性核酸內(nèi)切酶切割一個DNA分子中部,獲得一個目的基因時,被水解的磷酸二酯鍵有2個B限制性核酸內(nèi)切酶識別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大C-CATG-和-GGATCC-序列被限制酶切出的粘性末端堿基數(shù)不同D只有用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒,才能形成重組質(zhì)粒2.如圖是利用基因工程培育抗蟲植物的示意圖。 以下相關(guān)敘述,正確的是 ()的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和 聚合酶參與侵染植物細(xì)胞后,重組 質(zhì)粒整合到的染色體上的染色體上若含抗蟲基因,則就表現(xiàn)出抗蟲性狀只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異3下
2、圖1表示含有目的基因的DNA片段和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列。現(xiàn)有Msp 、BamH 、Mbo 、Sma 4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。下列敘述正確的是A上述4種限制性核酸內(nèi)切酶中BamH 、Mbo 切出的粘性末端不相同BBamH 、Mbo 酶切DNA后加DNA連接酶重新拼接,都能被Mbo 再次切割CMsp 、Sma 切出的兩個末端可以用DNA連接酶相互連接D作為載體的質(zhì)粒上,原本一定就有抗生素A抗性基因4下圖甲表示大腸桿菌質(zhì)粒,圖乙表示外源DNA,實線箭頭表示限制性核酸內(nèi)切酶Pst的切割位點,Ampr
3、表示氨芐青霉素抗性基因,Ner表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是A圖甲中的質(zhì)粒通常還具有控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的基因B用Pst處理圖乙所示的DNA片段后,導(dǎo)致2個磷酸二酯鍵斷裂即可獲得目的基因C用Pst酶切,加入DNA連接酶后得到的質(zhì)粒-目的基因連接物都是符合要求的D導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在含新霉素或氨芐青霉素的培養(yǎng)基中均不能生長5.下列關(guān)于基因工程的說法正確的是A基因工程的核心是將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞中B利用受體細(xì)胞克隆出大量的目的基因也屬于基因工程的范疇CDNA連接酶的作用是將2個DNA分子片段的互補堿基連接起來D構(gòu)建重組DNA的質(zhì)粒上有四環(huán)素的抗性基因,若受體細(xì)胞能在有四環(huán)素的培養(yǎng)基
4、中生長,說明該受體細(xì)胞中一定含有目的基因6已知限制性內(nèi)切酶Xma和Sma的識別序列分別為CCCGGG和CCCGGG。有關(guān)這兩種酶及應(yīng)用的敘述,錯誤的是A這兩種酶作用的底物都是雙鏈DNA BDNA中出現(xiàn)這兩種酶識別序列的幾率不同CXma切割DNA形成的黏性末端是-GGCCD使用這兩種酶時需注意控制反應(yīng)溫度、時間等7將乙肝抗原基因?qū)说浇湍妇?,通過發(fā)酵能大量生產(chǎn)乙肝疫苗。下列敘述正確的是 A目的基因在酵母菌中表達(dá)出抗體 B目的基因的表達(dá)需要線粒體提供能量 C用限制性核酸內(nèi)切酶處理目的基因 D目的基因轉(zhuǎn)錄后即可用于翻譯神經(jīng)細(xì)胞、肝細(xì)胞等小鼠皮膚細(xì)胞導(dǎo)入誘導(dǎo)基因誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞8下圖表示科學(xué)家利用小
5、鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)出多種細(xì)胞的過程。下列敘述正確的是A過程中細(xì)胞內(nèi)發(fā)生了基因突變 B過程中細(xì)胞內(nèi)某些基因處于關(guān)閉狀態(tài)C過程中細(xì)胞內(nèi)核酸的種類和數(shù)目不變 D誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞中沒有同源染色體10對下圖所示粘性末端的說法錯誤的是A甲、乙、丙粘性末端是由各自不同的限制性核酸內(nèi)切酶催化產(chǎn)生的B甲、乙具相同的粘性末端可形成重組DNA分子,但甲、丙之間不能CDNA連接酶作用位點在b處,催化磷酸基團和脫氧核糖之間形成化學(xué)鍵D切割甲的限制性核酸內(nèi)切酶不能識別由甲、乙片段形成的重組DNA分子11下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因),其中。表示相關(guān)的操作步驟,甲、乙表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。Ps
6、t I酶和Sma I酶切割基因后將產(chǎn)生不同的粘性末端。據(jù)圖分析下列說法錯誤的是A圖中甲代表的是基因表達(dá)載體,乙可代表番茄細(xì)胞B可用Pst I酶和Sma I酶切割魚的抗凍蛋白基因以避免目的基因末端發(fā)生任意連接C若用Pst I酶和Sma I酶切割質(zhì)粒產(chǎn)生的DNA片段有3種D圖中、依次表示組織培養(yǎng)過程中番茄組織細(xì)胞的脫分化和再分化過程12某線性DNA分子含有5000個堿基對(bp),分別用限制性核酸內(nèi)切酶和酶完全切割后,得到的DNA片段大小如下表。限制性核酸內(nèi)切酶和酶的識別序列和切割位點如下圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是酶切割產(chǎn)物(bp)酶切割產(chǎn)物(bp)2100、1400、15001900、200、
7、700、500A該DNA分子經(jīng)過酶作用后產(chǎn)生4個游離的磷酸基團B該DNA分子含有能同時被酶和酶切割的位點C該DNA分子中酶的識別堿基序列有3個D酶和酶切出的DNA片段不能相互連接13. 科學(xué)家將人的生長激素原基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。但在進行基因工程的操作過程中,需使用特定的限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選。已知限制性核酸內(nèi)切酶I的識別序列和切點是GGATCC ,限制性核酸內(nèi)切酶II的識別序列和切點是GATC,據(jù)圖回答:(1)過程表示的是采取_的方法來獲取目的基因。(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中,應(yīng)用限制性核酸內(nèi)切酶 (、)切割質(zhì)粒,用
8、限制性核酸內(nèi)切酶 (、)切割目的基因。用限制酶切割目的基因和運載體后形成的黏性末端通過_ 原則進行連接。人的基因之所以能與大腸桿菌的DNA分子進行重組,原因是 。(3)在過程一般將受體大腸桿菌用_處理,以增大的通透性,使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進入受體細(xì)胞。()人體的生長激素原基因能在細(xì)菌體內(nèi)成功表達(dá)出人的生長激素原是因為 。 寫出目的基因?qū)爰?xì)菌中表達(dá)的過程 。(5)將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上倒置培養(yǎng),將平板倒置的意義是_。培養(yǎng)后得到如下圖a的結(jié)果(黑點表示菌落),能夠生長的細(xì)菌中已導(dǎo)入了 ,反之則沒有導(dǎo)入;再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基a上,使絨布表面沾上菌落,然后將絨
9、布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖b的結(jié)果(空圈表示與a對照無菌落的位置)。與圖b空圈相對應(yīng)的圖a中的菌落表現(xiàn)型是 ,這些細(xì)菌中導(dǎo)入了_。14纖維素分子不能進入酵母細(xì)胞。 為了使酵母菌能夠利用環(huán)境中的纖維素為原料生產(chǎn)酒精,構(gòu)建了含 種不同基因片段的重組質(zhì)粒。 下面是酵母菌轉(zhuǎn)化及纖維素酶在工程菌內(nèi)合成與運輸?shù)氖疽鈭D。據(jù)圖回答:()本研究構(gòu)建重組質(zhì)粒時可選用四種限制酶,其識別序列如下圖。 為防止酶切片段的自身連接,可選用的限制酶組合是 或 。 ()設(shè)置菌株為對照,是為了驗證_不攜帶纖維素酶基因。()纖維素酶基因的表達(dá)包括 和 過程。 與菌株相比,在菌株、中參與纖維素酶合成和分泌的細(xì)胞器還有。(
10、)在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上分別培養(yǎng)菌株、,菌株 不能存活,原因是 。()酵母菌生成酒精的細(xì)胞部位是 ,產(chǎn)生酒精時細(xì)胞的呼吸方式是 。 在利用纖維素生產(chǎn)酒精時,菌株更具優(yōu)勢,因為導(dǎo)入的重組質(zhì)粒含有 ,使分泌的纖維素酶固定于細(xì)胞壁,減少因培養(yǎng)液更新而造成的酶的流失,提高酶的利用率。15.將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中,可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉,其過程如下圖所示(注:農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)拉上只有TDNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中)。(1)過程需用同種酶對含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進行酶切。為將過程獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來,應(yīng)使用培養(yǎng)基。(2)過程中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨
11、在讓進入棉花細(xì)胞;除盡農(nóng)桿菌后,還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),目的是。(3)若過程僅獲得大量的根,則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加以獲得芽;部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽也能長根,原因是。(4)檢驗轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀,常用方法是。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少的使用,以減輕環(huán)境污染。16. 浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn),一種植物激素油菜素內(nèi)酯能促進農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。 用油菜素內(nèi)酯處理后,許多參與農(nóng)藥降解的基因(如450基因和紅霉素抗性基因)表達(dá)和酶活性都得到提高,在這些基因“指導(dǎo)”下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無毒物質(zhì),有的則被直接排出體外。某課題組進一步進行了如下
12、的實驗操作,請回答下列問題。 ()獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法有、。步驟用技術(shù)擴增基因時用到的耐高溫酶通常是指;步驟用到的酶有 。()圖中導(dǎo)入重組質(zhì)粒的方法是 ,在導(dǎo)入之前應(yīng)用處理受體細(xì)菌。()導(dǎo)入重組質(zhì)粒以后,往往還需要進行檢測和篩選,可用制成探針,檢測是否導(dǎo)入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。()請你為該課題命名: 。(5)請你說說該研究發(fā)現(xiàn)的生態(tài)學(xué)意義。 。1-5:BDBAB 6-10:BBBCC 11C 12A13(1) 反轉(zhuǎn)錄法(人工合成法)(2) ; 堿基互補配對 人的基因與大腸桿菌DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)相同(3)CaCl2 細(xì)胞壁(4)共用一套(遺傳)密碼子 生長激素基因轉(zhuǎn)錄翻譯生長激素(5)防止皿蓋冷卻水倒流入培養(yǎng)基(合理即可得分); 普通質(zhì)?;蛑亟M質(zhì)粒(缺一不給分) 普通質(zhì)?;蛑亟M質(zhì)粒 抗氨芐青霉素、不抗四環(huán)素 重組質(zhì)粒14()(或 )(或 )()質(zhì)粒 和酵母菌基因組()轉(zhuǎn)錄翻譯內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體()缺少信號肽編碼序列
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