2011化學(xué)藥物結(jié)構(gòu)確證研究的技術(shù)要求與案例分析ppt課件

1、化學(xué)藥物結(jié)構(gòu)確證研究的技術(shù)要求化學(xué)藥物結(jié)構(gòu)確證研究的技術(shù)要求與案例分析與案例分析 nn王玉成王玉成n中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所醫(yī)藥生物技術(shù)研究所1目錄o(一一) 結(jié)構(gòu)確證研究的一般原則和要求結(jié)構(gòu)確證研究的一般原則和要求o(二二) 對(duì)不同類(lèi)別藥品結(jié)構(gòu)確證的要求對(duì)不同類(lèi)別藥品結(jié)構(gòu)確證的要求o(三三) 對(duì)特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)藥品結(jié)構(gòu)確證的要求對(duì)特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)藥品結(jié)構(gòu)確證的要求o(四四) 各項(xiàng)波譜和測(cè)試的技術(shù)要求各項(xiàng)波譜和測(cè)試的技術(shù)要求(案例案例)2 1. 結(jié)構(gòu)確證研究的主要對(duì)象結(jié)構(gòu)確證研究的主要對(duì)象 2. 結(jié)構(gòu)確證研究的基本方法結(jié)構(gòu)確證研究的基本方法 3. 結(jié)構(gòu)確證研究的主要內(nèi)容結(jié)構(gòu)確證研

2、究的主要內(nèi)容 4. 結(jié)構(gòu)確證研究的一般要求結(jié)構(gòu)確證研究的一般要求(一一) 結(jié)構(gòu)確證研究的一般原則結(jié)構(gòu)確證研究的一般原則和要求和要求31. 結(jié)構(gòu)確證研究的主要對(duì)象結(jié)構(gòu)確證研究的主要對(duì)象 經(jīng)化學(xué)全合成或半合成、微生物發(fā)經(jīng)化學(xué)全合成或半合成、微生物發(fā)酵以及從動(dòng)、植物中提取的原料藥酵以及從動(dòng)、植物中提取的原料藥,包括包括新藥、進(jìn)口藥和已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的藥品新藥、進(jìn)口藥和已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的藥品.4n按來(lái)源：按來(lái)源： 化學(xué)合成、半合成、天然產(chǎn)物中提取、發(fā)酵等化學(xué)合成、半合成、天然產(chǎn)物中提取、發(fā)酵等;n按組分：按組分： 單一組分、多組分混合物單一組分、多組分混合物;n按分子量：按分子量： 小分子化合物、大分子化合物

3、小分子化合物、大分子化合物;n按結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：按結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： 成鹽化合物和非成鹽化合物、手性化合物和非手性化合物、含結(jié)成鹽化合物和非成鹽化合物、手性化合物和非手性化合物、含結(jié)晶水晶水/溶劑和不含結(jié)晶水溶劑和不含結(jié)晶水/溶劑等溶劑等;52.2.結(jié)構(gòu)確證研究的基本方法結(jié)構(gòu)確證研究的基本方法 化學(xué)方法：理化分析、元素分析、化學(xué)關(guān)聯(lián)等化學(xué)方法：理化分析、元素分析、化學(xué)關(guān)聯(lián)等 物理方法：波譜方法、衍射技術(shù)物理方法：波譜方法、衍射技術(shù) a. a. 射頻波、微波與物質(zhì)的相互作用：核磁共振、電子順磁共振等射頻波、微波與物質(zhì)的相互作用：核磁共振、電子順磁共振等(ESP(ESP根據(jù)譜圖中吸收峰的位置、譜線的積分強(qiáng)度、譜

4、線的寬度及超精細(xì)結(jié)構(gòu)等信息可以鑒定自由基和過(guò)濾金屬離子等順磁粒子根據(jù)譜圖中吸收峰的位置、譜線的積分強(qiáng)度、譜線的寬度及超精細(xì)結(jié)構(gòu)等信息可以鑒定自由基和過(guò)濾金屬離子等順磁粒子的結(jié)構(gòu)狀態(tài)，檢測(cè)它們的濃度（可檢測(cè)到的結(jié)構(gòu)狀態(tài)，檢測(cè)它們的濃度（可檢測(cè)到10-14摩摩/升）。升）。) ) b. b. 紅外、可見(jiàn)、紫外光與物質(zhì)的相互作用：紅外光譜、紫外光譜、拉曼光紅外、可見(jiàn)、紫外光與物質(zhì)的相互作用：紅外光譜、紫外光譜、拉曼光譜等譜等 c. Xc. X射線與物質(zhì)的相互作用：射線與物質(zhì)的相互作用：X X射線衍射等射線衍射等 d. d. 電子與物質(zhì)的相互作用：質(zhì)譜、電鏡等電子與物質(zhì)的相互作用：質(zhì)譜、電鏡等 e.

5、e. 其他：熱分析、原子吸收、原子發(fā)射等其他：熱分析、原子吸收、原子發(fā)射等63.3.結(jié)構(gòu)確證研究的主要內(nèi)容結(jié)構(gòu)確證研究的主要內(nèi)容 骨架（平面）結(jié)構(gòu)：骨架（平面）結(jié)構(gòu)： 分子中各原子之間的連接順序和方式分子中各原子之間的連接順序和方式; ; 構(gòu)型：構(gòu)型： 分子中各原子之間的空間相對(duì)位置分子中各原子之間的空間相對(duì)位置; ; 結(jié)晶水結(jié)晶水/ /結(jié)晶溶劑：結(jié)晶溶劑： 與水、有機(jī)溶劑通過(guò)氫鍵等結(jié)合與水、有機(jī)溶劑通過(guò)氫鍵等結(jié)合; ; 晶型：晶型： 分子（或原子）在晶體中的排列方式分子（或原子）在晶體中的排列方式; ;7骨架（平面）結(jié)構(gòu)骨架（平面）結(jié)構(gòu) 例：氟嗎西尼例：氟嗎西尼 8骨架（平面）結(jié)構(gòu)的研究方法

6、骨架（平面）結(jié)構(gòu)的研究方法: : a. a. 單晶單晶X X射線衍射射線衍射; ; b. b. 常規(guī)方法，如元素分析（或高分辨質(zhì)常規(guī)方法，如元素分析（或高分辨質(zhì)譜）、譜）、UVUV、IRIR、NMRNMR（包括二維譜）、（包括二維譜）、MSMS等組合等組合; ; 應(yīng)根據(jù)化合物骨架結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)及其復(fù)雜應(yīng)根據(jù)化合物骨架結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)及其復(fù)雜程度、有無(wú)對(duì)照品及參考文獻(xiàn)，合理選用程度、有無(wú)對(duì)照品及參考文獻(xiàn)，合理選用測(cè)試項(xiàng)目。測(cè)試項(xiàng)目。9 構(gòu)構(gòu) 型：型： 幾何構(gòu)型幾何構(gòu)型: 雙鍵、環(huán)狀化合物，常用順?lè)矗p鍵、環(huán)狀化合物，常用順?lè)矗╟istrans）或）或ZE表示表示 例：西尼地平例：西尼地平 （）-3-（2-

7、甲氧基乙基）甲氧基乙基）-5-3-苯基苯基-2（E）-丙烯基丙烯基-2,6-二甲基二甲基-4-（3-硝基苯基）硝基苯基）-1,4-二氫二氫- 3,5-吡啶吡啶二甲酸酯二甲酸酯 NHCH3H3CNO2OOOH3COO10 例：拉米夫定例：拉米夫定 (2R-(2R-順式順式)-4-)-4-氨基氨基-1-(2-1-(2-羥甲基羥甲基-1-1，3-3-氧硫雜環(huán)戊氧硫雜環(huán)戊-5-5-基基)-1H-)-1H-嘧啶嘧啶- -2-2-酮酮NNONH2OSHO11幾何構(gòu)型的研究幾何構(gòu)型的研究： 理化性質(zhì)差別明顯理化性質(zhì)差別明顯 a. 理化常數(shù)，例如熔點(diǎn)等理化常數(shù)，例如熔點(diǎn)等; b. 氫譜、碳譜氫譜、碳譜; c.

8、 紅外光譜、紫外光譜等紅外光譜、紫外光譜等;12光學(xué)異構(gòu)：由于分子的不對(duì)稱(chēng)性引起，光學(xué)異構(gòu)：由于分子的不對(duì)稱(chēng)性引起，常用常用D- L或或R-S表示。表示。 例：例：那格列奈那格列奈 （）（）N-N-（反（反-4-4-異丙基環(huán)基甲酰基）異丙基環(huán)基甲?；?D-D-苯苯丙氨酸丙氨酸CH3H3CONCH2HHCOOH13 例：前列腺素例：前列腺素E1E1（1R1R，2R2R，3R3R）-3-3-羥基羥基-2-2-（E E）- -（3S3S）-3-3-羥基羥基-1-1-辛烯基辛烯基-5-5-氧代環(huán)戊烷庚酸氧代環(huán)戊烷庚酸14光學(xué)異構(gòu)的研究：光學(xué)異構(gòu)的研究： a. 比旋度測(cè)定比旋度測(cè)定 b. 手性柱色譜（

9、手性柱色譜（HPLC、GC） c. 核磁共振（核磁共振（NMR） d. 單晶單晶X射線衍射（射線衍射（SXRD） e. 旋光光譜（旋光光譜（ORD）(1. 決定化合物之絕對(duì)立體構(gòu)造。決定化合物之絕對(duì)立體構(gòu)造。 2. 決定蛋白質(zhì)決定蛋白質(zhì)2級(jí)與級(jí)與3級(jí)構(gòu)造。級(jí)構(gòu)造。 ) f. 圓二色譜（圓二色譜（CD）15 g. 其他方法其他方法 對(duì)照品法對(duì)照品法根據(jù)對(duì)照品的構(gòu)型推定根據(jù)對(duì)照品的構(gòu)型推定 化學(xué)關(guān)聯(lián)法化學(xué)關(guān)聯(lián)法利用合成工藝分析利用合成工藝分析 例如，例如， 左旋西替利嗪的構(gòu)型確證：左旋西替利嗪的構(gòu)型確證： 手性柱色譜定位（與對(duì)照品對(duì)比手性柱色譜定位（與對(duì)照品對(duì)比) )、 比旋度數(shù)據(jù)、比旋度數(shù)據(jù)、光

10、學(xué)純度分析光學(xué)純度分析16晶型的研究晶型的研究: : 晶型晶型 是化合物一個(gè)重要特性;對(duì)于多晶型藥物,因晶格結(jié)構(gòu)不同,某些理化性質(zhì)(如熔點(diǎn)、溶解度、穩(wěn)定性)可能不同;而且在不同條件下,同一化合物的各晶型之間可能會(huì)發(fā)生相互轉(zhuǎn)化。對(duì)于難溶性固體口服制劑,其原料藥晶型可能影響藥物的溶解度、穩(wěn)定性、藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)進(jìn)而可能影響藥效。所以對(duì)于已有文獻(xiàn)報(bào)道的多晶型化合物應(yīng)明確其晶型,晶型的一致性;對(duì)于創(chuàng)新藥也應(yīng)注意積累相關(guān)研究資料觀察有無(wú)多晶型現(xiàn)象。17晶型的研究晶型的研究: : a. a. 粉末粉末X-X-射線衍射法射線衍射法 b. b. 紅外光譜法、拉曼光譜法紅外光譜法、拉曼光譜法 c. c. 熔點(diǎn)法熔

11、點(diǎn)法 d. d. 熱分析熱分析 e. e. 光學(xué)顯微鏡法光學(xué)顯微鏡法 18無(wú)對(duì)照品和文獻(xiàn)報(bào)道：無(wú)對(duì)照品和文獻(xiàn)報(bào)道： 考察不同結(jié)晶條件下（溶劑、溫度、結(jié)晶速率等）制備樣品的熔點(diǎn)、紅考察不同結(jié)晶條件下（溶劑、溫度、結(jié)晶速率等）制備樣品的熔點(diǎn)、紅外光譜、粉末外光譜、粉末X X射線衍射等射線衍射等; ; 有對(duì)照品有對(duì)照品: : 對(duì)比自制藥物與已上市藥物的熔點(diǎn)、紅外光譜圖、粉末對(duì)比自制藥物與已上市藥物的熔點(diǎn)、紅外光譜圖、粉末X X射線衍射射線衍射圖譜等圖譜等; ; 有文獻(xiàn)報(bào)道有文獻(xiàn)報(bào)道: : 對(duì)文獻(xiàn)資料進(jìn)行分析，選取能夠準(zhǔn)確反映產(chǎn)品晶型的測(cè)試項(xiàng)目對(duì)文獻(xiàn)資料進(jìn)行分析，選取能夠準(zhǔn)確反映產(chǎn)品晶型的測(cè)試項(xiàng)目;

12、;19結(jié)晶水結(jié)晶水/ /結(jié)晶溶劑的研究結(jié)晶溶劑的研究: : 藥物分子通過(guò)氫鍵等和水、有機(jī)溶劑結(jié)合形成水合物/溶劑化物,含有不同數(shù)量結(jié)晶水/結(jié)晶溶劑的化合物可能具有不同的物理性質(zhì),進(jìn)而可能影響藥物的生物利用度,因此對(duì)于原料藥應(yīng)明確其所含的結(jié)晶水/溶劑的情況。20結(jié)晶水結(jié)晶水/ /結(jié)晶溶劑的研究結(jié)晶溶劑的研究: : a. a.元素分析元素分析 b.b.熱分析熱分析 c.c.干燥失重、水分檢查干燥失重、水分檢查 d.d.單晶單晶X-X-射線衍射射線衍射21 創(chuàng)新藥：創(chuàng)新藥： 在干燥失重、水分測(cè)定研究的基礎(chǔ)上，通過(guò)熱分析、元素分在干燥失重、水分測(cè)定研究的基礎(chǔ)上，通過(guò)熱分析、元素分析等確證樣品分子中結(jié)晶

13、水析等確證樣品分子中結(jié)晶水/ /結(jié)晶溶劑的數(shù)量結(jié)晶溶劑的數(shù)量; ; 已上市的藥品：已上市的藥品： 采取合適的分析方法對(duì)樣品進(jìn)行分析，以確證其結(jié)晶水采取合適的分析方法對(duì)樣品進(jìn)行分析，以確證其結(jié)晶水/ /結(jié)結(jié)晶溶劑的情況與已上市產(chǎn)品一致晶溶劑的情況與已上市產(chǎn)品一致; ;22小結(jié)： 在審評(píng)過(guò)程中專(zhuān)家評(píng)價(jià)的關(guān)注點(diǎn)一般包括:結(jié)構(gòu)確證方案設(shè)計(jì)的合理性,是否對(duì)化合物所有要素進(jìn)行了考慮;研究?jī)?nèi)容設(shè)置的全面性,所有的結(jié)構(gòu)特征是否已被確證;分析方法選擇的正確性,所用方法能否針對(duì)性地解決結(jié)構(gòu)問(wèn)題。 研發(fā)者在進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證研究時(shí),測(cè)試項(xiàng)目的選擇要依據(jù)化合物結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、需要解決的結(jié)構(gòu)問(wèn)題、各種方法所能解決的結(jié)構(gòu)問(wèn)題等綜合考

14、慮。23 對(duì)測(cè)試樣品和對(duì)照樣品的要求：對(duì)測(cè)試樣品和對(duì)照樣品的要求：測(cè)試樣品測(cè)試樣品: a. 精制方法精制方法 測(cè)試樣品要采用和原料藥制備工藝中相同的精制方法、工藝條件進(jìn)行精制；對(duì)于進(jìn)行晶型分析、結(jié)晶水/結(jié)晶溶劑分析時(shí)尤其需要注意，因?yàn)椴煌木品椒ê凸に嚄l件可能產(chǎn)生不同的晶型、結(jié)晶水/溶劑。 b. 純度要求純度要求 大于99.0%，雜質(zhì)含量應(yīng)小于0.5%； 對(duì)于手性藥物，應(yīng)增加對(duì)對(duì)映體、非對(duì)映體純度要求，一般 不低于99.5%。24n注意點(diǎn)：n仿制藥物：相關(guān)物質(zhì)大于或等于0.1%，要進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證（注意響應(yīng)因子）n創(chuàng)新藥物：除了與仿制藥物一樣之外，盡可能多的羅列所有可能雜質(zhì)，要與中間體關(guān)聯(lián)，特別

15、注意手性問(wèn)題！25 對(duì)照品對(duì)照品: a. 合法來(lái)源證明合法來(lái)源證明 購(gòu)得的標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)得的標(biāo)準(zhǔn)品(已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的藥品已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的藥品) 市售原料藥市售原料藥 市售制劑中提取得到的原料藥市售制劑中提取得到的原料藥 從正規(guī)試劑公司購(gòu)得的試劑等從正規(guī)試劑公司購(gòu)得的試劑等（有的申報(bào)資料中，未選擇上市原料藥或其他合法對(duì)照品，而是采用自己?jiǎn)挝痪频漠a(chǎn)品，這種“自身”對(duì)照的數(shù)據(jù)和圖譜對(duì)于結(jié)構(gòu)確證沒(méi)有任何幫助。 ） 26 b. 精制方法：精制方法： 對(duì)于用于晶型、結(jié)晶水等信息確證的對(duì)照品，不應(yīng)采用處理后原料藥或制劑中提取物作為對(duì)照品，因?yàn)樵纤幒椭苿┰诓煌苊教幚砗螅瑫?huì)對(duì)樣品真實(shí)的晶型和結(jié)晶水產(chǎn)生影響，造成誤判

16、。 c. 純度檢查：純度檢查： 對(duì)照品的純度檢查：申報(bào)資料中應(yīng)提供對(duì)照品的純度檢查結(jié)果。一般來(lái)說(shuō)，對(duì)照品純度應(yīng)不低于精制品純度，以保證對(duì)照品對(duì)藥物結(jié)構(gòu)確證的支持力度。274. 結(jié)構(gòu)確證研究的一般要求結(jié)構(gòu)確證研究的一般要求28.對(duì)圖譜、數(shù)據(jù)的要求對(duì)圖譜、數(shù)據(jù)的要求 附圖應(yīng)為原圖的復(fù)印件或照片附圖應(yīng)為原圖的復(fù)印件或照片; 圖譜圖譜及圖譜上的標(biāo)記、數(shù)據(jù)應(yīng)清晰，并有完整及圖譜上的標(biāo)記、數(shù)據(jù)應(yīng)清晰，并有完整的檢測(cè)日期、各項(xiàng)參數(shù)、測(cè)試條件、儀器的檢測(cè)日期、各項(xiàng)參數(shù)、測(cè)試條件、儀器型號(hào)及樣品編號(hào)等記錄。型號(hào)及樣品編號(hào)等記錄。 各項(xiàng)檢測(cè)數(shù)據(jù)應(yīng)按規(guī)定列表說(shuō)明，注各項(xiàng)檢測(cè)數(shù)據(jù)應(yīng)按規(guī)定列表說(shuō)明，注明其順序。有對(duì)照品

17、的應(yīng)將測(cè)試品和對(duì)照明其順序。有對(duì)照品的應(yīng)將測(cè)試品和對(duì)照品同一波譜的數(shù)據(jù)在一個(gè)表中對(duì)比列出。品同一波譜的數(shù)據(jù)在一個(gè)表中對(duì)比列出。如有可作參照的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，也可列在同一如有可作參照的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)，也可列在同一表中。質(zhì)譜應(yīng)附離子裂解圖。表中。質(zhì)譜應(yīng)附離子裂解圖。29(二二) 對(duì)不同類(lèi)別藥品結(jié)構(gòu)確證的要求對(duì)不同類(lèi)別藥品結(jié)構(gòu)確證的要求n未知結(jié)構(gòu)的化合物：推論結(jié)構(gòu)n已知結(jié)構(gòu)的化合物：驗(yàn)證結(jié)構(gòu)30 未在國(guó)內(nèi)外上市銷(xiāo)售的原料藥未在國(guó)內(nèi)外上市銷(xiāo)售的原料藥 按全新化學(xué)單體要求：推論結(jié)按全新化學(xué)單體要求：推論結(jié)構(gòu)構(gòu) a.完成必要的各項(xiàng)測(cè)試完成必要的各項(xiàng)測(cè)試; b.應(yīng)提供充分的試驗(yàn)圖譜和數(shù)應(yīng)提供充分的試驗(yàn)圖譜和數(shù)據(jù)據(jù); c

18、. 按新化合物要求進(jìn)行圖譜解按新化合物要求進(jìn)行圖譜解析和綜合解析析和綜合解析; 如有參考文獻(xiàn)資料，可提供如有參考文獻(xiàn)資料，可提供作參考。作參考。31 已在國(guó)外上市銷(xiāo)售但尚未在國(guó)內(nèi)已在國(guó)外上市銷(xiāo)售但尚未在國(guó)內(nèi)銷(xiāo)售的原料藥或已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的原料銷(xiāo)售的原料藥或已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的原料藥藥 按已知化學(xué)結(jié)構(gòu)的藥物：驗(yàn)證結(jié)構(gòu)按已知化學(xué)結(jié)構(gòu)的藥物：驗(yàn)證結(jié)構(gòu) 可以使用對(duì)照品可以使用對(duì)照品 可以參考文獻(xiàn)可以參考文獻(xiàn) 32 a. 有合格對(duì)照品的化合物：有合格對(duì)照品的化合物： 提供測(cè)試樣品和對(duì)照品在完全相同提供測(cè)試樣品和對(duì)照品在完全相同條件和同一儀器上測(cè)得的各項(xiàng)圖譜和數(shù)據(jù)，條件和同一儀器上測(cè)得的各項(xiàng)圖譜和數(shù)據(jù)，完成所需的各

19、項(xiàng)目測(cè)試，若二者完全相同，完成所需的各項(xiàng)目測(cè)試，若二者完全相同，并對(duì)重要的波譜訊號(hào)和測(cè)試數(shù)據(jù)進(jìn)行了正并對(duì)重要的波譜訊號(hào)和測(cè)試數(shù)據(jù)進(jìn)行了正確解析，即可得出二者化學(xué)結(jié)構(gòu)一致的結(jié)確解析，即可得出二者化學(xué)結(jié)構(gòu)一致的結(jié)論。論。 33 b. 有詳細(xì)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的化合物：有詳細(xì)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的化合物： 可對(duì)結(jié)構(gòu)確證研究的內(nèi)容、方法提供線索，并為可對(duì)結(jié)構(gòu)確證研究的內(nèi)容、方法提供線索，并為解析提供參考，但是不能作為結(jié)構(gòu)確證研究的充分證解析提供參考，但是不能作為結(jié)構(gòu)確證研究的充分證據(jù)，仍需要進(jìn)行較為詳盡的圖譜解析和綜合解析。據(jù)，仍需要進(jìn)行較為詳盡的圖譜解析和綜合解析。 34 c. 無(wú)對(duì)照品和文獻(xiàn)數(shù)據(jù)的化合物：無(wú)對(duì)照品和文獻(xiàn)

20、數(shù)據(jù)的化合物： 除了目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)外，缺乏其他支持性資除了目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)外，缺乏其他支持性資料，因此原則上應(yīng)按全新化學(xué)單體要求進(jìn)行全面的料，因此原則上應(yīng)按全新化學(xué)單體要求進(jìn)行全面的研究，提供充分的試驗(yàn)圖譜和數(shù)據(jù)，可結(jié)合其它研研究，提供充分的試驗(yàn)圖譜和數(shù)據(jù)，可結(jié)合其它研究工作（例如合成工藝路線的確定）以進(jìn)一步推論究工作（例如合成工藝路線的確定）以進(jìn)一步推論化合物的結(jié)構(gòu)?；衔锏慕Y(jié)構(gòu)。35(三三) 對(duì)特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)藥品結(jié)構(gòu)確證的對(duì)特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)藥品結(jié)構(gòu)確證的要求要求 36.1. 立體異構(gòu)體藥物立體異構(gòu)體藥物 立體異構(gòu)體：立體異構(gòu)體： 光學(xué)異構(gòu)體光學(xué)異構(gòu)體 a. a. 對(duì)映異構(gòu)體對(duì)映異構(gòu)體 b. b

21、. 非對(duì)映異構(gòu)體非對(duì)映異構(gòu)體 幾何異構(gòu)體（順、反異構(gòu)體）幾何異構(gòu)體（順、反異構(gòu)體）37 手性藥物手性藥物-絕對(duì)構(gòu)型和相對(duì)構(gòu)型絕對(duì)構(gòu)型和相對(duì)構(gòu)型 a. 單一對(duì)映體單一對(duì)映體-絕對(duì)構(gòu)型絕對(duì)構(gòu)型 比旋度測(cè)定比旋度測(cè)定 手性柱色譜手性柱色譜 (手性手性HPLC和和GC) 核磁共振核磁共振 單晶單晶X-衍射衍射 圓二色譜圓二色譜 旋光光譜旋光光譜38 b. 消旋體消旋體-有多個(gè)手性中心時(shí)要求有多個(gè)手性中心時(shí)要求確定相對(duì)構(gòu)型確定相對(duì)構(gòu)型; c. 立體異構(gòu)混合物立體異構(gòu)混合物-確定異構(gòu)體的確定異構(gòu)體的組成和比例組成和比例;39“手性藥物申報(bào)資料及審評(píng)要點(diǎn)手性藥物申報(bào)資料及審評(píng)要點(diǎn)” (藥審中心藥審中心) 應(yīng)

22、注意確證產(chǎn)品的立體構(gòu)型。可根應(yīng)注意確證產(chǎn)品的立體構(gòu)型。可根據(jù)手性中心的多少、文獻(xiàn)數(shù)據(jù)是否充足、據(jù)手性中心的多少、文獻(xiàn)數(shù)據(jù)是否充足、對(duì)照品的有無(wú)來(lái)選擇合適的確證的方法，對(duì)照品的有無(wú)來(lái)選擇合適的確證的方法，必要時(shí)可采用單晶必要時(shí)可采用單晶X射線衍射進(jìn)行確證。射線衍射進(jìn)行確證。 比旋度是必須的檢測(cè)項(xiàng)目之一，已知比旋度是必須的檢測(cè)項(xiàng)目之一，已知的起始原料的構(gòu)型和化學(xué)合成方法的立的起始原料的構(gòu)型和化學(xué)合成方法的立體選擇性也可作為依據(jù)之一。體選擇性也可作為依據(jù)之一。402. 具有多晶型的藥物具有多晶型的藥物 晶型晶型: 是指結(jié)晶物質(zhì)晶格內(nèi)分子的排列形式。是指結(jié)晶物質(zhì)晶格內(nèi)分子的排列形式。 多晶型物質(zhì)晶格內(nèi)

23、部分子間力的差異可多晶型物質(zhì)晶格內(nèi)部分子間力的差異可能引起藥物各種理化性質(zhì)的變化，能引起藥物各種理化性質(zhì)的變化， 主要主要對(duì)熔點(diǎn)、溶解度及溶出速率、穩(wěn)定性、對(duì)熔點(diǎn)、溶解度及溶出速率、穩(wěn)定性、有效性的影響有效性的影響。41 重點(diǎn)：重點(diǎn)： 以適宜的方法獲得藥物晶型的數(shù)據(jù)。以適宜的方法獲得藥物晶型的數(shù)據(jù)。 常用方法：常用方法： 粉末粉末X-衍射法衍射法 紅外吸收光譜法紅外吸收光譜法 熔點(diǎn)熔點(diǎn) 熱分析熱分析 光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡42 創(chuàng)新藥物創(chuàng)新藥物 a. 不同結(jié)晶條件下（溶劑、溫度、結(jié)不同結(jié)晶條件下（溶劑、溫度、結(jié)晶速率等）晶型的一致性；晶速率等）晶型的一致性； b. 不同晶型是否影響藥物活性和毒性

24、不同晶型是否影響藥物活性和毒性等等;43 結(jié)構(gòu)已知的仿制藥品結(jié)構(gòu)已知的仿制藥品 a. 力求與被仿制品保持一致；力求與被仿制品保持一致； 特別是被仿制藥為晶型選擇性藥物，且各特別是被仿制藥為晶型選擇性藥物，且各晶型的理化性質(zhì)及生物藥劑學(xué)性質(zhì)有明顯差異晶型的理化性質(zhì)及生物藥劑學(xué)性質(zhì)有明顯差異的仿制藥品，要重點(diǎn)確定與被仿制品種晶型的的仿制藥品，要重點(diǎn)確定與被仿制品種晶型的完全一致性（熔點(diǎn)、紅外吸收光譜、粉末完全一致性（熔點(diǎn)、紅外吸收光譜、粉末X射線衍射圖等射線衍射圖等)。 b. 重點(diǎn)關(guān)注難溶性固體口服制劑重點(diǎn)關(guān)注難溶性固體口服制劑晶型的研究；晶型的研究；443. 合成多肽類(lèi)藥物合成多肽類(lèi)藥物 氨基酸

25、分析氨基酸分析（證明多肽的組成是否正確）（證明多肽的組成是否正確）； 質(zhì)譜測(cè)定（質(zhì)譜測(cè)定（提供相對(duì)分子質(zhì)量及序列的信息）；提供相對(duì)分子質(zhì)量及序列的信息）； 序列分析以及肽圖測(cè)繪等；序列分析以及肽圖測(cè)繪等； 紫外：紫外：對(duì)具有生色團(tuán)結(jié)構(gòu)的小肽有一定的測(cè)試意義；對(duì)具有生色團(tuán)結(jié)構(gòu)的小肽有一定的測(cè)試意義； 紅外：紅外：適用于小肽（含三個(gè)氨基酸的肽）、擬肽等；適用于小肽（含三個(gè)氨基酸的肽）、擬肽等； 核磁共振：核磁共振：可對(duì)小肽的結(jié)構(gòu)提供部分信息；可對(duì)小肽的結(jié)構(gòu)提供部分信息； 其他方法：其他方法： HPLC、比旋度測(cè)定等。、比旋度測(cè)定等。45 藥物結(jié)構(gòu)中有半胱氨酸，應(yīng)明確其藥物結(jié)構(gòu)中有半胱氨酸，應(yīng)明確其

26、狀態(tài)（氧化態(tài)或還原態(tài)）；狀態(tài)（氧化態(tài)或還原態(tài)）； 藥物結(jié)構(gòu)中存在二硫鍵，應(yīng)明確二硫藥物結(jié)構(gòu)中存在二硫鍵，應(yīng)明確二硫鍵的正確連接點(diǎn)；鍵的正確連接點(diǎn)； 結(jié)合合成工藝對(duì)中間體的研究，對(duì)終結(jié)合合成工藝對(duì)中間體的研究，對(duì)終產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證。464. 多糖類(lèi)藥物多糖類(lèi)藥物多糖結(jié)構(gòu)的描述包括多糖結(jié)構(gòu)的描述包括:n多糖的分子量范圍；多糖的分子量范圍；n多糖的單糖組分；多糖的單糖組分；n單糖的連接點(diǎn)類(lèi)型；單糖的連接點(diǎn)類(lèi)型；n單糖和糖苷鍵的構(gòu)型；單糖和糖苷鍵的構(gòu)型；n重復(fù)單位重復(fù)單位; 47n確證方法：確證方法： 單糖的分離、鑒定：?jiǎn)翁堑姆蛛x、鑒定：紙色譜法、紙色譜法、TLC、HPLC、氣氣

27、-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)等；質(zhì)聯(lián)用技術(shù)等； 多糖的相對(duì)分子量及分子量分布測(cè)定：多糖的相對(duì)分子量及分子量分布測(cè)定：凝膠色譜法；凝膠色譜法； 糖苷鍵的連接方式及糖苷鍵的位置：糖苷鍵的連接方式及糖苷鍵的位置：紅紅外、核磁共振、化學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)物的分析等外、核磁共振、化學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)物的分析等；485. 多組分藥物多組分藥物 明確各組分的組成比例，對(duì)影響藥效和毒性的明確各組分的組成比例，對(duì)影響藥效和毒性的主要成主要成分分進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證。進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證。 可使用經(jīng)典的提取方法或其它分離技術(shù)，如制備色譜可使用經(jīng)典的提取方法或其它分離技術(shù)，如制備色譜（TLC，HPLC），分離得到主要藥效成分單體，按單體），分離得到主要藥效成分單體

28、，按單體項(xiàng)目要求進(jìn)行化學(xué)結(jié)構(gòu)確證。項(xiàng)目要求進(jìn)行化學(xué)結(jié)構(gòu)確證。 在組分多，含量少，難于得到單體時(shí)，可使用聯(lián)機(jī)分在組分多，含量少，難于得到單體時(shí)，可使用聯(lián)機(jī)分析技術(shù)，如氣一質(zhì)聯(lián)用（析技術(shù)，如氣一質(zhì)聯(lián)用（GCMS），液），液質(zhì)聯(lián)用（質(zhì)聯(lián)用（LCMS），氣），氣付利葉紅外聯(lián)用（付利葉紅外聯(lián)用（GCFTIR），質(zhì)），質(zhì)質(zhì)聯(lián)用質(zhì)聯(lián)用（MSMS），輔助組分結(jié)構(gòu)的驗(yàn)證及定量分析。），輔助組分結(jié)構(gòu)的驗(yàn)證及定量分析。496. 不含金屬元素的有機(jī)鹽類(lèi)或不含金屬元素的有機(jī)鹽類(lèi)或復(fù)合物復(fù)合物 應(yīng)同時(shí)提供應(yīng)同時(shí)提供成鹽前后成鹽前后的兩套波譜和試驗(yàn)數(shù)的兩套波譜和試驗(yàn)數(shù)據(jù)。據(jù)。 對(duì)于某些波譜測(cè)定有困難或不易說(shuō)明其結(jié)對(duì)于某些波

29、譜測(cè)定有困難或不易說(shuō)明其結(jié)構(gòu)的鹽或復(fù)合物，可測(cè)定藥物酸根或堿基的波構(gòu)的鹽或復(fù)合物，可測(cè)定藥物酸根或堿基的波譜，并結(jié)合其他試驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行確證。譜，并結(jié)合其他試驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行確證。507. 金屬鹽類(lèi)和絡(luò)合物金屬鹽類(lèi)和絡(luò)合物 除通常要求的各項(xiàng)測(cè)試外，還應(yīng)提供確證除通常要求的各項(xiàng)測(cè)試外，還應(yīng)提供確證分子中金屬元素的種類(lèi)、存在形式和含量的有分子中金屬元素的種類(lèi)、存在形式和含量的有關(guān)圖譜和分析數(shù)據(jù)。關(guān)圖譜和分析數(shù)據(jù)。 不適于或不能測(cè)試金屬鹽本身的項(xiàng)目，可不適于或不能測(cè)試金屬鹽本身的項(xiàng)目，可以用成鹽前的酸分子或配位體的相應(yīng)測(cè)試結(jié)果以用成鹽前的酸分子或配位體的相應(yīng)測(cè)試結(jié)果進(jìn)行佐證。進(jìn)行佐證。518. 半合成化合物半

30、合成化合物 分子母核的結(jié)構(gòu)為已知并可以確證其分子母核的結(jié)構(gòu)為已知并可以確證其原分子母核結(jié)構(gòu)在合成過(guò)程中未發(fā)生改原分子母核結(jié)構(gòu)在合成過(guò)程中未發(fā)生改變的，可適當(dāng)簡(jiǎn)化對(duì)母核部分結(jié)構(gòu)的確變的，可適當(dāng)簡(jiǎn)化對(duì)母核部分結(jié)構(gòu)的確證工作。重點(diǎn)對(duì)證工作。重點(diǎn)對(duì)新引入基團(tuán)新引入基團(tuán)進(jìn)行結(jié)構(gòu)確進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證，可以結(jié)合原料結(jié)構(gòu)和合成路線進(jìn)行證，可以結(jié)合原料結(jié)構(gòu)和合成路線進(jìn)行論證和說(shuō)明。論證和說(shuō)明。 如涉及構(gòu)型確證，若母核手性中心構(gòu)型沒(méi)有改變時(shí)，如涉及構(gòu)型確證，若母核手性中心構(gòu)型沒(méi)有改變時(shí)，重點(diǎn)在于側(cè)鏈和取代基中新引入手性中心的構(gòu)型確定。重點(diǎn)在于側(cè)鏈和取代基中新引入手性中心的構(gòu)型確定。52n綜合解析舉例5354FABMS2

31、2 muM+HM+Na5556123645789101112131415571236457891011121314CHCH2OCH358123645789101112131412a2b3459101113147865912a2b34591011131478612a386452b9711101413601236 4578910111213141512a2b34591011131478661OMeHOONCOHOHOHOOH123456789101112131415C15H21NO8Exact Mass: 343.12672Mol. Wt.: 343.32918C, 52.47; H, 6.17;

32、 N, 4.08; O, 37.2862申報(bào)資料的格式和內(nèi)容申報(bào)資料的格式和內(nèi)容n 一一. 新藥的化學(xué)結(jié)構(gòu)式、分子式及分子量新藥的化學(xué)結(jié)構(gòu)式、分子式及分子量n 二二. 供確認(rèn)化學(xué)結(jié)構(gòu)用供試品的純度及檢查純度的方法供確認(rèn)化學(xué)結(jié)構(gòu)用供試品的純度及檢查純度的方法n 三三. 確證化學(xué)結(jié)構(gòu)的方法確證化學(xué)結(jié)構(gòu)的方法n 理化常數(shù)理化常數(shù)n 元素分析元素分析n 四四. 各項(xiàng)波譜和測(cè)試的技術(shù)要求各項(xiàng)波譜和測(cè)試的技術(shù)要求n 紫外吸收光譜紫外吸收光譜n 紅外吸收光譜紅外吸收光譜n 核磁共振氫譜核磁共振氫譜n 核磁共振碳譜核磁共振碳譜n 質(zhì)譜質(zhì)譜n 差熱分析差熱分析n X-射線衍射譜射線衍射譜n 綜合解析綜合解析n

33、五五. 參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn) 63一一. 新藥的化學(xué)結(jié)構(gòu)式、分子式及分子量新藥的化學(xué)結(jié)構(gòu)式、分子式及分子量64n二二. 供確認(rèn)化學(xué)結(jié)構(gòu)用供試品的純度及供確認(rèn)化學(xué)結(jié)構(gòu)用供試品的純度及檢查純度的方法檢查純度的方法65三三. 確證化學(xué)結(jié)構(gòu)的方法確證化學(xué)結(jié)構(gòu)的方法662 元素分析元素分析 主要應(yīng)用：主要應(yīng)用： 確定元素組成、分子式確定元素組成、分子式; ; 除氧元素外，其余各種元素一般均能準(zhǔn)確除氧元素外，其余各種元素一般均能準(zhǔn)確測(cè)定其含量。測(cè)定其含量。 可以反映結(jié)晶水可以反映結(jié)晶水/ /結(jié)晶溶劑、成鹽化合物的結(jié)晶溶劑、成鹽化合物的酸根和堿基等。酸根和堿基等。 C C、H H、N N元素可采用自動(dòng)元素分析儀

34、測(cè)定，元素可采用自動(dòng)元素分析儀測(cè)定，其他元素可采用適宜的物理或化學(xué)方法測(cè)定。其他元素可采用適宜的物理或化學(xué)方法測(cè)定。 67 技術(shù)要求：技術(shù)要求： a. 應(yīng)詳細(xì)說(shuō)明使用儀器、測(cè)定方法及應(yīng)詳細(xì)說(shuō)明使用儀器、測(cè)定方法及條件。特別是對(duì)測(cè)試樣品的預(yù)處理方法、條件。特別是對(duì)測(cè)試樣品的預(yù)處理方法、條件。條件。 b. 同一樣品測(cè)定兩次，兩次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)同一樣品測(cè)定兩次，兩次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)同時(shí)列出，不取平均值。同時(shí)列出，不取平均值。 c. 應(yīng)給出計(jì)算理論值所依據(jù)的分子式，應(yīng)給出計(jì)算理論值所依據(jù)的分子式，包括結(jié)晶水（或結(jié)晶溶劑包括結(jié)晶水（或結(jié)晶溶劑) 。列表。列表比較實(shí)比較實(shí)測(cè)值與理論值（一般要求誤差不超過(guò)測(cè)值與理論值（一

35、般要求誤差不超過(guò)0.30.3），初步判定供試品與目標(biāo)化合物的分），初步判定供試品與目標(biāo)化合物的分子組成是否一致。子組成是否一致。 d. d. 附測(cè)試報(bào)告單的復(fù)印件。附測(cè)試報(bào)告單的復(fù)印件。68n儀器型號(hào)與測(cè)定條件n儀器：Carlo-Erba 1106元素分析儀(意大利)n測(cè)定條件：1050催化燃燒 載氣：N2 n 氧瓶法測(cè)定n測(cè)定結(jié)果與解析n測(cè)定結(jié)果：樣品測(cè)定結(jié)果與對(duì)照品測(cè)定結(jié)果見(jiàn)附表1。n結(jié)果解析：樣品與對(duì)照品的實(shí)測(cè)值同理論計(jì)算值基本相符，C、H、N、的誤差均在千分之五以內(nèi)，同含5個(gè)結(jié)晶水的鹽酸大觀霉素分子式C14H24ClN2O72HCl5H2O符合。n表1 樣品（020708）與對(duì)照品（D

36、JS）的元素分析數(shù)據(jù)69nCHN樣品（020708）(%)33.667.285.6433.767.375.67對(duì)照品（DJS）(%)33.657.305.6733.627.295.68理論計(jì)算值(%)33.957.335.6670(四四)各項(xiàng)波譜和測(cè)試的技術(shù)要求各項(xiàng)波譜和測(cè)試的技術(shù)要求71.1. 1. 紅外吸收光譜紅外吸收光譜(IR)(IR) 基本原理：基本原理： 分子中化學(xué)鍵振動(dòng)能級(jí)的躍遷。分子中化學(xué)鍵振動(dòng)能級(jí)的躍遷。主要應(yīng)用：主要應(yīng)用： a.a.鑒定化合物的結(jié)構(gòu)鑒定化合物的結(jié)構(gòu) 有對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)圖譜有對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)圖譜 b.b.推測(cè)化合物的結(jié)構(gòu)推測(cè)化合物的結(jié)構(gòu) 確定特征官能團(tuán)、區(qū)分晶型等確定特

37、征官能團(tuán)、區(qū)分晶型等72 技術(shù)要求：技術(shù)要求： a. 按藥典規(guī)定方法校正和檢定儀器；按藥典規(guī)定方法校正和檢定儀器； b. 正確選擇測(cè)試方法和條件正確選擇測(cè)試方法和條件 固體樣品首選溴化鉀壓片法；固體樣品首選溴化鉀壓片法； 離子交換離子交換-氯化鉀壓片；氯化鉀壓片； 晶型變化晶型變化-糊法；糊法； c. 準(zhǔn)確、合理、充分的圖譜解析準(zhǔn)確、合理、充分的圖譜解析; d. 按要求格式列表和撰寫(xiě)資料按要求格式列表和撰寫(xiě)資料; 73儀器型號(hào)與測(cè)試儀器：Nicolet Impact-400型紅外分光光度計(jì)儀器測(cè)試：用聚苯乙烯膜儀器的測(cè)定條件測(cè)定條件：樣品測(cè)定用溴化鉀壓片法測(cè)定圖譜：圖1、2附圖3： 聚苯乙烯膜

38、紅外吸收光譜。74 資料撰寫(xiě)格式資料撰寫(xiě)格式 儀器儀器 測(cè)試條件測(cè)試條件 儀器校正和檢定儀器校正和檢定 數(shù)據(jù)表數(shù)據(jù)表 解析解析吸收峰(cm-1) 強(qiáng) 度振動(dòng)類(lèi)型基 團(tuán)75767778 2. 2. 紫外吸收光譜紫外吸收光譜(UV)(UV) 基本原理：電子躍遷基本原理：電子躍遷 主要應(yīng)用：推測(cè)共軛體系的骨架結(jié)構(gòu)主要應(yīng)用：推測(cè)共軛體系的骨架結(jié)構(gòu)（發(fā)色團(tuán)、助色團(tuán)）（發(fā)色團(tuán)、助色團(tuán)） 紫外光譜紫外光譜定性定性 吸收系數(shù)吸收系數(shù)定量定量79n技術(shù)要求技術(shù)要求 a. 按藥典規(guī)定方法校正和檢定儀器；按藥典規(guī)定方法校正和檢定儀器； b. 通常要求三種溶劑：中性、通常要求三種溶劑：中性、0.1N HCl 、0.1

39、N NaOH； c. 要求定量，準(zhǔn)確計(jì)算摩爾吸收系數(shù)；要求定量，準(zhǔn)確計(jì)算摩爾吸收系數(shù)； d. 歸屬主要吸收譜帶；歸屬主要吸收譜帶； e. 數(shù)據(jù)列表說(shuō)明；數(shù)據(jù)列表說(shuō)明；8081n 資料撰寫(xiě)格式資料撰寫(xiě)格式 儀器儀器 測(cè)試條件測(cè)試條件 儀器校正和檢定儀器校正和檢定 數(shù)據(jù)表數(shù)據(jù)表 解析解析 溶 劑 max 值基團(tuán)和吸收帶82溶 劑max nmAbs水194.80200.00210,002.06232.28060.82090.1mol/L鹽酸200.00204.00210.002.05892.26251.2121三乙胺198.00203.00210.002.00952.27111.3316833.3.

40、核磁共振氫譜核磁共振氫譜( (1H-NMR) ) 基本原理：基本原理： 利用原子核的核自旋現(xiàn)象，通過(guò)一定振動(dòng)頻利用原子核的核自旋現(xiàn)象，通過(guò)一定振動(dòng)頻率的電磁波照射時(shí)，原子核吸收電磁波從低能率的電磁波照射時(shí)，原子核吸收電磁波從低能態(tài)向高能態(tài)躍遷，即核磁共振。態(tài)向高能態(tài)躍遷，即核磁共振。主要應(yīng)用主要應(yīng)用 可提供供試品中氫原子數(shù)目、周?chē)瘜W(xué)可提供供試品中氫原子數(shù)目、周?chē)瘜W(xué)環(huán)境、相互間關(guān)系、空間排列等信息。環(huán)境、相互間關(guān)系、空間排列等信息。 84技術(shù)要求技術(shù)要求 a. 應(yīng)使用應(yīng)使用200MHz以上高分辨以上高分辨NMR儀。儀。 b. 對(duì)各項(xiàng)測(cè)試條件應(yīng)有明確、詳盡的說(shuō)明，如對(duì)各項(xiàng)測(cè)試條件應(yīng)有明確、詳盡

41、的說(shuō)明，如儀器型號(hào)、規(guī)格、溶劑、內(nèi)標(biāo)。儀器型號(hào)、規(guī)格、溶劑、內(nèi)標(biāo)。 c. 對(duì)分子中全部對(duì)分子中全部H原子均要有明確的解析和歸原子均要有明確的解析和歸屬。屬。 d. 對(duì)復(fù)雜結(jié)構(gòu)化合物，應(yīng)考慮采用合適的其它對(duì)復(fù)雜結(jié)構(gòu)化合物，應(yīng)考慮采用合適的其它技術(shù)加以佐證。技術(shù)加以佐證。 8586 資料撰寫(xiě)格式資料撰寫(xiě)格式 儀器儀器 溶劑、內(nèi)標(biāo)溶劑、內(nèi)標(biāo) 給出原子編號(hào)的分子結(jié)構(gòu)式給出原子編號(hào)的分子結(jié)構(gòu)式 數(shù)據(jù)表數(shù)據(jù)表 (如有對(duì)照品或文獻(xiàn)數(shù)據(jù)可以對(duì)比列入表中) 解析解析原子序號(hào)化學(xué)位移質(zhì)子數(shù)多重性 J 值相應(yīng)質(zhì)子874.4.核磁共振碳譜核磁共振碳譜( (13C-NMR) ) 基本原理基本原理： 利用原子核的核自旋現(xiàn)

42、象，通過(guò)一定利用原子核的核自旋現(xiàn)象，通過(guò)一定 振動(dòng)頻率的電磁波照射時(shí)，原子核吸收電振動(dòng)頻率的電磁波照射時(shí)，原子核吸收電 磁波從低能態(tài)向高能態(tài)躍遷，即核磁共振。磁波從低能態(tài)向高能態(tài)躍遷，即核磁共振。 主要應(yīng)用主要應(yīng)用: : 可提供供試品中碳原子的數(shù)目、所處的可提供供試品中碳原子的數(shù)目、所處的不同化學(xué)環(huán)境信息。不同化學(xué)環(huán)境信息。 88技術(shù)要求技術(shù)要求 a. 對(duì)各項(xiàng)測(cè)試條件應(yīng)有明確、詳盡的說(shuō)明，對(duì)各項(xiàng)測(cè)試條件應(yīng)有明確、詳盡的說(shuō)明，如儀器型號(hào)、規(guī)格、溶劑、內(nèi)標(biāo)。如儀器型號(hào)、規(guī)格、溶劑、內(nèi)標(biāo)。 b. 在圖譜復(fù)雜時(shí)，應(yīng)使用質(zhì)子噪聲去偶或偏在圖譜復(fù)雜時(shí)，應(yīng)使用質(zhì)子噪聲去偶或偏共振去偶技術(shù)，使圖譜簡(jiǎn)化。共振去

43、偶技術(shù)，使圖譜簡(jiǎn)化。 c. 對(duì)分子中全部對(duì)分子中全部C原子均要有明確的解析和歸原子均要有明確的解析和歸屬。屬。 d. 對(duì)復(fù)雜結(jié)構(gòu)化合物，可與類(lèi)似結(jié)構(gòu)化合物的對(duì)復(fù)雜結(jié)構(gòu)化合物，可與類(lèi)似結(jié)構(gòu)化合物的化學(xué)位移進(jìn)行計(jì)算比較，確定合理結(jié)構(gòu)?；瘜W(xué)位移進(jìn)行計(jì)算比較，確定合理結(jié)構(gòu)。89 資料撰寫(xiě)格式資料撰寫(xiě)格式 儀器儀器 溶劑溶劑 給出碳原子編號(hào)的分子結(jié)構(gòu)式給出碳原子編號(hào)的分子結(jié)構(gòu)式 數(shù)據(jù)表數(shù)據(jù)表 (如有對(duì)照品或文獻(xiàn)數(shù)據(jù)可以對(duì)比列入表中) 解析解析 碳原子序號(hào) 化學(xué)位移 碳原子類(lèi)型905. 其他核磁共振譜其他核磁共振譜 DEPTDEPT譜譜: :可區(qū)分碳原子的類(lèi)型可區(qū)分碳原子的類(lèi)型; ;1 1H H1 1Hc

44、osy: Hcosy: 可以顯示相隔可以顯示相隔2 23 3鍵相互之間存鍵相互之間存在偶合的質(zhì)子對(duì)信息在偶合的質(zhì)子對(duì)信息; ;C- Hcosy (HMQC ,C- Hcosy (HMQC ,異核多量子相關(guān)譜異核多量子相關(guān)譜): ): 可以可以了解分子中了解分子中C-HC-H聯(lián)結(jié)情況聯(lián)結(jié)情況; ; 91HSQC (HSQC (異核單量子相關(guān)譜異核單量子相關(guān)譜):):用于測(cè)定用于測(cè)定1 1H-H-1313C C相關(guān)相關(guān)信息，可以直接明確信息，可以直接明確C C、H H之間的連接關(guān)系之間的連接關(guān)系; ; HMBC ( HMBC (異核多重鍵相關(guān)譜異核多重鍵相關(guān)譜):):可以顯示可以顯示1 1H H、

45、1313C C 之之間遠(yuǎn)程偶合的信息，即相隔二鍵和三鍵的間遠(yuǎn)程偶合的信息，即相隔二鍵和三鍵的1 1H H、1313C C之間相關(guān)信號(hào)之間相關(guān)信號(hào); ;解析化合物中存在的結(jié)構(gòu)單元，解析化合物中存在的結(jié)構(gòu)單元，推測(cè)化合物中各官能團(tuán)、結(jié)構(gòu)單元之間的連接推測(cè)化合物中各官能團(tuán)、結(jié)構(gòu)單元之間的連接關(guān)系關(guān)系; ;1919F F、3131P P等等: :可提供相應(yīng)元素的種類(lèi)及數(shù)目、在可提供相應(yīng)元素的種類(lèi)及數(shù)目、在分子中所處的化學(xué)環(huán)境等信息分子中所處的化學(xué)環(huán)境等信息; ; 92n常用的二維核磁共振測(cè)試包括H-Hcosy（H-H Correlated spectroscopy）、HMBC（1H-detected

46、multiple-bond heteronuclear multiple-quantum coherence）、HMQC（1H-detected heteronuclear multiple-quantum coherence）等，對(duì)于結(jié)構(gòu)復(fù)雜或用一般NMR方法難以進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證的化合物，進(jìn)行二維譜測(cè)試可更有效地確證藥物的結(jié)構(gòu)。93949596979899100碳譜注意點(diǎn)：n1. 碳信號(hào)數(shù)目比實(shí)際的少，原因可能為信號(hào)重疊，或有些季碳信號(hào)弱，或隱藏在溶劑信號(hào)內(nèi)；n2. 碳信號(hào)數(shù)目比實(shí)際的多，原因可能是某些化合物存在構(gòu)象異構(gòu)。101n分子式：C44H69NO12.H2O HOH3COH3CONCH3

47、OHOCH2OOOHOH3COCH3H3CH3COOCH3.H2O102103n結(jié)構(gòu)式為C44H69NO12，在其13C全去偶譜中應(yīng)顯示44個(gè)峰，但實(shí)際顯示多達(dá)83個(gè)峰，這是因?yàn)樵谌軇┲杏袃煞N構(gòu)像,一種為優(yōu)勢(shì)一種為劣勢(shì)，（文獻(xiàn)報(bào)道在氯仿中比例為3:1） 1046. 質(zhì)譜(MS) 基本原理：基本原理： 將氣體分子經(jīng)電子流轟擊將氣體分子經(jīng)電子流轟擊, ,使分子中的電子使分子中的電子成為帶正電荷的分子離子成為帶正電荷的分子離子, ,而后裂解成一系列而后裂解成一系列的碎片離子的碎片離子, ,再通過(guò)磁場(chǎng)使不同質(zhì)荷比的正離再通過(guò)磁場(chǎng)使不同質(zhì)荷比的正離子分離并記錄其相對(duì)強(qiáng)度子分離并記錄其相對(duì)強(qiáng)度, ,畫(huà)出質(zhì)

48、譜圖。畫(huà)出質(zhì)譜圖。 105 主要應(yīng)用：主要應(yīng)用： 提供分子離子峰、碎片峰、豐度等信息，可以提供分子離子峰、碎片峰、豐度等信息，可以確定分子量、分子式以及推測(cè)部分結(jié)構(gòu)單元。確定分子量、分子式以及推測(cè)部分結(jié)構(gòu)單元。 對(duì)含有同位素元素對(duì)含有同位素元素( (如如ClCl、BrBr等等) )的藥物的藥物, ,利用利用同位素簇的豐度比，可推斷藥物中部分元素的種同位素簇的豐度比，可推斷藥物中部分元素的種類(lèi)、數(shù)量，乃至分子式、裂解方式等。類(lèi)、數(shù)量，乃至分子式、裂解方式等。106技術(shù)要求技術(shù)要求: a. 應(yīng)盡量設(shè)法獲得化合物分子離子峰。當(dāng)用應(yīng)盡量設(shè)法獲得化合物分子離子峰。當(dāng)用EI法不能出現(xiàn)分子離子峰時(shí)，可試用其

49、它法不能出現(xiàn)分子離子峰時(shí)，可試用其它電離源，如電離源，如CI，F(xiàn)AB，F(xiàn)I，F(xiàn)D，ESI等。等。 b. 所獲數(shù)據(jù)按規(guī)定列表，并對(duì)重要的碎片離所獲數(shù)據(jù)按規(guī)定列表，并對(duì)重要的碎片離子峰的產(chǎn)生進(jìn)行解釋?zhuān)峁╇x子裂解圖。子峰的產(chǎn)生進(jìn)行解釋?zhuān)峁╇x子裂解圖。 c. 高分辨質(zhì)譜不能反映藥品的純度和結(jié)晶水，高分辨質(zhì)譜不能反映藥品的純度和結(jié)晶水，結(jié)晶溶劑，殘留溶劑的情況結(jié)晶溶劑，殘留溶劑的情況。107 資料撰寫(xiě)格式資料撰寫(xiě)格式 儀器儀器 測(cè)試條件測(cè)試條件 數(shù)據(jù)表數(shù)據(jù)表 裂解圖裂解圖 解析解析 M/ Z 相對(duì)豐度相對(duì)豐度 碎片離子碎片離子1081091107. 熱分析熱分析 基本原理：基本原理： 采用程序控溫下

50、，精確記錄待測(cè)物質(zhì)理采用程序控溫下，精確記錄待測(cè)物質(zhì)理化性質(zhì)與溫度的關(guān)系，研究其受熱過(guò)程中晶化性質(zhì)與溫度的關(guān)系，研究其受熱過(guò)程中晶型轉(zhuǎn)變、熔融、升華等物理變化和脫水、熱型轉(zhuǎn)變、熔融、升華等物理變化和脫水、熱分解、氧化、還原等化學(xué)變化。分解、氧化、還原等化學(xué)變化。 111 主要應(yīng)用：主要應(yīng)用： 差示掃描量熱法（差示掃描量熱法（DSC): 測(cè)定熔測(cè)定熔點(diǎn)、結(jié)晶水點(diǎn)、結(jié)晶水/結(jié)晶溶劑、考察晶型等。結(jié)晶溶劑、考察晶型等。 熱重法（熱重法（TGA): 測(cè)定結(jié)晶水、吸測(cè)定結(jié)晶水、吸附水和結(jié)晶溶劑、分解溫度等。附水和結(jié)晶溶劑、分解溫度等。112 技術(shù)要求：技術(shù)要求： a. 應(yīng)說(shuō)明使用儀器型號(hào)、參數(shù)設(shè)定值，包括應(yīng)說(shuō)明使用儀器型號(hào)、參數(shù)設(shè)定值，包括升溫度速度