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文檔簡介
1、作物栽培學(xué)與耕作學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文 精品論文 干用辣椒種質(zhì)資源遺傳多樣性及雜種純度鑒定的RAPD分析關(guān)鍵詞:干用辣椒 種質(zhì)資源 遺傳多樣性 純度鑒定 RAPD摘要:采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)內(nèi)蒙古開魯縣種植的30個(gè)國內(nèi)外干用辣椒品種進(jìn)行遺傳多樣性鑒定研究,分析這些品種之間的親緣關(guān)系,進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析和雜交種純度鑒定,旨在為種質(zhì)資源鑒定和雜交育種提供一定理論依據(jù)。本研究結(jié)果如下: 1.建立了干用辣椒RAPD分析的技術(shù)體系:引物0.8mol/L、dNTPs0.6mmol/L、MgC122.5mmol/L、1.5
2、UTaq聚合酶、60ngDNA模板為干用辣椒品種RAPD反響的最正確配比。反響程序?yàn)椋?4預(yù)變性4min,94變性1min,36退火1min,72延伸2min,共40個(gè)循環(huán),最后72延伸5min。 2.從200個(gè)隨機(jī)引物中篩選出25個(gè)引物,共擴(kuò)增出257條譜帶,其中多態(tài)性譜帶167條,多態(tài)性程度為64.98。每個(gè)引物可以擴(kuò)增出212條多態(tài)性譜帶,平均每個(gè)引物產(chǎn)生6.68條,譜帶大小為230bp200bp。D=0.51時(shí),聚類分析將供試材料分為6類,各個(gè)基因型間的遺傳距離系數(shù)分布在0.166670.85219之間,平均遺傳距離為0.39295。干紅8號(hào)和干紅的遺傳距離最小為0.16667,兩者遺
3、傳根底相似,它們的親緣關(guān)系較近,并且這兩個(gè)品種田間表現(xiàn)也十分相似。朝天椒和美國鐵皮椒遺傳距離為0.85219,它們的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。從田間栽培上觀察,美國鐵皮椒椒型大,果皮厚,單果重遠(yuǎn)大于其它品種,但整株結(jié)果較其它品種少;朝天椒果實(shí)較小,椒型整齊,果皮顏色鮮紅,整株結(jié)果密度大,是當(dāng)?shù)赝茝V的主要品種之一。 3.篩選出應(yīng)用于干用辣椒種子純度鑒定的引物和建立了雜交種子的RAPD指紋圖譜。從25條引物中篩選出了用于干用辣椒種子純度鑒定的引物5條:其中包括偏父型引物S290、偏母型引物S2069、互補(bǔ)型引物S8、特異型引物S1120及缺失型引物S5。利用互補(bǔ)型引物S8鑒定干用辣椒雜交種純度,其結(jié)果是50粒
4、供試種子中有2粒其它種子混雜,從而獲得該種子純度為96。正文內(nèi)容 采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)內(nèi)蒙古開魯縣種植的30個(gè)國內(nèi)外干用辣椒品種進(jìn)行遺傳多樣性鑒定研究,分析這些品種之間的親緣關(guān)系,進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析和雜交種純度鑒定,旨在為種質(zhì)資源鑒定和雜交育種提供一定理論依據(jù)。本研究結(jié)果如下: 1.建立了干用辣椒RAPD分析的技術(shù)體系:引物0.8mol/L、dNTPs0.6mmol/L、MgC122.5mmol/L、1.5UTaq聚合酶、60ngDNA模板為干用辣椒品種RAPD反響的最正確配比。反響程序?yàn)椋?4預(yù)變
5、性4min,94變性1min,36退火1min,72延伸2min,共40個(gè)循環(huán),最后72延伸5min。 2.從200個(gè)隨機(jī)引物中篩選出25個(gè)引物,共擴(kuò)增出257條譜帶,其中多態(tài)性譜帶167條,多態(tài)性程度為64.98。每個(gè)引物可以擴(kuò)增出212條多態(tài)性譜帶,平均每個(gè)引物產(chǎn)生6.68條,譜帶大小為230bp200bp。D=0.51時(shí),聚類分析將供試材料分為6類,各個(gè)基因型間的遺傳距離系數(shù)分布在0.166670.85219之間,平均遺傳距離為0.39295。干紅8號(hào)和干紅的遺傳距離最小為0.16667,兩者遺傳根底相似,它們的親緣關(guān)系較近,并且這兩個(gè)品種田間表現(xiàn)也十分相似。朝天椒和美國鐵皮椒遺傳距離為
6、0.85219,它們的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。從田間栽培上觀察,美國鐵皮椒椒型大,果皮厚,單果重遠(yuǎn)大于其它品種,但整株結(jié)果較其它品種少;朝天椒果實(shí)較小,椒型整齊,果皮顏色鮮紅,整株結(jié)果密度大,是當(dāng)?shù)赝茝V的主要品種之一。 3.篩選出應(yīng)用于干用辣椒種子純度鑒定的引物和建立了雜交種子的RAPD指紋圖譜。從25條引物中篩選出了用于干用辣椒種子純度鑒定的引物5條:其中包括偏父型引物S290、偏母型引物S2069、互補(bǔ)型引物S8、特異型引物S1120及缺失型引物S5。利用互補(bǔ)型引物S8鑒定干用辣椒雜交種純度,其結(jié)果是50粒供試種子中有2粒其它種子混雜,從而獲得該種子純度為96。采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random
7、 Amplified Polymorphic DNA)分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)內(nèi)蒙古開魯縣種植的30個(gè)國內(nèi)外干用辣椒品種進(jìn)行遺傳多樣性鑒定研究,分析這些品種之間的親緣關(guān)系,進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析和雜交種純度鑒定,旨在為種質(zhì)資源鑒定和雜交育種提供一定理論依據(jù)。本研究結(jié)果如下: 1.建立了干用辣椒RAPD分析的技術(shù)體系:引物0.8mol/L、dNTPs0.6mmol/L、MgC122.5mmol/L、1.5UTaq聚合酶、60ngDNA模板為干用辣椒品種RAPD反響的最正確配比。反響程序?yàn)椋?4預(yù)變性4min,94變性1min,36退火1min,72延伸2min,共40個(gè)循環(huán),最后72延伸5min。
8、2.從200個(gè)隨機(jī)引物中篩選出25個(gè)引物,共擴(kuò)增出257條譜帶,其中多態(tài)性譜帶167條,多態(tài)性程度為64.98。每個(gè)引物可以擴(kuò)增出212條多態(tài)性譜帶,平均每個(gè)引物產(chǎn)生6.68條,譜帶大小為230bp200bp。D=0.51時(shí),聚類分析將供試材料分為6類,各個(gè)基因型間的遺傳距離系數(shù)分布在0.166670.85219之間,平均遺傳距離為0.39295。干紅8號(hào)和干紅的遺傳距離最小為0.16667,兩者遺傳根底相似,它們的親緣關(guān)系較近,并且這兩個(gè)品種田間表現(xiàn)也十分相似。朝天椒和美國鐵皮椒遺傳距離為0.85219,它們的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。從田間栽培上觀察,美國鐵皮椒椒型大,果皮厚,單果重遠(yuǎn)大于其它品種,但
9、整株結(jié)果較其它品種少;朝天椒果實(shí)較小,椒型整齊,果皮顏色鮮紅,整株結(jié)果密度大,是當(dāng)?shù)赝茝V的主要品種之一。 3.篩選出應(yīng)用于干用辣椒種子純度鑒定的引物和建立了雜交種子的RAPD指紋圖譜。從25條引物中篩選出了用于干用辣椒種子純度鑒定的引物5條:其中包括偏父型引物S290、偏母型引物S2069、互補(bǔ)型引物S8、特異型引物S1120及缺失型引物S5。利用互補(bǔ)型引物S8鑒定干用辣椒雜交種純度,其結(jié)果是50粒供試種子中有2粒其它種子混雜,從而獲得該種子純度為96。采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)內(nèi)蒙古開魯縣種植的30個(gè)國內(nèi)外干用
10、辣椒品種進(jìn)行遺傳多樣性鑒定研究,分析這些品種之間的親緣關(guān)系,進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析和雜交種純度鑒定,旨在為種質(zhì)資源鑒定和雜交育種提供一定理論依據(jù)。本研究結(jié)果如下: 1.建立了干用辣椒RAPD分析的技術(shù)體系:引物0.8mol/L、dNTPs0.6mmol/L、MgC122.5mmol/L、1.5UTaq聚合酶、60ngDNA模板為干用辣椒品種RAPD反響的最正確配比。反響程序?yàn)椋?4預(yù)變性4min,94變性1min,36退火1min,72延伸2min,共40個(gè)循環(huán),最后72延伸5min。 2.從200個(gè)隨機(jī)引物中篩選出25個(gè)引物,共擴(kuò)增出257條譜帶,其中多態(tài)性譜帶167條,多態(tài)性程度為64
11、.98。每個(gè)引物可以擴(kuò)增出212條多態(tài)性譜帶,平均每個(gè)引物產(chǎn)生6.68條,譜帶大小為230bp200bp。D=0.51時(shí),聚類分析將供試材料分為6類,各個(gè)基因型間的遺傳距離系數(shù)分布在0.166670.85219之間,平均遺傳距離為0.39295。干紅8號(hào)和干紅的遺傳距離最小為0.16667,兩者遺傳根底相似,它們的親緣關(guān)系較近,并且這兩個(gè)品種田間表現(xiàn)也十分相似。朝天椒和美國鐵皮椒遺傳距離為0.85219,它們的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。從田間栽培上觀察,美國鐵皮椒椒型大,果皮厚,單果重遠(yuǎn)大于其它品種,但整株結(jié)果較其它品種少;朝天椒果實(shí)較小,椒型整齊,果皮顏色鮮紅,整株結(jié)果密度大,是當(dāng)?shù)赝茝V的主要品種之一。
12、 3.篩選出應(yīng)用于干用辣椒種子純度鑒定的引物和建立了雜交種子的RAPD指紋圖譜。從25條引物中篩選出了用于干用辣椒種子純度鑒定的引物5條:其中包括偏父型引物S290、偏母型引物S2069、互補(bǔ)型引物S8、特異型引物S1120及缺失型引物S5。利用互補(bǔ)型引物S8鑒定干用辣椒雜交種純度,其結(jié)果是50粒供試種子中有2粒其它種子混雜,從而獲得該種子純度為96。采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)內(nèi)蒙古開魯縣種植的30個(gè)國內(nèi)外干用辣椒品種進(jìn)行遺傳多樣性鑒定研究,分析這些品種之間的親緣關(guān)系,進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析和雜交種純度鑒定,
13、旨在為種質(zhì)資源鑒定和雜交育種提供一定理論依據(jù)。本研究結(jié)果如下: 1.建立了干用辣椒RAPD分析的技術(shù)體系:引物0.8mol/L、dNTPs0.6mmol/L、MgC122.5mmol/L、1.5UTaq聚合酶、60ngDNA模板為干用辣椒品種RAPD反響的最正確配比。反響程序?yàn)椋?4預(yù)變性4min,94變性1min,36退火1min,72延伸2min,共40個(gè)循環(huán),最后72延伸5min。 2.從200個(gè)隨機(jī)引物中篩選出25個(gè)引物,共擴(kuò)增出257條譜帶,其中多態(tài)性譜帶167條,多態(tài)性程度為64.98。每個(gè)引物可以擴(kuò)增出212條多態(tài)性譜帶,平均每個(gè)引物產(chǎn)生6.68條,譜帶大小為230bp200bp
14、。D=0.51時(shí),聚類分析將供試材料分為6類,各個(gè)基因型間的遺傳距離系數(shù)分布在0.166670.85219之間,平均遺傳距離為0.39295。干紅8號(hào)和干紅的遺傳距離最小為0.16667,兩者遺傳根底相似,它們的親緣關(guān)系較近,并且這兩個(gè)品種田間表現(xiàn)也十分相似。朝天椒和美國鐵皮椒遺傳距離為0.85219,它們的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。從田間栽培上觀察,美國鐵皮椒椒型大,果皮厚,單果重遠(yuǎn)大于其它品種,但整株結(jié)果較其它品種少;朝天椒果實(shí)較小,椒型整齊,果皮顏色鮮紅,整株結(jié)果密度大,是當(dāng)?shù)赝茝V的主要品種之一。 3.篩選出應(yīng)用于干用辣椒種子純度鑒定的引物和建立了雜交種子的RAPD指紋圖譜。從25條引物中篩選出了用
15、于干用辣椒種子純度鑒定的引物5條:其中包括偏父型引物S290、偏母型引物S2069、互補(bǔ)型引物S8、特異型引物S1120及缺失型引物S5。利用互補(bǔ)型引物S8鑒定干用辣椒雜交種純度,其結(jié)果是50粒供試種子中有2粒其它種子混雜,從而獲得該種子純度為96。采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)內(nèi)蒙古開魯縣種植的30個(gè)國內(nèi)外干用辣椒品種進(jìn)行遺傳多樣性鑒定研究,分析這些品種之間的親緣關(guān)系,進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析和雜交種純度鑒定,旨在為種質(zhì)資源鑒定和雜交育種提供一定理論依據(jù)。本研究結(jié)果如下: 1.建立了干用辣椒RAPD分析的技術(shù)體系
16、:引物0.8mol/L、dNTPs0.6mmol/L、MgC122.5mmol/L、1.5UTaq聚合酶、60ngDNA模板為干用辣椒品種RAPD反響的最正確配比。反響程序?yàn)椋?4預(yù)變性4min,94變性1min,36退火1min,72延伸2min,共40個(gè)循環(huán),最后72延伸5min。 2.從200個(gè)隨機(jī)引物中篩選出25個(gè)引物,共擴(kuò)增出257條譜帶,其中多態(tài)性譜帶167條,多態(tài)性程度為64.98。每個(gè)引物可以擴(kuò)增出212條多態(tài)性譜帶,平均每個(gè)引物產(chǎn)生6.68條,譜帶大小為230bp200bp。D=0.51時(shí),聚類分析將供試材料分為6類,各個(gè)基因型間的遺傳距離系數(shù)分布在0.166670.8521
17、9之間,平均遺傳距離為0.39295。干紅8號(hào)和干紅的遺傳距離最小為0.16667,兩者遺傳根底相似,它們的親緣關(guān)系較近,并且這兩個(gè)品種田間表現(xiàn)也十分相似。朝天椒和美國鐵皮椒遺傳距離為0.85219,它們的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。從田間栽培上觀察,美國鐵皮椒椒型大,果皮厚,單果重遠(yuǎn)大于其它品種,但整株結(jié)果較其它品種少;朝天椒果實(shí)較小,椒型整齊,果皮顏色鮮紅,整株結(jié)果密度大,是當(dāng)?shù)赝茝V的主要品種之一。 3.篩選出應(yīng)用于干用辣椒種子純度鑒定的引物和建立了雜交種子的RAPD指紋圖譜。從25條引物中篩選出了用于干用辣椒種子純度鑒定的引物5條:其中包括偏父型引物S290、偏母型引物S2069、互補(bǔ)型引物S8、特異
18、型引物S1120及缺失型引物S5。利用互補(bǔ)型引物S8鑒定干用辣椒雜交種純度,其結(jié)果是50粒供試種子中有2粒其它種子混雜,從而獲得該種子純度為96。采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)內(nèi)蒙古開魯縣種植的30個(gè)國內(nèi)外干用辣椒品種進(jìn)行遺傳多樣性鑒定研究,分析這些品種之間的親緣關(guān)系,進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析和雜交種純度鑒定,旨在為種質(zhì)資源鑒定和雜交育種提供一定理論依據(jù)。本研究結(jié)果如下: 1.建立了干用辣椒RAPD分析的技術(shù)體系:引物0.8mol/L、dNTPs0.6mmol/L、MgC122.5mmol/L、1.5UTaq聚合酶
19、、60ngDNA模板為干用辣椒品種RAPD反響的最正確配比。反響程序?yàn)椋?4預(yù)變性4min,94變性1min,36退火1min,72延伸2min,共40個(gè)循環(huán),最后72延伸5min。 2.從200個(gè)隨機(jī)引物中篩選出25個(gè)引物,共擴(kuò)增出257條譜帶,其中多態(tài)性譜帶167條,多態(tài)性程度為64.98。每個(gè)引物可以擴(kuò)增出212條多態(tài)性譜帶,平均每個(gè)引物產(chǎn)生6.68條,譜帶大小為230bp200bp。D=0.51時(shí),聚類分析將供試材料分為6類,各個(gè)基因型間的遺傳距離系數(shù)分布在0.166670.85219之間,平均遺傳距離為0.39295。干紅8號(hào)和干紅的遺傳距離最小為0.16667,兩者遺傳根底相似,它
20、們的親緣關(guān)系較近,并且這兩個(gè)品種田間表現(xiàn)也十分相似。朝天椒和美國鐵皮椒遺傳距離為0.85219,它們的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。從田間栽培上觀察,美國鐵皮椒椒型大,果皮厚,單果重遠(yuǎn)大于其它品種,但整株結(jié)果較其它品種少;朝天椒果實(shí)較小,椒型整齊,果皮顏色鮮紅,整株結(jié)果密度大,是當(dāng)?shù)赝茝V的主要品種之一。 3.篩選出應(yīng)用于干用辣椒種子純度鑒定的引物和建立了雜交種子的RAPD指紋圖譜。從25條引物中篩選出了用于干用辣椒種子純度鑒定的引物5條:其中包括偏父型引物S290、偏母型引物S2069、互補(bǔ)型引物S8、特異型引物S1120及缺失型引物S5。利用互補(bǔ)型引物S8鑒定干用辣椒雜交種純度,其結(jié)果是50粒供試種子中有2
21、粒其它種子混雜,從而獲得該種子純度為96。采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)內(nèi)蒙古開魯縣種植的30個(gè)國內(nèi)外干用辣椒品種進(jìn)行遺傳多樣性鑒定研究,分析這些品種之間的親緣關(guān)系,進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析和雜交種純度鑒定,旨在為種質(zhì)資源鑒定和雜交育種提供一定理論依據(jù)。本研究結(jié)果如下: 1.建立了干用辣椒RAPD分析的技術(shù)體系:引物0.8mol/L、dNTPs0.6mmol/L、MgC122.5mmol/L、1.5UTaq聚合酶、60ngDNA模板為干用辣椒品種RAPD反響的最正確配比。反響程序?yàn)椋?4預(yù)變性4min,94變性1m
22、in,36退火1min,72延伸2min,共40個(gè)循環(huán),最后72延伸5min。 2.從200個(gè)隨機(jī)引物中篩選出25個(gè)引物,共擴(kuò)增出257條譜帶,其中多態(tài)性譜帶167條,多態(tài)性程度為64.98。每個(gè)引物可以擴(kuò)增出212條多態(tài)性譜帶,平均每個(gè)引物產(chǎn)生6.68條,譜帶大小為230bp200bp。D=0.51時(shí),聚類分析將供試材料分為6類,各個(gè)基因型間的遺傳距離系數(shù)分布在0.166670.85219之間,平均遺傳距離為0.39295。干紅8號(hào)和干紅的遺傳距離最小為0.16667,兩者遺傳根底相似,它們的親緣關(guān)系較近,并且這兩個(gè)品種田間表現(xiàn)也十分相似。朝天椒和美國鐵皮椒遺傳距離為0.85219,它們的親
23、緣關(guān)系較遠(yuǎn)。從田間栽培上觀察,美國鐵皮椒椒型大,果皮厚,單果重遠(yuǎn)大于其它品種,但整株結(jié)果較其它品種少;朝天椒果實(shí)較小,椒型整齊,果皮顏色鮮紅,整株結(jié)果密度大,是當(dāng)?shù)赝茝V的主要品種之一。 3.篩選出應(yīng)用于干用辣椒種子純度鑒定的引物和建立了雜交種子的RAPD指紋圖譜。從25條引物中篩選出了用于干用辣椒種子純度鑒定的引物5條:其中包括偏父型引物S290、偏母型引物S2069、互補(bǔ)型引物S8、特異型引物S1120及缺失型引物S5。利用互補(bǔ)型引物S8鑒定干用辣椒雜交種純度,其結(jié)果是50粒供試種子中有2粒其它種子混雜,從而獲得該種子純度為96。采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified P
24、olymorphic DNA)分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)內(nèi)蒙古開魯縣種植的30個(gè)國內(nèi)外干用辣椒品種進(jìn)行遺傳多樣性鑒定研究,分析這些品種之間的親緣關(guān)系,進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析和雜交種純度鑒定,旨在為種質(zhì)資源鑒定和雜交育種提供一定理論依據(jù)。本研究結(jié)果如下: 1.建立了干用辣椒RAPD分析的技術(shù)體系:引物0.8mol/L、dNTPs0.6mmol/L、MgC122.5mmol/L、1.5UTaq聚合酶、60ngDNA模板為干用辣椒品種RAPD反響的最正確配比。反響程序?yàn)椋?4預(yù)變性4min,94變性1min,36退火1min,72延伸2min,共40個(gè)循環(huán),最后72延伸5min。 2.從200個(gè)隨機(jī)引物中
25、篩選出25個(gè)引物,共擴(kuò)增出257條譜帶,其中多態(tài)性譜帶167條,多態(tài)性程度為64.98。每個(gè)引物可以擴(kuò)增出212條多態(tài)性譜帶,平均每個(gè)引物產(chǎn)生6.68條,譜帶大小為230bp200bp。D=0.51時(shí),聚類分析將供試材料分為6類,各個(gè)基因型間的遺傳距離系數(shù)分布在0.166670.85219之間,平均遺傳距離為0.39295。干紅8號(hào)和干紅的遺傳距離最小為0.16667,兩者遺傳根底相似,它們的親緣關(guān)系較近,并且這兩個(gè)品種田間表現(xiàn)也十分相似。朝天椒和美國鐵皮椒遺傳距離為0.85219,它們的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。從田間栽培上觀察,美國鐵皮椒椒型大,果皮厚,單果重遠(yuǎn)大于其它品種,但整株結(jié)果較其它品種少;朝
26、天椒果實(shí)較小,椒型整齊,果皮顏色鮮紅,整株結(jié)果密度大,是當(dāng)?shù)赝茝V的主要品種之一。 3.篩選出應(yīng)用于干用辣椒種子純度鑒定的引物和建立了雜交種子的RAPD指紋圖譜。從25條引物中篩選出了用于干用辣椒種子純度鑒定的引物5條:其中包括偏父型引物S290、偏母型引物S2069、互補(bǔ)型引物S8、特異型引物S1120及缺失型引物S5。利用互補(bǔ)型引物S8鑒定干用辣椒雜交種純度,其結(jié)果是50粒供試種子中有2粒其它種子混雜,從而獲得該種子純度為96。采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)內(nèi)蒙古開魯縣種植的30個(gè)國內(nèi)外干用辣椒品種進(jìn)行遺傳多樣性鑒
27、定研究,分析這些品種之間的親緣關(guān)系,進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析和雜交種純度鑒定,旨在為種質(zhì)資源鑒定和雜交育種提供一定理論依據(jù)。本研究結(jié)果如下: 1.建立了干用辣椒RAPD分析的技術(shù)體系:引物0.8mol/L、dNTPs0.6mmol/L、MgC122.5mmol/L、1.5UTaq聚合酶、60ngDNA模板為干用辣椒品種RAPD反響的最正確配比。反響程序?yàn)椋?4預(yù)變性4min,94變性1min,36退火1min,72延伸2min,共40個(gè)循環(huán),最后72延伸5min。 2.從200個(gè)隨機(jī)引物中篩選出25個(gè)引物,共擴(kuò)增出257條譜帶,其中多態(tài)性譜帶167條,多態(tài)性程度為64.98。每個(gè)引物可以擴(kuò)增
28、出212條多態(tài)性譜帶,平均每個(gè)引物產(chǎn)生6.68條,譜帶大小為230bp200bp。D=0.51時(shí),聚類分析將供試材料分為6類,各個(gè)基因型間的遺傳距離系數(shù)分布在0.166670.85219之間,平均遺傳距離為0.39295。干紅8號(hào)和干紅的遺傳距離最小為0.16667,兩者遺傳根底相似,它們的親緣關(guān)系較近,并且這兩個(gè)品種田間表現(xiàn)也十分相似。朝天椒和美國鐵皮椒遺傳距離為0.85219,它們的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。從田間栽培上觀察,美國鐵皮椒椒型大,果皮厚,單果重遠(yuǎn)大于其它品種,但整株結(jié)果較其它品種少;朝天椒果實(shí)較小,椒型整齊,果皮顏色鮮紅,整株結(jié)果密度大,是當(dāng)?shù)赝茝V的主要品種之一。 3.篩選出應(yīng)用于干用辣
29、椒種子純度鑒定的引物和建立了雜交種子的RAPD指紋圖譜。從25條引物中篩選出了用于干用辣椒種子純度鑒定的引物5條:其中包括偏父型引物S290、偏母型引物S2069、互補(bǔ)型引物S8、特異型引物S1120及缺失型引物S5。利用互補(bǔ)型引物S8鑒定干用辣椒雜交種純度,其結(jié)果是50粒供試種子中有2粒其它種子混雜,從而獲得該種子純度為96。采用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA)分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)內(nèi)蒙古開魯縣種植的30個(gè)國內(nèi)外干用辣椒品種進(jìn)行遺傳多樣性鑒定研究,分析這些品種之間的親緣關(guān)系,進(jìn)行種質(zhì)資源遺傳多樣性分析和雜交種純度鑒定,旨在為種質(zhì)資源鑒定和雜交育種提供一定理論依據(jù)。本研究結(jié)果如下: 1.建立了干用辣椒RAPD分析的技術(shù)體系:引物0.8mol/L、dNTPs0.6mmol/L、MgC122.5mmol/L、1.5UTaq聚合酶、60ngDNA模板為干用辣椒品種RAPD反響的最正確配比。反響程序?yàn)椋?4預(yù)變性4min,94變性1min,36退火1min,72延伸2min,共40個(gè)循環(huán),最后72延伸5min。 2.從200個(gè)隨機(jī)引物中篩選出25個(gè)引物,共擴(kuò)增出257條譜帶,其中多態(tài)性譜帶167條,多態(tài)性程度為64.98。每個(gè)引物可以擴(kuò)增出212條多態(tài)
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