微生物業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)2302

1、臨床微生物檢驗(yàn)臨床微生物檢驗(yàn)仁和醫(yī)院檢驗(yàn)科蒲燕馬世原一血液與骨髓標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)v1結(jié)果報(bào)告：當(dāng)人體由于感染細(xì)菌或真菌播散到血液引起菌血癥，如處理不及時(shí)就會(huì)發(fā)展為毒血癥或敗血癥，其死亡率隨不同程度而增加，因此微生物室應(yīng)及時(shí)將血培養(yǎng)結(jié)果通知臨床醫(yī)生，為做到快速，可采取血培養(yǎng)分級(jí)報(bào)告制度。v（1）一級(jí)報(bào)告：血培養(yǎng)如在24h和48h內(nèi)未生長(zhǎng)，可發(fā)初步報(bào)告，報(bào)告血培養(yǎng)24h未生長(zhǎng)或48h未生長(zhǎng)。v（2）二級(jí)報(bào)告：將可疑生長(zhǎng)的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)肉湯轉(zhuǎn)種血平板及巧克力平板，并做直接非標(biāo)準(zhǔn)抗菌藥敏實(shí)驗(yàn)，經(jīng)68h培養(yǎng)后，將結(jié)果及時(shí)通知臨床醫(yī)生，主要報(bào)告高敏的抗菌藥物。v（3）三級(jí)報(bào)告：傳統(tǒng)方法培養(yǎng)7d，自動(dòng)血培養(yǎng)儀培養(yǎng)5

2、d，仍無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)者，報(bào)告無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。上述轉(zhuǎn)種平板上生長(zhǎng)出單個(gè)菌落，應(yīng)立即完成鑒定及標(biāo)準(zhǔn)化的藥敏試驗(yàn)，并發(fā)出正式的細(xì)菌檢驗(yàn)報(bào)告單，包括菌種名和藥敏報(bào)告。此兩種均為最終報(bào)告。臨床意義v隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，廣譜、超廣譜抗生素的使用，耐藥菌株顯著增加，血培養(yǎng)中分離的各種微生物種類也顯著增加，常見(jiàn)病原菌如下：v（1）金黃色葡萄球菌：人類感染的最主要的葡萄球菌，金葡菌是該屬產(chǎn)毒素和毒力最強(qiáng)的菌種。由于抗生素的大量使用導(dǎo)致耐甲氧西林或苯唑西林的金葡菌（mrsa）顯著增多v（2）凝固酶陰性的葡萄球菌（cns)：該菌為人類正常寄生菌其中表皮葡萄球菌主要引發(fā)醫(yī)源性感染。如關(guān)節(jié)術(shù)后，外科創(chuàng)傷，泌尿道和靜脈導(dǎo)管感染等

3、。 v（3）a群鏈球菌：該菌有較強(qiáng)的侵襲力，能產(chǎn)生多種外酶和外毒素，是引起化膿性感染的主要菌種，致病力強(qiáng)，也是引起敗血癥的主要菌株。v（4）b群鏈球菌：又稱無(wú)乳鏈球菌。該菌是正常寄居于婦女陰道和人體腸道，帶菌率高達(dá)30%左右，因此該菌是引起新生兒敗血癥的主要病原菌。v（5）肺炎鏈球菌：該菌存在于正常人群口腔、鼻咽部、v屬正常菌群，帶有莢膜的肺炎鏈球菌菌株在細(xì)菌的v侵襲力上起重要作用，當(dāng)機(jī)體抵抗力下降，該菌v引起大葉性肺炎、支氣管炎。v（6）草綠色鏈球菌：此類鏈球菌常定居 在扁桃體、鼻咽或牙齦中可發(fā)生局部感染， 該菌也是亞急性心內(nèi)膜炎的主要病原菌。肺炎鏈球菌肺炎鏈球菌及藥敏及藥敏v（7）腸球菌：

4、近年來(lái)該菌是引起急性心內(nèi)膜炎的主要病原菌之一，腸球菌的耐藥性較高，特別是慶大霉素的耐藥菌株，用青霉素類抗菌藥物治療時(shí)，不能和氨基糖苷類聯(lián)合用藥。v（8）：產(chǎn)單核李斯特菌該菌是新生兒敗血癥的主要病原菌之一，常從產(chǎn)道感染，死亡率很高。v（9）腦膜炎奈瑟菌：引起腦膜炎的病原菌，一般先侵入鼻咽部，引起上呼吸道感染，進(jìn)而侵入血流，造成菌血癥和心內(nèi)膜炎。v（10）：革蘭陰性桿菌：主要有：1.沙門(mén)菌、大腸埃希菌、沙雷菌、克雷伯菌。其中沙門(mén)菌所致疾病主要有傷寒和副傷寒。大腸埃希菌和克雷伯菌是質(zhì)粒介導(dǎo)的產(chǎn)超廣譜b-內(nèi)酰胺酶（esbls)的代表菌種，該菌株能分解b-內(nèi)酰胺環(huán)而導(dǎo)致b-內(nèi)酰胺類藥物失效。2.非發(fā)酵革

5、蘭陰性桿菌常見(jiàn)有銅綠假單胞菌，、不動(dòng)桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌等。銅綠是發(fā)生燒傷后敗血癥的最常見(jiàn)病原菌，也是院內(nèi)感染的主要病原菌。不動(dòng)桿菌是機(jī)會(huì)致病菌，其中最常見(jiàn)的是鮑曼不動(dòng)桿菌，其耐藥情況不容樂(lè)觀。常成全部耐藥既泛耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌給臨床治療帶來(lái)困難。v（11）真菌：真菌菌血癥常發(fā)生于重癥疾病的晚期，特別是應(yīng)用廣譜抗生素和皮質(zhì)激素后，由于機(jī)體免疫功能低下，在原發(fā)病灶加重的同時(shí)，常發(fā)生繼發(fā)感染及二重感染，任何部位，尤其是正中靜脈插管或留置導(dǎo)管均可引起真菌感染，分離到的真菌以念珠菌為主，特別是白色念珠菌。當(dāng)血培養(yǎng)中分離到曲霉菌，怒能輕易判斷為污染菌，曲霉菌菌血癥近年來(lái)有增加的趨勢(shì)，常由于敗血癥引起系統(tǒng)

6、性感染，死亡率可達(dá)95%以上。v（12）：厭氧菌：研究資料表明，厭氧菌引起的血液感染占菌血癥的20%。厭氧菌引起的口腔感染、牙周感染、咽頰炎等是導(dǎo)致心內(nèi)膜炎的原發(fā)病灶，最常見(jiàn)的有消化鏈球菌、擬桿菌、梭桿菌、丙酸桿菌等。二、尿液標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)v尿液的細(xì)菌培養(yǎng)一般為中段尿培養(yǎng)加菌落計(jì)數(shù)。它對(duì)于泌尿道感染的診斷有重要的價(jià)值。正常的尿液是無(wú)菌的，從膀胱穿刺取出的尿也應(yīng)是無(wú)菌的，而外尿道有正常的菌群寄生，標(biāo)本的采集必須無(wú)菌操作。中段尿的采集應(yīng)先從清潔外陰及尿道口周圍，自然排尿，讓尿流不間斷，截留中段尿，置于無(wú)菌大口容器或尿運(yùn)送杯中，不少于1ml。v此法必須告訴患者。v1.結(jié)果報(bào)告v常規(guī)尿培養(yǎng)48h后未生

7、長(zhǎng)可報(bào)告“培養(yǎng)兩天無(wú)菌生長(zhǎng)”。v如有細(xì)菌生長(zhǎng)報(bào)告鑒定結(jié)果和藥敏試驗(yàn)，并報(bào)告菌落計(jì)數(shù)。v2.臨床意義：v中段尿污染細(xì)菌不會(huì)太多，如果同份標(biāo)本中檢出3種以上的不同微生物，應(yīng)認(rèn)為被污染。一般認(rèn)為尿標(biāo)本中革蘭陰性菌菌落計(jì)數(shù)大于105 cfu/ml、革蘭陽(yáng)性菌菌落計(jì)數(shù)小于104 cfu/ml才有意義。但菌落計(jì)數(shù)低于這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)并不能排除尿路感染，主要見(jiàn)于一下情況：1.應(yīng)用抗菌藥物，尿中細(xì)菌繁殖收到抑制。2.病原菌發(fā)育要求條件高。3.尿頻時(shí)，膀胱內(nèi)細(xì)菌停留時(shí)間短而細(xì)菌數(shù)量少。4.大量輸液或使用利尿劑使尿液稀釋。5.尿液ph5.0或8.5，細(xì)菌發(fā)育受阻。6.采尿時(shí)外陰部的消毒劑混入尿中。v最常見(jiàn)的泌尿道感染部位

8、是膀胱和尿道。無(wú)論男性或女性患者，泌尿道感染可能是無(wú)癥狀的、急性或慢性的。在各種泌尿道感染中，常見(jiàn)的病原菌如下：v（1）：金黃色葡萄球菌：尿路感染的常見(jiàn)病原菌，其致病力強(qiáng)且近年來(lái)耐甲氧西林或耐苯唑西林的金葡菌比例增多，mrsa常呈多重耐藥。v（2）凝固酶陰性葡萄球菌：其中腐生葡萄球菌為凝固酶陰性葡萄球菌，是尿路感染中最常見(jiàn)的葡萄球菌，尤其是年輕婦女的尿路感染。表皮葡萄球菌也是常見(jiàn)的尿路感染菌。v（3）腸球菌：常引起尿路感染、尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎等。絕大多數(shù)為糞腸球菌。v（4）革蘭陰性桿菌：包括大腸埃希菌、克雷伯菌、變形桿菌、腸桿菌、普羅威登菌、沙雷菌、不動(dòng)桿菌、假單胞菌等。其中大腸埃希菌是

9、尿路感染中最常見(jiàn)的病原菌。v（5）結(jié)核桿菌：尿培養(yǎng)分離到結(jié)核桿菌是診斷腎結(jié)核的依據(jù)之一，本病多見(jiàn)于2040歲，男性多于女性。v（6）淋病奈瑟菌：淋病的病原菌，是性傳播疾病發(fā)病率最高的，約占性病的70%。v（7）真菌：尿培養(yǎng)中分離到的真菌主要是各種假絲酵母菌，大多數(shù)念珠菌尿的患者為無(wú)癥狀的。v（8）陰道加德納菌：近年來(lái)發(fā)現(xiàn)陰道加德納菌可以引起尿路感染、腎周圍膿腫和膀胱炎。該菌主要通過(guò)性傳播。三、糞標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)v正常人的腸道內(nèi)棲居大量的不同種類的微生物，包括大量的厭氧菌和大腸埃希菌、腸桿菌、變形桿菌、糞產(chǎn)堿桿菌等，組成人類健康的體內(nèi)微生物的生態(tài)環(huán)境。這些細(xì)菌一般不致病，一旦倡導(dǎo)發(fā)生病理改變或抗生

10、素的大量使用，就可能導(dǎo)致菌群失調(diào)，引發(fā)疾病。v1.結(jié)果報(bào)告：v由于糞便中存在大量細(xì)菌，有多種細(xì)菌可以引起腹瀉，而且不少細(xì)菌要求特殊的培養(yǎng)，在分離糞便中的致病菌時(shí)，如未提供不要的生長(zhǎng)條件，培養(yǎng)陰性結(jié)果，不應(yīng)該報(bào)告“無(wú)致病菌”或“未檢出致病菌”。目前常規(guī)以ss培養(yǎng)基（平板）和中國(guó)藍(lán)平板分離分辨中的致病菌，所以陰性報(bào)告為“無(wú)沙門(mén)菌生長(zhǎng)和志賀菌生長(zhǎng)”。如有致病菌生長(zhǎng)報(bào)告鑒定結(jié)果和藥敏試驗(yàn)。v糞便細(xì)菌培養(yǎng)檢驗(yàn)報(bào)告單：v2.臨床意義：糞便培養(yǎng)中常見(jiàn)的病原菌有：志賀菌屬、沙門(mén)菌屬、致病性大腸埃希菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、類志賀鄰單胞菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、金黃色葡萄球菌、結(jié)核分枝桿菌、彎曲菌屬、假單胞菌屬。

11、v（1）志賀菌屬：包括a群（痢疾）、b群（福氏）、c群（鮑氏）、d群（宋內(nèi)）。該菌主要引起細(xì)菌性痢疾，癥狀主要包括腹部痙攣、腹痛、腹瀉、里急后重等。其中福氏和宋內(nèi)引起感染的比例最高。v（2）沙門(mén)菌屬：該菌蓋然臨床表現(xiàn)為3種類型：1.腸熱癥。2.敗血癥。3.食物中毒。v（3）致病性大腸埃希菌：引起腸道感染的大腸埃希菌主要有4種類型，即產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌（etec)、致病大腸埃希菌（epec）、侵襲性大腸埃希菌（eiec)和出血性大腸埃希菌（ehec)。etec是發(fā)展中國(guó)家兒童急性腹瀉和旅行者腹瀉的常見(jiàn)致病菌。v（4）霍亂弧菌：根據(jù)具體o抗原不同科分為o1群和非o1群霍亂弧菌。 o1群霍亂弧菌在小

12、腸內(nèi)產(chǎn)生大量的腸毒素，作用于小腸黏膜，分泌大量腸液，表現(xiàn)為腹瀉、脫水、酸中毒，如不及時(shí)搶救，患者可在數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡。非o1群霍亂弧菌科一起感染性腹瀉，近年來(lái)也不斷被人們所重視，如o139血清型可引起累世霍亂的急性脫水性腹瀉。v（5）副溶血弧菌：該菌是海洋微生物，可污染食品引起食物中毒，主要引起人類急性胃腸炎表現(xiàn)為腹部絞痛、腹瀉、糞便呈水樣，類似霍亂，或糞便中帶血及黏凍，常被誤診為痢疾。50%患者有嘔吐，嚴(yán)重病例有失水癥狀，甚至大量失水而至循環(huán)衰竭。v（6）類志賀鄰單胞菌：該菌引起腸道內(nèi)感染，一般表現(xiàn)為腹瀉，與進(jìn)食生水和海產(chǎn)品有關(guān)，好發(fā)于溫暖的季節(jié)。v（7）氣單胞菌屬：該菌為追中常居菌，可引起人類

13、的腸道感染，表現(xiàn)為腹瀉。v（8）小腸結(jié)腸耶爾森菌：該菌在4條件可生長(zhǎng)并產(chǎn)生毒素，因此易引起食物中毒，多見(jiàn)于小兒，引起腹瀉、腹痛、發(fā)熱等癥狀。v（9）金黃色葡萄球菌：該菌易引起食物中毒，主要由于攝入含有葡萄球菌腸毒素的食物所致。金葡菌還可引起偽膜性腸炎。v（10）艱難芽胞梭菌：該菌是抗菌藥物相關(guān)性腹瀉的主要病原菌，感染后的臨床癥狀可從輕度腹瀉到致命性偽膜腸炎。v（11）結(jié)核分枝桿菌：該菌主要引起腸結(jié)核。v（12）彎曲菌屬：主要包括空腸彎曲菌和結(jié)腸彎曲菌腸道病變程度不一，輕的變現(xiàn)為短暫、自限性腸炎。重的表現(xiàn)為伴有嚴(yán)重腹瀉、腹痛、發(fā)熱和肌痛的爆發(fā)性小腸結(jié)腸炎。v（13）假單胞菌屬：主要為銅綠假單胞菌

14、，是醫(yī)院內(nèi)感染的主要病原菌之一，還可引起嬰兒嚴(yán)重的流行性腹瀉。四、痰液及支氣管分泌物的細(xì)菌培養(yǎng)v正常人的下呼吸道是無(wú)菌的，分泌物經(jīng)上呼吸道排出時(shí)常受該處的正常菌群的污染，如草綠色鏈球菌、奈瑟菌等。v痰標(biāo)本應(yīng)在醫(yī)護(hù)人員指導(dǎo)下留取標(biāo)本，告訴患者先用冷開(kāi)水漱口清洗咽喉，咳出痰液，置于廣口容器中，常規(guī)培養(yǎng) 2h送到實(shí)驗(yàn)室立即接種。痰液細(xì)菌培養(yǎng)檢驗(yàn)報(bào)告單1.結(jié)果報(bào)告：痰培養(yǎng)未檢出致病菌的報(bào)告“正常菌群生長(zhǎng)”。如有致病菌生長(zhǎng)報(bào)告鑒定結(jié)果和藥敏試驗(yàn)，并且報(bào)告細(xì)菌軍中應(yīng)注明各自數(shù)量和比例情況。v2.臨床意義：痰培養(yǎng)對(duì)于呼吸系統(tǒng)感染的診斷有重要意義，由于上呼吸道存在正常菌群，因此必須要區(qū)分是致病菌還是污染菌。v

15、（1）肺炎鏈球菌：該菌主要引起大葉性肺炎和支氣管肺炎，近年來(lái)耐青霉素的肺炎鏈球菌（prp)及多重耐藥菌增加。v（2）流感嗜血桿菌：該菌可引起人類呼吸道感染，也可隨血液入侵組織內(nèi)部，導(dǎo)致腦膜炎、關(guān)節(jié)膿腫。v（3）百日咳鮑特菌：是小兒百日咳的病原菌，可通過(guò)飛沫傳染，致病物質(zhì)為不耐熱的外毒素和耐熱的內(nèi)毒素。v（4）a群鏈球菌：該菌有較強(qiáng)的侵襲力，能產(chǎn)生多種胞外酶和外毒素。v（5）結(jié)核分枝桿菌：引起肺結(jié)核的病原菌，主要由呼吸道入侵導(dǎo)致感染和發(fā)病。該菌抵抗力強(qiáng)，分解和患者是主要傳染源。結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌的抗酸染色的抗酸染色v（6）白喉棒狀桿菌：是急性呼吸道傳染病白喉的病原菌，該菌常見(jiàn)從呼吸道入侵，

16、最初侵犯扁桃體、咽部、咽喉部，形成灰白色的偽膜。產(chǎn)生的外毒素可損害心肌和神經(jīng)系統(tǒng)，出現(xiàn)白喉的各種臨床癥表現(xiàn)，死亡率高。v（7）卡他莫拉菌：上呼吸道的正常菌群，近年來(lái)證實(shí)本菌可引起中耳炎、肺炎、心內(nèi)膜炎、和腦膜炎等。v（8）嗜肺軍團(tuán)菌：是軍團(tuán)菌病的病原菌，通過(guò)空氣傳播進(jìn)入肺部，可表現(xiàn)為肺部感染、發(fā)熱、頭痛、肌肉痛等。v（9）腦膜炎奈瑟菌：主要引起人類流行性腦膜炎。v（10）肺炎克雷伯菌：人類呼吸道的常居菌，是較為常見(jiàn)的條件致病菌，可引起肺炎等。v（11）假單胞菌屬：是院內(nèi)感染的主要病原菌之一，當(dāng)機(jī)體抵抗力下降時(shí)，如代謝疾病、血液病和惡性腫瘤。v（12）諾卡菌：主要有星諾卡菌和巴西諾卡菌。星形諾卡

17、菌通過(guò)呼吸道引起人類的原發(fā)性、化膿性肺部感染。v（13）酵母樣真菌：最常見(jiàn)為白色念珠菌，當(dāng)機(jī)體抵抗力下降時(shí)，可稱為致病菌侵入呼吸道引起感染，為常見(jiàn)的肺真菌病。v（14）絲狀真菌：常見(jiàn)的曲霉菌和毛霉菌。人通過(guò)吸入空氣中曲霉菌孢子而感染故以肺部曲霉菌多見(jiàn)。最常見(jiàn)的毛霉病是鼻腦毛霉病，有的患者可發(fā)生飛鶴播散性毛霉感染。此病一旦發(fā)生，病情急，進(jìn)展快，死亡率很高。五、膿液標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)v組織或器官的化膿性感染，其病原菌的來(lái)源可分為兩類：v一是內(nèi)源性。感染源是炎癥局部器官的正常菌群，由于損傷等因素造成正常菌群進(jìn)入無(wú)菌狀態(tài)的組織中，發(fā)生感染。v二是外源性。感染源是存在于人體外部自然界的微生物，由于外傷和直接

18、接觸，外界微生物通過(guò)人體表面進(jìn)入人體，造成感染。v1.結(jié)果報(bào)告：v如培養(yǎng)4872h后對(duì)無(wú)菌部位的感染，從膿液或分泌物中分離到細(xì)菌一般均有臨床意義，按分離鑒定的菌種報(bào)告細(xì)菌名稱和藥敏鑒定結(jié)果。v2.臨床意義。v眼分泌物培養(yǎng)常見(jiàn)的病原菌有金黃色葡萄球菌、a群鏈球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、淋病奈瑟菌、銅綠假單胞菌和真菌等。若有此類細(xì)菌生長(zhǎng)，提示有眼部感染。v耳拭子培養(yǎng)常見(jiàn)的病原菌有金黃色葡萄球菌、a群鏈球菌、卡他莫拉菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌和真菌等，這些細(xì)菌可引起耳部感染如中耳炎、外耳道感染等。v鼻咽拭子培養(yǎng)幾乎沒(méi)有無(wú)菌的，分離出的細(xì)菌不一定就是與疾病有關(guān)的細(xì)菌，因此要重視報(bào)告中的細(xì)菌數(shù)量。常見(jiàn)的病原菌有金黃色葡萄球菌、a群鏈球菌、肺炎鏈球菌、表皮葡萄球菌、白喉棒狀桿菌、結(jié)核分枝桿菌、腦膜炎奈瑟菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌和真菌等，可引起肺部感染、細(xì)菌性鼻炎、鼻腔膿腫等。v2.臨床意義：所有的創(chuàng)傷均有細(xì)菌污染，時(shí)候發(fā)生感染，取決于創(chuàng)傷的大小、組織破壞情況、染菌數(shù)量與種類、處理過(guò)程、機(jī)體免疫力和抗生素的應(yīng)用等多種因素。v（1）金黃色葡萄球菌：最常見(jiàn)人類化膿性感染的致病菌，可引起癤、癰、皮下軟組織膿腫、外科切口感染，也可引起肺炎、偽膜性腸