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文檔簡(jiǎn)介

1、第一章第一章菌種的制造菌種的制造l 菌種的制造是食用菌栽培的前菌種的制造是食用菌栽培的前提和重要環(huán)節(jié),菌種的優(yōu)劣直接關(guān)提和重要環(huán)節(jié),菌種的優(yōu)劣直接關(guān)系到食用菌的產(chǎn)量和質(zhì)量,甚至關(guān)系到食用菌的產(chǎn)量和質(zhì)量,甚至關(guān)系到消費(fèi)的成敗。系到消費(fèi)的成敗。 l l 菌種是指經(jīng)人工培育并可供進(jìn)一步繁衍或栽培運(yùn)用的食用菌菌絲體,經(jīng)常包括供菌絲體生長(zhǎng)的基質(zhì)在內(nèi),共同組成繁衍資料。 食用菌的菌種類型主要分固體菌種和液體菌種兩類。我國(guó)目前食用菌栽培中所用的菌種絕大部分為固體菌種,液體菌種尚未大面積運(yùn)用。 食用菌的菌種分三級(jí),即母種、原種和栽培種。食用菌的菌種分三級(jí),即母種、原種和栽培種。母種是具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培育物

2、,也稱一級(jí)種或母種是具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培育物,也稱一級(jí)種或試管種。試管種。原種是由母種轉(zhuǎn)接到木屑、棉籽皮、麥草、谷粒等為原種是由母種轉(zhuǎn)接到木屑、棉籽皮、麥草、谷粒等為主的培育基上擴(kuò)展培育而成的菌絲體純培育物,也主的培育基上擴(kuò)展培育而成的菌絲體純培育物,也稱二級(jí)種。稱二級(jí)種。栽培種是由原種轉(zhuǎn)接、擴(kuò)展到一樣或類似的培育基上栽培種是由原種轉(zhuǎn)接、擴(kuò)展到一樣或類似的培育基上培育而成的菌絲體純培育物,直接運(yùn)用于消費(fèi),也培育而成的菌絲體純培育物,直接運(yùn)用于消費(fèi),也稱三級(jí)種。稱三級(jí)種。 l通常分別或購(gòu)買的母種數(shù)量有限,通常分別或購(gòu)買的母種數(shù)量有限,難以滿足消費(fèi)需求,因此,必需難以滿足消費(fèi)需求,因此,必需進(jìn)展

3、擴(kuò)展繁衍。進(jìn)展擴(kuò)展繁衍。一、培育基的制備一、培育基的制備一常用的母種培育基配方用量一常用的母種培育基配方用量/1000 ml 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培育基馬鈴薯葡萄糖瓊脂培育基PDA 馬鈴薯去皮馬鈴薯去皮200 g, 葡萄糖葡萄糖 20 g, 瓊脂瓊脂 18-20 g,pH值自然。值自然。 二母種培育基的配制二母種培育基的配制 去皮馬鈴薯去皮馬鈴薯200克,切成克,切成1cm見(jiàn)方的小塊或見(jiàn)方的小塊或2 mm厚的薄片,加厚的薄片,加水約水約1000 ml煮沸,再用文火煮煮沸,再用文火煮2030 min,并適當(dāng)攪拌,并適當(dāng)攪拌,用四層或八層預(yù)濕的紗布過(guò)濾,取濾液并加水至用四層或八層預(yù)濕的紗布過(guò)濾,取濾液

4、并加水至1000 ml。 向?yàn)V液中參與瓊脂和葡萄糖,小火加熱,攪拌至瓊脂完全溶化。向?yàn)V液中參與瓊脂和葡萄糖,小火加熱,攪拌至瓊脂完全溶化。分裝試管。分裝試管。18 mm180 mm或或20 mm200 mm的玻璃試管,分的玻璃試管,分裝量掌握在試管長(zhǎng)度的裝量掌握在試管長(zhǎng)度的1/4-1/5,原那么上是擺放成斜面后,原那么上是擺放成斜面后,斜面的長(zhǎng)度為試管長(zhǎng)度的斜面的長(zhǎng)度為試管長(zhǎng)度的1/2-2/3。塞棉塞。塞棉塞。 母種培育基滅菌時(shí),需用1.051.1 kg/cm2的壓強(qiáng),溫度為121,滅菌堅(jiān)持12130 min。母種培育基制造流程母種培育基制造流程1. 分裝試管分裝試管 2. 塞棉塞塞棉塞 3.

5、 打捆打捆 4. 滅菌滅菌 5. 擺斜面擺斜面二、母種的轉(zhuǎn)接二、母種的轉(zhuǎn)接母種轉(zhuǎn)接,也稱轉(zhuǎn)管、母種的繼代培育。母種轉(zhuǎn)接,也稱轉(zhuǎn)管、母種的繼代培育。由于分別或引進(jìn)的原始母種數(shù)量有限,不能滿由于分別或引進(jìn)的原始母種數(shù)量有限,不能滿足消費(fèi)所需,因此,需進(jìn)展擴(kuò)展培育,通常原足消費(fèi)所需,因此,需進(jìn)展擴(kuò)展培育,通常原始母種允許擴(kuò)展轉(zhuǎn)接始母種允許擴(kuò)展轉(zhuǎn)接次。次。母種的轉(zhuǎn)管次數(shù)不宜過(guò)多,否那么會(huì)降低菌種母種的轉(zhuǎn)管次數(shù)不宜過(guò)多,否那么會(huì)降低菌種的生活力,影響栽培效果。不具備條件和技術(shù)的生活力,影響栽培效果。不具備條件和技術(shù)的部門不應(yīng)擴(kuò)接母種。的部門不應(yīng)擴(kuò)接母種。接種室接種室紫外燈紫外燈 2. 日光燈日光燈 3.

6、 任務(wù)臺(tái)任務(wù)臺(tái) 4. 凳子凳子 5. 瓶架瓶架 6. 窗戶窗戶 7. 拉門拉門 8. 衣帽衣帽鉤鉤接種箱單位:接種箱單位:cmcm母種的轉(zhuǎn)接母種的轉(zhuǎn)接三培育三培育 菌種培育關(guān)鍵是控制好環(huán)境的溫度、濕度、菌種培育關(guān)鍵是控制好環(huán)境的溫度、濕度、空氣和光線等條件,其中以溫度最為重要??諝夂凸饩€等條件,其中以溫度最為重要。 空氣相對(duì)濕度堅(jiān)持在空氣相對(duì)濕度堅(jiān)持在60%左右,培育室的濕度左右,培育室的濕度過(guò)低時(shí),可適當(dāng)噴水,濕度過(guò)高時(shí),應(yīng)加強(qiáng)過(guò)低時(shí),可適當(dāng)噴水,濕度過(guò)高時(shí),應(yīng)加強(qiáng)通風(fēng)排濕,或向地面灑生石灰吸潮,以防雜通風(fēng)排濕,或向地面灑生石灰吸潮,以防雜菌繁殖污染棉塞或培育基;同時(shí)避光并堅(jiān)持菌繁殖污染棉塞

7、或培育基;同時(shí)避光并堅(jiān)持空氣新穎,從而使菌絲生長(zhǎng)強(qiáng)壯。空氣新穎,從而使菌絲生長(zhǎng)強(qiáng)壯。 2-3d后,檢查菌絲的生長(zhǎng)及雜菌污染情況,后,檢查菌絲的生長(zhǎng)及雜菌污染情況,假設(shè)在遠(yuǎn)離接種塊的培育基外表出現(xiàn)獨(dú)立的假設(shè)在遠(yuǎn)離接種塊的培育基外表出現(xiàn)獨(dú)立的小菌落或奶油狀小點(diǎn),即為污染,應(yīng)立刻淘小菌落或奶油狀小點(diǎn),即為污染,應(yīng)立刻淘汰;汰; 普通母種經(jīng)普通母種經(jīng)7-10d 可長(zhǎng)滿培育基,然后用于進(jìn)可長(zhǎng)滿培育基,然后用于進(jìn)一步擴(kuò)繁或置一步擴(kuò)繁或置4冰箱中冷藏備用。冰箱中冷藏備用。 四優(yōu)質(zhì)母種的普通規(guī)范四優(yōu)質(zhì)母種的普通規(guī)范菌種純粹,無(wú)雜菌污染。菌種純粹,無(wú)雜菌污染。菌絲潔白濃密,氣生菌絲量多。菌絲潔白濃密,氣生菌絲量

8、多。菌絲不老化變色,培育基不萎縮失菌絲不老化變色,培育基不萎縮失水。水。菌齡要適宜,普通室溫保藏不超越菌齡要適宜,普通室溫保藏不超越15d,4下冷藏不超越下冷藏不超越3個(gè)月。個(gè)月。 菌種分別:采用無(wú)菌操作,將某種食用菌菌種分別:采用無(wú)菌操作,將某種食用菌從混雜的微生物群體中分別出來(lái)進(jìn)展純從混雜的微生物群體中分別出來(lái)進(jìn)展純培育,從而獲得純菌絲體的方法,稱為培育,從而獲得純菌絲體的方法,稱為菌種分別,分別所得的純菌絲體即為原菌種分別,分別所得的純菌絲體即為原始母種。始母種。根據(jù)分別資料的不同,菌種分別的方法可根據(jù)分別資料的不同,菌種分別的方法可分為三類,即孢子分別法、組織分別法分為三類,即孢子分別

9、法、組織分別法和基內(nèi)菌絲分別法。和基內(nèi)菌絲分別法。 組織分別組織分別 組織分別是指在雙核菌絲的組織體上切取一組織分別是指在雙核菌絲的組織體上切取一塊組織,使其在培育基上萌生而獲得純菌絲塊組織,使其在培育基上萌生而獲得純菌絲體的方法,屬于無(wú)性繁衍。體的方法,屬于無(wú)性繁衍。 組織分別法可分為子實(shí)體組織分別、菌核組組織分別法可分為子實(shí)體組織分別、菌核組織分別和菌索組織分別??椃謩e和菌索組織分別。 組織分別的特點(diǎn)組織分別的特點(diǎn)簡(jiǎn)單易行簡(jiǎn)單易行 組織分別取材廣泛,操作簡(jiǎn)便,組織分別取材廣泛,操作簡(jiǎn)便,分別勝利率高。分別得到的菌種經(jīng)出菇分別勝利率高。分別得到的菌種經(jīng)出菇實(shí)驗(yàn)后可用于消費(fèi)。實(shí)驗(yàn)后可用于消費(fèi)。

10、子實(shí)體組織分別的方法(1) 種菇的選擇 (2) 接種場(chǎng)地的消毒 同母種的轉(zhuǎn)接。留意不要熏蒸和用紫外線照射種菇。(3) 種菇的外表消毒 普通用75%酒精棉球擦拭即可。四、孢子分別 孢子是食用菌的有性繁衍單位,能自動(dòng)從成熟的子實(shí)體上彈射出來(lái)。 孢子分別法是指在無(wú)菌條件下,使食用菌產(chǎn)生的孢子在適宜的培育基上萌生,長(zhǎng)成菌絲體而獲得純菌種的方法。 孢子分別法的優(yōu)點(diǎn)孢子分別法的優(yōu)點(diǎn)1有性孢子具有雙親的遺傳特性,變異性大,有性孢子具有雙親的遺傳特性,變異性大,是選育新菌株和雜交育種的好資料,可供選是選育新菌株和雜交育種的好資料,可供選擇優(yōu)良菌株的時(shí)機(jī)較多。擇優(yōu)良菌株的時(shí)機(jī)較多。2孢子的生命力強(qiáng),所得菌種生活

11、力旺盛。孢子的生命力強(qiáng),所得菌種生活力旺盛。因此,又常被用作菌種復(fù)壯的手段。因此,又常被用作菌種復(fù)壯的手段。分別到的菌株要經(jīng)過(guò)出菇實(shí)驗(yàn)才干確定其能否分別到的菌株要經(jīng)過(guò)出菇實(shí)驗(yàn)才干確定其能否好的菌種。好的菌種。孢子分別分為單孢分別法和多孢分別法兩孢子分別分為單孢分別法和多孢分別法兩種。種。 對(duì)于異宗結(jié)合的食用菌,大都采用多孢分對(duì)于異宗結(jié)合的食用菌,大都采用多孢分別法來(lái)獲得結(jié)實(shí)性菌種;別法來(lái)獲得結(jié)實(shí)性菌種; 單孢分別法主要運(yùn)用于菌株的挑選和雜交單孢分別法主要運(yùn)用于菌株的挑選和雜交育種等任務(wù)。育種等任務(wù)。二孢子分別的方法二孢子分別的方法 孢子的采集孢子的采集 整菇插種法整菇插種法 鐘罩法采集傘菌類孢

12、子鐘罩法采集傘菌類孢子 三角瓶鉤懸法三角瓶鉤懸法 菌褶貼附法采集孢子菌褶貼附法采集孢子1. 1. 菌褶或耳片菌褶或耳片 2. 2. 試管試管 3. 3. 培育基培育基 印模法采集孢子印模法采集孢子菌褶或耳片菌褶或耳片 2. 2. 試管試管 3. 3. 培育基培育基多孢分別法多孢分別法 多孢分別法是將多個(gè)孢子接種在同一培育多孢分別法是將多個(gè)孢子接種在同一培育基上,使其萌生,自在交配而獲得純菌種基上,使其萌生,自在交配而獲得純菌種的方法。的方法。 單孢分別法單孢分別法 單孢分別法是在采集到大量孢子的根底上,單孢分別法是在采集到大量孢子的根底上,經(jīng)過(guò)稀釋或運(yùn)用單孢分別器等方法,使孢子經(jīng)過(guò)稀釋或運(yùn)用單

13、孢分別器等方法,使孢子之間相互分開(kāi),各個(gè)孢子單獨(dú)萌生出菌絲而之間相互分開(kāi),各個(gè)孢子單獨(dú)萌生出菌絲而獲得純菌種的方法,常用于雜交育種和其它獲得純菌種的方法,常用于雜交育種和其它研討。研討。 原種由母種擴(kuò)展繁衍而成,主要用于制造栽培種,也可直接用于接種栽培袋。原種由母種擴(kuò)展繁衍而成,主要用于制造栽培種,也可直接用于接種栽培袋。 原種培育基常以谷粒、棉子殼、鋸木原種培育基常以谷粒、棉子殼、鋸木屑、蔗渣和糞草等天然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)作屑、蔗渣和糞草等天然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)作為主料,以麩皮、玉米粉、蔗糖及為主料,以麩皮、玉米粉、蔗糖及石膏等作為輔料,培育基配方種類石膏等作為輔料,培育基配方種類很多,有通用的,也有公用的很多

14、,有通用的,也有公用的, ,不同不同種類的食用菌應(yīng)選擇本身適宜的原種類的食用菌應(yīng)選擇本身適宜的原種培育基配方。種培育基配方。 原種的制備過(guò)程普通包括配料、裝瓶原種的制備過(guò)程普通包括配料、裝瓶 ( (袋袋) ) 、滅菌、接種、滅菌、接種、培育等工藝流程。培育等工藝流程。一、谷粒原種一、谷粒原種 谷粒原種是指以小麥、大麥、燕麥、高粱、谷子等為主谷粒原種是指以小麥、大麥、燕麥、高粱、谷子等為主要原料制備的菌種,其中以小麥最為常用。要原料制備的菌種,其中以小麥最為常用。 谷粒菌種具有菌絲生長(zhǎng)快、生活力強(qiáng)、播種速度快等優(yōu)谷粒菌種具有菌絲生長(zhǎng)快、生活力強(qiáng)、播種速度快等優(yōu)點(diǎn),但由于其營(yíng)養(yǎng)豐富,容易污染雜菌,

15、而且還要留意防點(diǎn),但由于其營(yíng)養(yǎng)豐富,容易污染雜菌,而且還要留意防止鼠害。止鼠害。一常用谷粒原種培育基配方一常用谷粒原種培育基配方 1麥粒培育基麥粒培育基 小麥或大麥、燕麥小麥或大麥、燕麥 98% 石膏粉或碳酸鈣石膏粉或碳酸鈣 2% 適用于大多數(shù)食用菌原種的消費(fèi),尤其適宜適用于大多數(shù)食用菌原種的消費(fèi),尤其適宜于雙孢蘑菇。于雙孢蘑菇。 二培育基的制造二培育基的制造 容器容器 菌種瓶或聚丙烯塑料袋菌種瓶或聚丙烯塑料袋制造過(guò)程制造過(guò)程 選定配方選定配方 谷粒預(yù)處置谷粒預(yù)處置 谷粒清水洗凈,浸泡谷粒清水洗凈,浸泡12 h左右稻谷需用水浸泡左右稻谷需用水浸泡23 h 加水,煮開(kāi)加水,煮開(kāi)小小火再煮火再煮2

16、030 min,使谷粒充分煮透,脹而不破,掰開(kāi)后無(wú)白心即可,用,使谷粒充分煮透,脹而不破,掰開(kāi)后無(wú)白心即可,用水冷卻后晾干外表水分。水冷卻后晾干外表水分。 拌料拌料 參與石膏粉或碳酸鈣并混勻參與石膏粉或碳酸鈣并混勻 分裝分裝 均勻裝料,松緊適度,約裝瓶身的均勻裝料,松緊適度,約裝瓶身的1/23/4。 封口封口 如用棉塞,還需用牛皮紙包扎瓶口。如用棉塞,還需用牛皮紙包扎瓶口。 母母種種擴(kuò)擴(kuò)接接為為原原種種五培育五培育 培育室的大小和床架數(shù)量應(yīng)根據(jù)消費(fèi)規(guī)模來(lái)培育室的大小和床架數(shù)量應(yīng)根據(jù)消費(fèi)規(guī)模來(lái)定。定。留意:適溫培育,對(duì)多數(shù)食用菌而言,可保留意:適溫培育,對(duì)多數(shù)食用菌而言,可保 持持2325定期檢

17、查雜菌。定期檢查雜菌。 二、木屑原種和棉籽皮原種二、木屑原種和棉籽皮原種 闊葉樹(shù)木屑或棉籽皮闊葉樹(shù)木屑或棉籽皮78%,米糠,米糠或麩皮或麩皮20%,蔗糖,蔗糖1%,碳酸鈣,碳酸鈣或石膏粉或石膏粉1%,含水量,含水量60%。 適宜于木腐菌菌絲的生長(zhǎng),為木腐菌適宜于木腐菌菌絲的生長(zhǎng),為木腐菌通用培育基。通用培育基。木屑和棉籽皮原種的制造過(guò)程木屑和棉籽皮原種的制造過(guò)程 先將蔗糖溶于水,其它原料混合干拌,再把先將蔗糖溶于水,其它原料混合干拌,再把水溶液倒入,攪拌均勻。水溶液倒入,攪拌均勻。裝瓶下松上實(shí);裝至瓶肩處;用錐形木棒在瓶或裝瓶下松上實(shí);裝至瓶肩處;用錐形木棒在瓶或袋的中央打一個(gè)洞。袋的中央打一

18、個(gè)洞。 打洞有三個(gè)方面的作用,一是能提高滅菌效果;二打洞有三個(gè)方面的作用,一是能提高滅菌效果;二是處理瓶袋下部的通氣問(wèn)題,有利于菌絲沿孔是處理瓶袋下部的通氣問(wèn)題,有利于菌絲沿孔洞向下蔓延,能加速菌絲生長(zhǎng);三是作接種穴用,洞向下蔓延,能加速菌絲生長(zhǎng);三是作接種穴用,能固定住菌種塊。能固定住菌種塊。4. 滅菌和接種同麥粒原種滅菌和接種同麥粒原種5. 培育培育 適溫下約適溫下約3040 d長(zhǎng)滿瓶袋,菌絲長(zhǎng)滿長(zhǎng)滿瓶袋,菌絲長(zhǎng)滿后,再繼續(xù)培育后,再繼續(xù)培育35 d。 優(yōu)質(zhì)原種的規(guī)范:優(yōu)質(zhì)原種的規(guī)范:1菌種純粹,無(wú)雜菌污染。菌種純粹,無(wú)雜菌污染。2菌絲潔白,不變色,不吐黃水。菌絲潔白,不變色,不吐黃水。3

19、菌絲粗壯,生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)。菌絲粗壯,生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)。4菌絲生活力強(qiáng),轉(zhuǎn)接到新培育基上后,吃料快。菌絲生活力強(qiáng),轉(zhuǎn)接到新培育基上后,吃料快。5培育基潮濕,與瓶壁緊貼而不干縮。培育基潮濕,與瓶壁緊貼而不干縮。6菌齡要適宜,普通室溫下保藏不超越菌齡要適宜,普通室溫下保藏不超越15 d,不能,不能有原基和幼菇出現(xiàn)有原基和幼菇出現(xiàn) 栽培種是把原種轉(zhuǎn)接到一樣或類似的培育栽培種是把原種轉(zhuǎn)接到一樣或類似的培育基上擴(kuò)展培育而成的,直接運(yùn)用于消費(fèi)栽基上擴(kuò)展培育而成的,直接運(yùn)用于消費(fèi)栽培。培。運(yùn)用量較大,不易長(zhǎng)期保管,因此制種的運(yùn)用量較大,不易長(zhǎng)期保管,因此制種的時(shí)間和數(shù)量必需根據(jù)消費(fèi)季節(jié)和消費(fèi)規(guī)模時(shí)間和數(shù)量必需根據(jù)消費(fèi)季節(jié)和消費(fèi)規(guī)模方案進(jìn)展。方案進(jìn)展。栽培種的容器和制造過(guò)程與原種的類似或栽培種的容器和制造過(guò)程與原種的類似或一樣,消費(fèi)量大時(shí)需求大型滅菌鍋。一樣,消費(fèi)量大時(shí)需求大型滅菌鍋。 大型滅菌鍋大型滅菌鍋二、接種二、接種 普通每瓶原種可擴(kuò)接栽培種

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