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1、Zn2+和Cd2+單獨(dú)及聯(lián)合作用對(duì)青蛤消化酶活性的影響摘 要 以酶學(xué)分析的方法研究了兩種金屬離子單獨(dú)及聯(lián)合作用 對(duì)青蛤蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶活力的影響,兩種金屬離子單獨(dú) 及聯(lián)合作用時(shí)的濃度分別設(shè)置為10mg/l、20mg/l、40mg/l和80mg/l, 染毒時(shí)間為4天。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,青蛤3種消化酶活力大小為淀粉 酶蛋白酶纖維素酶;在實(shí)驗(yàn)設(shè)置的染毒濃度范圍內(nèi),zn2+、cd2+單獨(dú)及聯(lián)合作用對(duì)青蛤的蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶活力均產(chǎn)生顯 著影響。其中,40mg/l的zn2+對(duì)蛋白酶有顯著的激活作用,3種較 高濃度的zn2+及2種中間濃度的zn2+cd2+對(duì)纖維素酶表現(xiàn)出顯著 的激活作用,其余的
2、均對(duì)青蛤的這3種消化酶表現(xiàn)為抑制作用,且 不同濃度的金屬離子對(duì)這3種消化酶的抑制作用表現(xiàn)出不同的變化 趨勢(shì)。關(guān)鍵詞金屬離子青蛤蛋白酶淀粉酶纖維素酶中圖分類號(hào):q5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:athe in dividual and comb ined effects of zn 2+a ndcd2+ to the activity of clam digestive en zymezha ng yujie, ni xiao ying, ying xuep ing(college of life and en viro nmen tal scie nces, wen zhouuni versity, wen z
3、hou, zhejia ng 325027)abstract en zymatic method for the an alysis of two metal io nsseparate and comb ined effects of clam protease, amylase andcellulase activity of the two separate and comb ined effectsof metal ion concen tratio ns were set at 10mg / I, 20mg / I, 40mg / I and80mg / I, exposure fo
4、r 4 days. the results show that clam three kinds ofdigestive en zymes amylase size proteasecellulase; set exposureconcen trati ons in the experimental range, zn2+, cd2+ separate andcombined effects of clam protease, amylase and cellulose enzymeactivitywerea sig ni fica nt impact. which, 40mg / l of
5、zn2+ sig nifica nt proteaseactivati on, three kinds of high concen trati ons of zn2+ and two kinds ofin termediate concen trati ons of zn2+ +cd2+ cellulase showed sig nifica nt activatio n, and the restare for the three clam showedinhibitionof digestive enzymes,and differe nt concen tratio ns of met
6、al ions in these three kinds of inhibiti on of digestive en zymes showed a differe nt trend.key words metal ions; clam; protease; amylase; cellulase青蛤,是一種常見的底棲貝類,具有很高的營養(yǎng)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值, 是我國南北沿海灘涂傳統(tǒng)養(yǎng)殖的主要貝類之一。自1990年室內(nèi)人工育苗獲得成功,有關(guān)青蛤人工育苗和養(yǎng)殖技術(shù)方面的研究比較活 躍,而其生理生化方面的報(bào)道相對(duì)較少。本文以青蛤?yàn)檠芯繉?duì)象, 探討兩種重金屬離子單獨(dú)及聯(lián)合作用對(duì)青蛤消化酶活力的影響,并 分析
7、了金屬離子對(duì)其消化酶的影響機(jī)制,以期為深入研究金屬離子 消化生理和潔凈養(yǎng)殖生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù),也為重金屬對(duì)青蛤毒理學(xué)的進(jìn)一步研究提供理論依據(jù)。1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)用的青蛤成體取自溫州靈昆養(yǎng)殖場(chǎng),選擇健康、大小較一致 的個(gè)體作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,平均殼長(zhǎng)3.41?.22cm,殼寬3.56?.25cm, 殼高1.98?.18cm。實(shí)驗(yàn)前青蛤成體先在海水中暫養(yǎng)兩天。1.2染毒處理實(shí)驗(yàn)用的藥品zncl2和cdcl22.5h2o均為分析純,實(shí)驗(yàn)濃度均 以金屬離子濃度計(jì)算。根據(jù)預(yù)備實(shí)驗(yàn)結(jié)果(zn2+對(duì)青蛤的96hlc50為160mg/l)以及變量一致原則,zn2+和cd2+單獨(dú)及聯(lián)合作用中濃 度梯度的設(shè)置為0、10、20、40、80mg/l。每個(gè)濃度35只青蛤,設(shè) 三組平行組并設(shè)對(duì)照組(實(shí)驗(yàn)室配制養(yǎng)殖水,鹽度約30%。)。每隔24h更換相應(yīng)濃度的溶液,移除代謝產(chǎn)生的糞便。實(shí)驗(yàn)期間不投餌、 不充氣。1.3酶活性測(cè)定取染毒4天后的青蛤活體,將其置冰盤內(nèi)解剖,取出肝胰腺,剔 除多余的組織塊,作為酶液制備的樣品。取大約1g濕重的上述樣 品,加入10倍體積(w
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