白芷化學(xué)成分研究

1、白芷化學(xué)成分研究                作者：趙興增，賈曉東 陳軍 王鳴 董云發(fā) 馮煦 【摘要】  目的研究白芷的化學(xué)成分。方法采用硅膠柱、RP-C18及Sephadex LH-20凝膠柱色譜法對白芷水溶性化學(xué)成份進(jìn)行分離，用理化性質(zhì)及波譜方法鑒定結(jié)構(gòu)。結(jié)果從白芷Angelica dahurica分離鑒定了5個化合物： 7-O-D-Apiofuranosyl-(16)-D-Glucopyranosyl-Scopoletin(xe

2、roboside)；aesculetin -6-O-D- apiofuranosyl-(16)-O-D- glucopyranoside； tomenin； isoscopolin ；Osmanthuside H。結(jié)論化合物15均首次從傘形科中分離得到。 【關(guān)鍵詞】  傘形科 白芷 化學(xué)成分Abstract：ObjectiveTo study the chemical constituents of Angelica dahuricaMethodsThe constituents were isolated and purified by silica gel, RP-18, and

3、 Sephadex LH-20 column chromatography. Their structures were identified by physiochemical properties and spectral analysisResultsFive compounds were isolated and identified as 7-O-D-Apiofuranosyl-(16)-D-Glucopyranosyl-Scopoletin， aesculetin-6-O-D-apiofuranosyl-(16)-O-D-glucopyranoside， tomenin， isos

4、copolin， Osmanthuside HConclusionCompound 1 to 5 were obtained from Umbeliferae for the first timeKey words：Umbeliferae；  Angelica dahurica；  Chemical constituent   白芷Angelica dahurica(Fisch. ex Hoffm.) Benth. Et Hook. f. var. formosana(Boiss.) Shan et Yuan為傘形科(Umbeliferae)當(dāng)歸屬(An

5、gelica)植物。白芷以根入藥，始載于神農(nóng)本草經(jīng)，列為中品。中國藥典各個版本均有收載。白芷具有散風(fēng)除濕、通竅止痛、消腫排膿之功效，用于感冒頭痛、鼻塞、鼻淵、牙痛、白帶異常、瘡瘍腫痛等病癥。白芷中的香豆素具有抗腫瘤、抗氧化、抗微生物、降壓等多種生物活性。前人已經(jīng)對白芷中脂溶性的香豆素類做了大量而深入的研究，但對其水溶性的化學(xué)成分研究甚少。本文通過對白芷水溶性部分的分離得到了6個苷類成分，通過多種理化方法及光譜學(xué)手段鑒定為7-O-D-Apiofuranosyl-(16)-D-Glucopyranosyl- Scopoletin； aesculetin-6-O-D-apiofuranosyl-(1

6、6)-O-D-glucopyranoside； tomenin； isoscopolin ； Osmanthuside H?；衔?5均為首次從傘形科中分離得到。1  器材Bruker AV-300，AV-500 型核磁共振光譜儀；X4型數(shù)字顯示顯微熔點測定儀（溫度未校正）； Agilent 1100 LC/MSD SL；LABCONCO冷凍干燥儀；JASCO P-1020旋光測定儀半制備型高效液相色譜儀Waters 600 型；檢測器Waters2487紫外雙波長檢測器；Agilent-1100高效液相色譜儀；柱色譜材料為硅膠(200-300目) 、RP-C18（YMC;12nm）

7、及Sephadex LH-20（Amersham Biosciences）；柱色譜試劑均為分析純，高效液相色譜試劑均為色譜純。白芷根于200403采自江蘇省鹽城市洋馬鎮(zhèn)，經(jīng)江蘇省中國科學(xué)院植物研究所袁昌齊研究員鑒定，憑證標(biāo)本現(xiàn)存放于江蘇省中國科學(xué)院植物研究所標(biāo)本館內(nèi)。2  提取與分離白芷根（38 kg）用95的乙醇提取3次，合并提取液，減壓濃縮至無醇味。提取液依次用石油醚、醋酸乙酯萃取，剩余部分為水部分。將水部分上樣于D101大孔樹脂柱，水乙醇梯度洗脫，分為6個部分。其中50洗脫部分分別進(jìn)行硅膠柱層析，氯仿甲醇（10173）梯度洗脫，各流分采用薄層或高效液相檢識，合并相類似組分，反復(fù)

8、反相柱層析分離，凝膠純化，得到6個化合物。3  結(jié)構(gòu)鑒定3.1  化合物1  白色無定形粉末（凍干），mp 170172，21.7D= -52.40(c=0.065 甲醇：水=40：60)，紫外燈365，254 nm下均顯示藍(lán)綠色熒光。ESI-MS m/z：509M+Na+，示其分子量為486，結(jié)合1H-NMR，13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C21H26O13?；衔锏?H-NMR，13C-NMR，HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)詳見表1。綜合各譜數(shù)據(jù)及與文獻(xiàn)1對照鑒定化合物為7-O-D-Apiofuranosyl-(16)-D -Glucopyranosyl

9、-Scopoletin(xeroboside)。表1  化合物1的1H-NMR，13C-NMR，HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)（略）3.2  化合物2 白色無定形粉末（凍干），21.7D= -55.20(c=0.065  甲醇水=4060)，紫外燈365 nm及254 nm下均顯示藍(lán)綠色熒光，ESI-MS m/z：495M+Na+，示其分子量為472，結(jié)合1H-NMR，13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C20H24O13?；衔锏?H-NMR，13C-NMR，HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)見表2。綜合以上各譜數(shù)據(jù)及與已知文獻(xiàn)2對照鑒定化合物為aesculetin-6-

10、O-D- apiofuranosyl-(16)-O-D-glucopyranoside。3.3  化合物3白色無定形粉末（氯仿-甲醇），mp 207，21.7D= +47.75(c=0.07 甲醇水=4060)，紫外燈365，254 nm下均顯示藍(lán)色熒光。ESI-MS m/z407M+Na+示其分子量為384，結(jié)合1H-NMR，13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C17H20O10?；衔锏?H-NMR，13C-NMR，COSY，HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)詳見表3。綜合各譜數(shù)據(jù)3鑒定化合物為tomenin。表2  化合物2的1H-NMR，13C-NMR，COSY，HMQC及HMB

11、C譜數(shù)據(jù)（略）表3  化合物3的1H-NMR，13C-NMR，COSY，HMQC及HMBC譜數(shù)據(jù)（略）         3.4  化合物4 白色無定形粉末（凍干），mp 140141，19.4d= -52.30(c=0.06 甲醇水=4060)，紫外燈365及254 nm下均顯示藍(lán)色熒光，結(jié)合1H-NMR，13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C16H18O9。1H-NMR（Pyridine-d5 500 MHz）：6.27（1H，d，J=9.5 Hz，3-H），7.56（1H，d，J=9.

12、5 Hz，4-H），7.62（1H，s， 5-H），6.90（1H，s， 8-H），3.70（3H，s，OCH3），5.65（1H，d，J=7.1 Hz，1-H-Glc）。綜合以上數(shù)據(jù)及與已知文獻(xiàn)4對照鑒定化合物為isoscopolin。3.5  化合物5 白色無定形粉末（凍干），21.7D= -55.20(c=0.065 甲醇水=4060)， ESI-MS m/z：455M+Na+，示其分子量為432，結(jié)合1H-NMR，13C-NMR譜數(shù)據(jù)推斷分子式為C19H28O11。1H-NMR（Pyridine-d5 500 MHz）：7.07（2H，d，J=8.5Hz，3-H和5

13、-H），7.19（2H，d，J=8.6 Hz， 2-H和6-H），2.96（2H，t，J=7.4 Hz， -H），4.34（1H，dd，J=7.5，11.2 Hz，3a-），3.88（1H，dd，J=7.4，11.2Hz，3a-），4.82（1H，d，J=7.1Hz，1-H-Glc），5.75（1H，d，J=2.6 Hz，1-H-Api）。13C-NMR（Pyridine-d5 125 MHz）：129.53（C-1），130.50（C-2），116.13（C-3），157.23（C-4），116.13（C-5），130.50（C-6），71.12（C-），35.88（C-），104.58（C

14、-1-Glc），74.95（C-2-Glc），78.45（C-3-Glc），71.12（C-4-Glc），77.08（C-5-Glc），68.87（C-6-Glc），111.07（C-1- Api），77.74（C-2- Api），80.37（C-3- Api），75.00（C-4- Api），65.48（C-5- Api）。綜合以上數(shù)據(jù)及與文獻(xiàn)5對照鑒定化合物為Osmanthuside H。4  結(jié)果與討論前人從茜草科植物山石榴 Xeromphis spinosa1以及Xeromphis obovata 6中分到過此化合物1，故此次為首次從傘形科中分離得到。但化合物的熔點有文獻(xiàn)1報

15、道為238234，有文獻(xiàn)2報道為192197，而本次實驗測得的熔點為170172，具體原因有待進(jìn)一步確定。前人從忍冬科植物L(fēng)onicera gracilipes3中分得化合物2，但是只報道了1H-NMR，13C-NMR譜數(shù)據(jù)，且C-6和C-7的歸屬顛倒了。本文通過對其進(jìn)行HSQC，HMBC等二維譜的研究，糾正了前人的錯誤，豐富了該化合物的波譜數(shù)據(jù)。日本學(xué)者Hasegawa3最早從薔薇科植物Prunus tomentosa中分離得到化合物3，但沒有報道核磁數(shù)據(jù)，以后未見此化合物的報道。本文完善了該化合物的核磁數(shù)據(jù)，并且用二維譜進(jìn)行了全歸屬，豐富了該化合物的波譜數(shù)據(jù)，并首次報道了此化合物的旋光值。

16、化合物6在自然界植物中分布廣泛，但在傘形科植物中此類化合物較少見?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1S. P. Sati， D. C. Chaukiyal， O. P. Sati J.Jounal of Natural Products， 1989 ，52 (2)：376.2T. Iossifova， B. Vogler， I. Kostova. Escuside， a new coumarin-secoiridoid from Fraxinus ornus barkJ.Fitoterapia ，2002， (73)：386.3Hasegawa， Masao. Flavonoids of various Prunus species. X. Wood constituents of Prunus tomentosaJ. Shokubutsugaku Zasshi ，1969，82(978)：458.4Komissarenko. N. F， Derkach. A. I，Komissarenko. A. N. Coumarins of Aesculus hippocastanum L J.Fitochemistry Rastitelnye Resursy，1994， 30(3)：53.5Warashi