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1、生姜油抗炎和抗超敏反應作用研究 作者:朱路,王貴林,姚觀平,鄧云帆,周青陽 【關(guān)鍵詞】 生姜油,;,抗炎;,遲發(fā)性超敏反應,;,小鼠摘要:目的觀察生姜油抗炎、抗超敏反應作用。方法用二甲苯引起小鼠耳腫脹,弗氏完全佐劑引起小鼠足腫脹模型來觀察生姜油對急性炎癥的作用。用2,4二硝基氯苯(DNCB)誘發(fā)小鼠遲發(fā)性超敏反應來觀察生姜油對超敏反應的作用。 結(jié)果生姜油抑制二甲苯引起的
2、小鼠耳腫脹,降低弗氏完全佐劑引起小鼠足腫脹和血清中NO水平的升高。對DNCB引起的小鼠遲發(fā)性皮膚超敏反應有明顯抑制作用。 結(jié)論 生姜油有明顯的抗炎和抑制超敏反應的作用。關(guān)鍵詞:生姜油 ; 抗炎; 遲發(fā)性超敏反應 ; 小鼠Effect of Ginger Oil against Inflammation and Delayed Type HypersensitivityAbstract:ObjectiveTo study the influence of Ginger oil against inflammation and
3、 delayed type hypersensitivity.MethodsEar edema induced by dimethylbenzene, paw swelling induced by Freund's complete adjuvant in mice were used to study the anti-inflammatory effects. Delayed type hypersensitivity induced by 2,4-nitrylchlorobenzene in mice were used to study the antiallergic ef
4、fect. ResultsGinger oil significantly suppressed xylene-induced ear edema, reduced Freund's complete adjuvant-induced paw swelling and the level of NO elevation in serum ,and also markedly inhibited delayed type hypersensitivity induced by 2,4nitrylchlorobenzene in mice. ConclusionGinger o
5、il has some anti-inflammatory and antiallergic effects.Key words:Ginger Oil; Antiinflammatory effect; Delayed type hypersensitivity; Mice 生姜是姜科植物姜(Zingiber officinale Roscoe)的根莖,是一種廣泛使用的藥食兩用植物,具有解表散寒、溫中止嘔等功效?,F(xiàn)代醫(yī)學工作者通過對姜的化學成分、生物活性和治療應用的研究,認為姜的功效與它的三大主要
6、成分有關(guān),即揮發(fā)油、姜辣素和二苯基庚烷類1?,F(xiàn)代藥理學研究證明生姜具有抗炎、鎮(zhèn)吐、抗氧化、抗菌等功效2。本文研究了生姜油對某些炎癥模型和遲發(fā)性超敏反應的作用。 1 材料1.1 動物 昆明種小鼠,體重1822 g,兼用,由湖北省實驗動物研究中心提供。合格證號:SCXK(鄂)20030005。1.2 藥物 生姜油,由蕪湖杉杉生物技術(shù)有限公司提供,采用超臨界二氧化碳萃取,為棕紅色油狀液體。生姜油相對密度(20/200C)0.925,折光系數(shù)(200C)1.499。臨用前,按高低劑量組的用量加入吐溫80和蒸餾水,碾磨成乳劑使用。 1.3 主要
7、試劑 二甲苯,湖北沙市化工試劑廠生產(chǎn),批號:20000304。弗氏完全佐劑,SIGMA公司產(chǎn)品,批號:90078102 。布洛芬,湖北金龍福藥業(yè)有限公司,批號 :20050202。醋酸地塞米松片,浙江仙琚制藥股份有限公司,批號050450。2.4-二硝基氯苯(DNCB),北京市興津化工廠,批號:20020402。NO 試劑盒,南京建成生物工程研究所,批號:20051111。 1.4 儀器 電子天平(AB304S),德國塞多利斯公司產(chǎn)品;酶標儀(KHB ST360),上海智華醫(yī)學精密儀器有限公司;千分尺,上海量具刃器廠產(chǎn)品。 2 方法2.1
8、0; 對二甲苯誘發(fā)小鼠耳腫脹的影響3 小鼠40只,隨機分成4組。即模型對照組、生姜油高低劑量組(1.5,0.75 mlkg1)、陽性藥(布洛芬0.08 gkg1)對照組, 每組10只。各組小鼠按 20 ml/kg體重ig給藥,1次/d,連續(xù)3 d,其中模型對照組給等容積蒸餾水。末次給藥后1 h在小鼠的右耳正反兩面涂0.02 ml二甲苯致炎,左耳不做處理,4 h后頸椎脫臼處死小鼠,剪下雙耳,用8 mm的打孔器分別在左、右耳同一部位打下圓耳片,電子天平稱重。用左、右耳片重量差值作為腫脹度。并計算腫脹抑制率。 結(jié)果見表1。2.2 對佐劑性炎癥小鼠足腫脹的影響4雄性小鼠50只,隨機分成5組
9、,即正常組、模型對照組、生姜油高低劑量組(1.0、0.5 mlkg1)、陽性藥(布洛芬0.08 gkg1)、陽性藥(地塞米松0.02 gkg1)對照組, 每組10只。小鼠腹部皮膚去毛約3 cm2區(qū)域,然后用微量進樣器取7% DNCB 0.1 ml,均勻滴加于脫毛區(qū)致敏。于致敏當天開始按 20ml/kg體重ig給藥,1次/d,連續(xù)7 d。末次給藥30 min后,用1% DNCB涂于每鼠右耳前后兩面。24 h后稱體重,頸椎脫臼處死小鼠,分別剪下雙耳,用8 mm打孔器在相同部位打下圓耳片,電子天平稱重,以左、右耳片重量差值作為腫脹度。取出胸腺和脾臟,電子天平稱重,計算胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。結(jié)果見表4。
10、2.5 統(tǒng)計學處理數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用±s表示 ,組間比較采用t檢驗。 所有統(tǒng)計均在SPSS12.0統(tǒng)計軟件上進行。 3 結(jié)果3.1 對二甲苯誘發(fā)小鼠耳腫脹的影響 由表1可見,生姜油1.5,0.75 mlkg1組腫脹度與對照組比較,差異具有非常顯著性意義(P0.01),表明生姜油對二甲苯誘發(fā)的小鼠耳腫脹有抑制作用。 表1 對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響(略)與模型對照組比較,*P0.01,與模型對照組比較,*P0.05;n=103.2 對佐劑性炎癥小鼠足腫脹的影響 由表2可見,致炎24 h生姜油1,0.
11、 5 mlkg1組腫脹度與模型組比較,差異具有非常顯著性意義(P0.01), 致炎48 h生姜油1,0. 5 mlkg1組腫脹度與模型組比較,差異具有顯著性意義(P0.05),表明生姜油對佐劑性炎癥小鼠的足腫脹有抑制作用。 表2 對佐劑性炎癥小鼠足腫脹的影響(略)與正常組比較,P0.01,與模型對照組比較;*P0.05,*P0.01;n=103.3 對佐劑性炎癥小鼠血清NO的影響 由表3可見,生姜油1 mlkg1組腫脹度與模型組比較,差異具有顯著性意義(P0.05),表明生姜1 mlkg1組顯著的減少了佐劑性炎癥小鼠血清NO的含量。生姜0. 5 mlkg1組
12、雖然也減少了NO的含量,但與模型組比較,差異無顯著性意義。表3 對佐劑性炎癥小鼠血清NO的影響(略)與正常對照組比較,P0.01,與模型對照組比較,*P0.05;n=103.4 對小鼠遲發(fā)性超敏反應的影響 由表4可見, 生姜油1.5,0.75 mlkg1能減輕DNCB致小鼠耳腫脹度,其中生姜油1.5 mlkg1與對照組比較,差異有顯著性意義(P0.05);生姜油1.5,0.75 mlkg1使DNCB致遲發(fā)性超敏反應小鼠的胸腺和脾臟指數(shù)明顯降低,結(jié)果表明生姜油能抑制小鼠遲發(fā)性超敏反應。 表4 對DNCB致小鼠遲發(fā)
13、性超敏反應的影響(略)與模型對照組比較,*P0.01,與模型對照組比較,*P0.05;n=10 4 討論一氧化氮(nitricoxide,NO)是由L2精氨酸(L2arginine,L2Arg)胍基氮經(jīng)NO合酶(NOsynthase,NOS)的催化發(fā)生氧化而形成。研究表明,急、慢性炎癥的發(fā)生均與NO有關(guān)6,7。它不僅參與炎癥性關(guān)節(jié)疾病的發(fā)病過程,還參與炎癥關(guān)節(jié)損傷。小鼠足趾皮內(nèi)注射弗氏完全佐劑可誘導產(chǎn)生明顯關(guān)節(jié)炎癥4,與公認的類風濕性關(guān)節(jié)炎動物模型(大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎)在組織學和形態(tài)學上有相似特征8。本實驗采用小鼠佐劑性炎癥模型來觀察生姜油對弗氏完全佐劑誘導的關(guān)節(jié)炎癥的影響,結(jié)果生姜
14、油可明顯抑制足腫脹,對血清中NO升高有一定抑制作用,表明生姜油具有抗炎作用。遲發(fā)性超敏反應是一種依賴T細胞免疫反應模型,其主要特征是致敏機體在抗原攻擊部位出現(xiàn)遲發(fā)型炎癥反應,又稱接觸性過敏反應9。 DNCB是一種半抗原,將其稀釋后涂抹腹壁皮膚,與皮膚蛋白結(jié)合成完全抗原,由此刺激T淋巴細胞增殖成致敏淋巴細胞,7 d后再將其涂抹于耳部,使局部產(chǎn)生遲發(fā)型變態(tài)反應。本實驗發(fā)現(xiàn)高低劑量的生姜油均明顯降低胸腺和脾臟指數(shù),減輕耳腫脹度,表明生姜油對遲發(fā)性超敏反應有抑制作用。參考文獻:1 盧傳堅,歐 明,王寧生.姜的化學成分分析研究概述J.中藥新藥與臨床藥理,2003,14(3):215. 2
15、160; 朱路,王貴林. 姜的藥理作用研究進展J.長江大學學報(自科版),2006 ,3(1):321.3 郭淑芳,楊 彤. 用鼠耳腫脹法研究抗炎藥實驗方法的改進J. 實驗動物科學與管理 ,2003 ,20(3):42.4 Chillingworth NL, Donaldson LF. Characterisation of a Freund's complete adjuvant-induced model of chronic arthritis in miceJ. J Neurosci Methods,2003,128(1,2):4
16、5.5 李繼洪,楊 欣,張志蓉,等. 咳喘清顆粒抗炎、免疫、抑菌作用研究J.中藥藥理與臨床,2005,21(5):49.6 IalentiA,IanaroA,MoncadaS,et al . Modulation of acute inflammation by endogenous nitricoxideJ.EurJPharmacol , 1992,211:177.7 IuvoneT,CarnuccioR,Di Rosa M. Modulation of granuloma formation by endogenous nitricoxideJ.EurJPharmacol , 1994, 265(1 2):89.
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