機能學實驗——紅細胞滲透脆性

1、二、  影響紅細胞滲透脆性的因素有哪些？紅細胞自身因素;凡能影響紅細胞表面積/體積的因素均可影響紅細胞滲透脆性，如珠蛋白數(shù)量不足或完全缺乏、遺傳性球形細胞增多癥、自身免疫性溶血性貧血伴繼發(fā)球形細胞增多、缺鐵性貧血、紅細胞壽命、等 實驗因素：血液放置時間較長（一般不能超過6小時）、低滲鹽溶液的濃度不準確、實驗器具未清潔干燥、試管編號錯誤、向試管內(nèi)滴加血液或混勻含紅細胞的液體時動作用力過大、有凝血、抗凝劑用量過多、等【課前講解】 一、 實驗設計的原理 將紅細胞懸浮于低滲鹽溶液中，水將在滲透壓差的作用下滲入細胞，于是紅細胞發(fā)生膨脹，由正常的雙凹圓碟形變成球形，

2、并開始破裂而發(fā)生溶血。紅細胞在低滲鹽溶液中發(fā)生膨脹破裂的現(xiàn)象稱紅細胞滲透脆性。但紅細胞對低滲鹽溶液具有一定的抵抗力，這種抵抗力的大小可作為衡量紅細胞滲透脆性高低的指標。對低滲鹽溶液抵抗力小，表示滲透脆性高；相反，則表示滲透脆性低。同一個體的紅細胞對低滲鹽溶液的抵抗力并不相同。將血液滴入不同濃度的低滲NaCl溶液中可檢測其抵抗力的大小，剛開始出現(xiàn)溶血的NaCl溶液濃度為該血液中紅細胞的最小抵抗力；出現(xiàn)完全溶血溶液濃度，為該血液中紅細胞的最大抵抗力。前者代表紅細胞的最大滲透脆性，后者代表紅細胞的最小滲透脆性。生理學上將滲透壓與血漿的滲透壓相等的溶液稱為等滲溶液；能使懸浮于其中的紅細胞保持正常體積和

3、形態(tài)的溶液稱為等張溶液。等滲溶液不一定是等張溶液，如1.9%的尿素溶液雖是等滲溶液，但不是等張溶液；而等張溶液溶液一定是等滲溶液，如濃度為0.85%的NaCl溶液既是等滲溶液又是等張溶液。成敗關鍵（注意事項） 1. 血液最好新鮮制備。 2. 準確配制不同濃度的低滲鹽溶液。 3. 所有玻璃器皿要求干燥清潔。 4. 向試管內(nèi)滴加血液時不可用力擠壓，不可將血泡沫注入試管?；靹蚝t細胞的液體時動作應輕，以免造成溶血。 5. 觀察溶血情況時以白色為背景。 6. 為使各管加血量相同，加血時持針角度應一致。一、 結果分析  將紅細胞懸浮于低滲鹽溶液中，水將在滲透壓的作用下滲入細胞，于是紅細胞發(fā)生膨

4、脹，由正常的雙凹圓碟形變成球形，并開始破裂而發(fā)生溶血。紅細胞在低滲鹽溶液中發(fā)生膨脹破裂的現(xiàn)象稱紅細胞滲透脆性。但紅細胞對低滲鹽溶液具有一定的抵抗力，這種抵抗力的大小可作為衡量紅細胞滲透脆性的指標。同一個體的紅細胞對低滲鹽溶液的抵抗力并不相同。生理情況下，衰老的紅細胞可變形性減小，變成球形，因而對低滲鹽溶液抵抗力低，會先發(fā)生破裂，正常人剛開始出現(xiàn)溶血的NaCl溶液濃度為0.46%0.42%NaCl溶液；而較幼稚的紅細胞的抵抗力高，較后發(fā)生破裂，正常人出現(xiàn)完全溶血的NaCl溶液濃度為0.34%0.32% NaCl溶液。紅細胞膜對水分子可自由通透，水分子依滲透壓梯度進入紅細胞，紅細胞膨脹破裂而溶血，

5、因此，紅細胞在蒸餾水中立即發(fā)生溶血。紅細胞膜對尿素分子可自由通透，尿素分子依濃度梯度進入紅細胞，而紅細胞內(nèi)的物質不能自由通過紅細胞膜，導致紅細胞內(nèi)滲透壓增高，水進入細胞，紅細胞膨脹破裂而溶血，因此，1.9%的尿素溶液雖是等滲溶液，但不是等張溶液。NaCl分子和紅細胞內(nèi)的物質都不易透過紅細胞膜，故紅細胞在等滲的0.85%的NaCl溶液中不會發(fā)生溶血，因此，0.85%的NaCl溶液既是等滲溶液又是等張溶液。二、 非預期結果及可能原因分析 血液放置過久；混勻血液或向試管內(nèi)滴加血液時用力過大；肝素抗凝時用量過多；玻璃器皿未干燥。2. 溶血程度不隨NaCl溶液濃度改變而有規(guī)律地變化，原因主要有

6、：  各試管加血量不準確；試管編號不準；溶液濃度配制不準。  【參考結論】 1.     紅細胞在小于或等于0.46%濃度的低滲鹽溶液中會發(fā)生溶血。 2.     正常人紅細胞滲透脆性最高值為0.46%0.42% 的NaCl溶液，最低值為0.34%0.32% 的NaCl溶液。3.     紅細胞在等滲鹽溶液中為雙凹圓碟形，在低滲鹽溶液中為球形。 4.     紅細胞在等滲的尿素溶液或蒸餾

7、水中會立即發(fā)生溶血。 【實驗報告要點】 一、  為什么同一個體的紅細胞滲透脆性有最大值和最小值？ 同一個體的紅細胞對低滲鹽溶液的抵抗力并不相同。生理情況下，衰老的紅細胞可變形性減小，變成球形，因而對低滲鹽溶液抵抗力低，會先發(fā)生破裂；而較幼稚的紅細胞的抵抗力高，較后發(fā)生破裂。將血液滴入不同濃度的低滲NaCl溶液中，剛開始出現(xiàn)溶血的NaCl溶液濃度為該血液中紅細胞的最大滲透脆性，出現(xiàn)完全溶血的溶液濃度，為該血液中紅細胞的最小滲透脆性。二、  紅細胞在等滲的1.9%尿素溶液中會發(fā)生什么現(xiàn)象？為何出現(xiàn)這種現(xiàn)象？紅細胞在等滲的1.9%尿素溶液中會立即溶血。因紅細胞膜對尿素分子可自由通透，尿素分子依濃度梯度進入紅細胞，而紅細胞內(nèi)的物質不能自由通過紅細胞膜，導致紅細胞內(nèi)滲透壓增高，水進入細胞，紅細胞膨脹破裂而溶血，因此，1.9%的尿素溶液雖是等滲溶液，但不是等張溶液?！緟⒖純?nèi)容】 一、紅細胞滲透脆性實驗的臨床意義【臨床意義】 紅細胞在低滲鹽水中，水分透過細胞膜可使紅細胞逐漸脹大而破壞。本試驗是測定紅細胞對各種濃度的低滲溶液的抵抗力。紅細胞對低滲溶液抵抗力與其厚度有關，厚度越大，膜面積與體積比值越小，則滲透脆性越大