淺論急性冠脈綜合征血清MMP-2MMP-9及hs-CRP水平的檢測及其臨床意義

1、淺論急性冠脈綜合征血清MMP-2，MMP-9及hs-CRP水平的檢測及其臨床意義                作者：胡開宇，蔡雪黎，張懷勤，計光，王忠永【摘要】  目的 ：觀察急性冠脈綜合征患者外周靜脈血清基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平并評價其臨床意義。方法 ：選取急性冠脈綜合征患者53例為ACS組，其中急性心肌梗死（AMI）28例，不穩(wěn)定型心絞痛（UA）25例。用酶聯(lián)免疫

2、吸附法（ELISA）檢測血清MMP-2，MMP-9水平，用免疫散射比濁法檢測血清hs-CRP。另選穩(wěn)定型心絞痛組（SA）28例、正常對照組30例作為對照。結(jié)果 ：ACS組血清MMP-2，MMP-9，hs-CRP的水平高于SA組（P 0.05）及對照組（P 0.01）。AMI組血清MMP-2，MMP-9，hs-CRP的水平顯著高于UA組（P 0.05）。ACS組患者血清MMP-9與hs-CRP水平呈正相關(guān)，MMP-2與hs-CRP無明顯相關(guān)性。AMI組患者血清hs-CRP與cTnI水平呈正相關(guān)（r =0.401，P 0.05）。結(jié)論 ：MMP-2，MMP-9在ACS中的高表達與急性冠脈綜合征的發(fā)

3、生有關(guān)，可作為預(yù)測動脈粥樣斑塊不穩(wěn)定或破裂的血清學指標，其水平有利于冠心病患者的危險分層。聯(lián)合檢測血清MMP-2，MMP-9與hs-CRP可能成為一種有效的判斷斑塊穩(wěn)定性、預(yù)測急性心血管事件發(fā)生的臨床指標。 【關(guān)鍵詞】  冠脈綜合征 基質(zhì)金屬蛋白酶-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-9 超敏C反應(yīng)蛋白急性冠脈綜合征（ACS）是以不穩(wěn)定型心絞痛（UA）及急性心肌梗死（AMI）為臨床表現(xiàn)的嚴重冠心病類型。近年研究表明炎癥在ACS發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用。C反應(yīng)蛋白（CRP）是一項反映機體炎癥過程最具有標志性的因子，被認為在ACS的發(fā)病及預(yù)后中起重要作用?；|(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）通過降解賦予斑塊完整性

4、的細胞外基質(zhì)（ECM）促使斑塊破裂，導致ACS發(fā)生。如何及時識別或檢出不穩(wěn)定斑塊已成為研究的熱點。本研究檢測了不同冠心病患者的血清MMP-2，MMP-9及超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）水平，探討上述指標與ACS的關(guān)系。1  資料和方法1.1  一般資料  所有入選者均為2006年6月-2007年12月住院及門診患者。ACS組53例，男34例，女19例。其中AMI 組28例，男18例，女10例；UA組25例，男16例，女9例。穩(wěn)定型心絞痛（SA）組28例，男19例，女9例，年齡（63.2±9.8）歲。正常對照組30例，男20例，女10例，年齡（62.0&#

5、177;8.9）歲。所有入選者近3個月未服用過他汀類藥物。所有冠心病患者均行選擇性冠狀動脈造影（CAG）檢查。ACS組排除入院前行經(jīng)靜脈溶栓或急診經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)（PCI）的患者。各實驗組一般臨床資料見表1。AMI組所有病例均符合WHO的AMI診斷標準。UA組和SA組病例符合美國心臟學學會/美國心臟協(xié)會診斷標準。正常對照組為門診進行健康體檢者，無心血管病史，經(jīng)體格檢查及實驗室檢查、心電圖、胸片、心臟超聲檢查健康，與實驗組性別、年齡、社會背景相匹配的人群，自愿參與研究。排除有下列情況之一者：肝纖維化，感染或腫瘤，近期重大外傷、手術(shù)，腦血管和周圍血管病，自身免疫性疾病，嚴重肝腎疾病，嚴重的全身其

6、他系統(tǒng)疾病，近期服用抗炎藥，心肌炎或心力衰竭。1.2  方法  采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測血清MMP-2、MMP-9，試劑盒購自晶美生物工程有限公司，由美國R&D systems公司生產(chǎn)；酶標儀為西班牙變色龍全自動酶免儀Bio-Asia TRITURUS。用免疫散射比濁法檢測血清hs-CRP（美國Beckman公司IMMAGE蛋白分析系統(tǒng)），試劑盒采用美國Beckman公司配套試劑。AMI患者于發(fā)病24 h內(nèi)，UA、SA患者入院后即刻，正常對照組于清晨空腹抽血，采肘靜脈血5 mL，2 h內(nèi)離心（3 000 r/min，10 min）取得血清，分管置于-70

7、 °C冰箱中待用。嚴格按照試劑盒操作步驟進行MMP-2，MMP-9測定。1.3  統(tǒng)計學處理方法  計數(shù)資料用x2檢驗表示，多樣本均數(shù)比較用方差分析，兩樣本的均數(shù)比較用獨立樣本t 檢驗。各指標的相關(guān)性分析采用Bivariate過程的Pearson等級相關(guān)法。2  結(jié)果2.1  3組患者MMP-2，MMP-9，hs-CRP水平比較  見表2。2.2  ACS組亞組分析  見表3。2.3  相關(guān)性分析  ACS組患者血清MMP-2與hs-CRP水平無顯著相關(guān)（r =0.27，P =0.05），MMP

8、-9與hs-CRP水平呈正相關(guān)（r =0.601，P0.01）。AMI組患者血清肌鈣蛋白I（cTnI）水平為(9.01±11.47)ng/mL，MMP-2，MMP-9水平與cTnI無顯著相關(guān)（均P0.05），MMP-2，MMP-9與hs-CRP有顯著相關(guān)（r =0.379， P 0.05和r =0.606，P 0.01），hs-CRP水平與cTnI有顯著相關(guān)（r =0.401，P0.05）。3  討論ACS起病兇險，往往使患者致死、致殘，故早期識別此類患者并做出處理有很大的臨床益處。但從本組資料也可看出ACS患者與SA在一般資料（高血壓、糖尿病、血脂）中差異無顯著性，一般資

9、料不能提供足夠的鑒別信息?，F(xiàn)在已明確ACS的發(fā)生與斑塊的不穩(wěn)定相關(guān)，而MMPs是一種Zn離子依賴性的內(nèi)肽酶所組成的水解蛋白酶家庭，表達過量可引起ECM降解增加、纖維帽變薄，導致斑塊變得易損。MMP-2稱為明膠酶A，MMP-9稱為明膠酶B，它們在動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)ECM的降解中起主要作用。Fiotti等1通過對ACS和SA患者行PCI治療時利用遠端保護裝置收集的斑塊組織中的明膠酶（MMP-2、MMP-9）進行了檢測，結(jié)果顯示ACS患者中明膠酶含量明顯高于SA患者，說明MMPs活性增高是斑塊不穩(wěn)定性的生化基礎(chǔ)。研究還發(fā)現(xiàn)在不穩(wěn)定斑塊，特別是易發(fā)生破裂的斑塊肩部區(qū)域，MMPs的含量較高，酶的活性明顯

10、增加，說明纖維帽的崩解與MMPs活性增高有關(guān)。本研究顯示ACS外周血MMP-2，MMP-9的水平顯著高于SA組及對照組，表明外周血MMP-2，MMP-9升高是斑塊不穩(wěn)定的標志，可作為ACS新的重要的血清標志物。本研究ACS的亞組分析顯示：AMI患者與UA患者血MMP-2，MMP-9濃度差異有顯著性，此結(jié)果與Kai等報道AMI外周血水平較UA明顯升高相符。這可能與AMI斑塊破裂的程度較UA嚴重有關(guān)，并提示檢測MMP-2，MMP-9有利于冠心病患者的危險分層。相關(guān)分析顯示AMI組患者血清cTnI與MMP-2，MMP-9水平無顯著相關(guān)（均P 0.05），與文獻報道相符，這說明MMP-2，MMP-9水

11、平的變化與心肌壞死的嚴重程度無關(guān)，系非壞死的心肌釋放所致，與斑塊的不穩(wěn)定性有關(guān)，是反映ACS斑塊穩(wěn)定性的重要指標。         C反應(yīng)蛋白是人體非特異性炎癥反應(yīng)最敏感的標志物之一。研究表明CRP能加劇斑塊內(nèi)的炎癥活動，并且通過誘導分泌MMPs，促進ECM降解而造成斑塊脆性增加，因此，CRP水平與冠狀動脈粥樣硬化的存在和嚴重程度有明顯相關(guān)性。本研究顯示ACS組hs-CRP的濃度顯著高于SA組及對照組，且AMI組血清hs-CRP濃度較UA患者顯著升高，其水平與cTnI水平顯著相關(guān)，與Mikael等文獻報道相符，提示

12、hs-CRP在促進斑塊的破裂過程中起重要的作用；在排除其他原因引起CRP升高的情況下，CRP水平的升高意味著斑塊可能存在急性的炎癥反應(yīng)，有發(fā)生破裂的危險，血清hs-CRP濃度的高低，與ACS病情的嚴重程度存在一定的相關(guān)性；本研究證實了炎癥反應(yīng)的程度與心肌損傷的程度存在相關(guān)性，表明hs-CRP水平可以反映心肌壞死的嚴重程度，可與cTnI一起預(yù)測心梗的嚴重程度及估計心梗的預(yù)后。因此，CRP在ACS的發(fā)生、發(fā)展以及判斷斑塊的穩(wěn)定性中具有重要預(yù)測意義。本實驗顯示ACS患者MMP-9與hs-CRP水平呈正相關(guān)，表明ACS斑塊病變的炎癥反應(yīng)與ECM降解、MMPs過度表達、斑塊穩(wěn)定與否有著必然聯(lián)系。MMP-

13、2與hs-CRP水平無顯著相關(guān)（r =0.27，P =0.05），與文獻報道兩者呈正相關(guān)不符，這可能與兩者合成部位、調(diào)節(jié)方式不同有關(guān)，同時也不排除MMP-2與CRP釋放曲線的不平行、出現(xiàn)峰值的時間不一致而造成兩者不相關(guān)。本研究測定的是單點時間的樣本含量，未進行多時間點的樣本含量的追蹤觀察，尚待進一步深入研究。【參考文獻】  1 Fiotti N,Altamura N,Orlando C,et al. Metalloproteinases-2,-9 and TIMP-1 expression in stable and unstable coronaryplaques undergoi

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