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1、第十一章第十一章 彎曲菌屬與螺桿菌屬?gòu)澢鷮倥c螺桿菌屬 中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系 李登清李登清 兩菌屬大小形狀類(lèi)似,為革蘭陰性菌,兩菌屬大小形狀類(lèi)似,為革蘭陰性菌,呈弧形與螺旋形,有動(dòng)力,不易區(qū)別。呈弧形與螺旋形,有動(dòng)力,不易區(qū)別。 彎曲菌目彎曲菌目Campylobacterale 彎曲菌科彎曲菌科 螺桿菌科螺桿菌科 Campylobacteraceae Helicobacteraceae 彎曲菌屬?gòu)澢鷮?螺桿菌屬螺桿菌屬 Campylobacter Helicobacter第三節(jié)第三節(jié) 彎彎 曲曲 菌菌 屬屬 Campylobacter 彎曲菌屬可引起人和
2、動(dòng)物的腹瀉胃腸炎和彎曲菌屬可引起人和動(dòng)物的腹瀉胃腸炎和腸道外感染等疾病。腸道外感染等疾病。分類(lèi)分類(lèi) 彎曲菌原歸屬于弧菌屬,彎曲菌原歸屬于弧菌屬,1973年正式命名為年正式命名為彎曲菌屬。彎曲菌屬。 2019年的伯杰手冊(cè)中將其分為年的伯杰手冊(cè)中將其分為30個(gè)種個(gè)種(亞種亞種),對(duì)人致病的主要有:空腸彎曲菌、大腸彎曲對(duì)人致病的主要有:空腸彎曲菌、大腸彎曲菌和胎兒彎曲菌。菌和胎兒彎曲菌。共性共性:革蘭陰性、彎曲呈弧形、革蘭陰性、彎曲呈弧形、S型等型等;動(dòng)力陽(yáng)性有鞭毛、運(yùn)動(dòng)活潑動(dòng)力陽(yáng)性有鞭毛、運(yùn)動(dòng)活潑;微需氧,溫度微需氧,溫度2537, 42;氧化酶、觸酶陽(yáng)性。脲酶氧化酶、觸酶陽(yáng)性。脲酶-,硫化氫硫化
3、氫-。 常見(jiàn)病原菌常見(jiàn)病原菌: 空腸彎曲菌空腸彎曲菌 大腸彎曲菌大腸彎曲菌 胎兒彎曲菌胎兒彎曲菌臨床意義臨床意義分布:分布:廣泛分布于動(dòng)物界。主要定居于廣泛分布于動(dòng)物界。主要定居于人和動(dòng)物的腸道內(nèi)。人和動(dòng)物的腸道內(nèi)。自然界的任何水中都能夠有彎曲自然界的任何水中都能夠有彎曲菌。菌。 臨床意義臨床意義 1 1、腹瀉人和動(dòng)物,水樣便,膿血粘液樣便。腸內(nèi)感染、腹瀉人和動(dòng)物,水樣便,膿血粘液樣便。腸內(nèi)感染常見(jiàn)空腸彎曲菌。常見(jiàn)空腸彎曲菌。2 2、格林巴利綜合征空彎、格林巴利綜合征空彎0 0:1919,0 0:4141外周神經(jīng)外周神經(jīng) 病變和反響性關(guān)節(jié)炎。病變和反響性關(guān)節(jié)炎。3 3、腸外感染常見(jiàn)胎兒彎曲菌。
4、菌血癥、敗血癥,心、腦膜、腸外感染常見(jiàn)胎兒彎曲菌。菌血癥、敗血癥,心、腦膜、肺、膽囊炎,牙周炎,關(guān)節(jié)炎等。肺、膽囊炎,牙周炎,關(guān)節(jié)炎等。 空腸彎曲菌: 感染來(lái)源:感染動(dòng)物的糞便、未經(jīng)處置的 水、雞和牛乳等。 傳播途徑:以污養(yǎng)食物和水的傳播為主。 傳播方式:經(jīng)口傳播。 能夠的致病物質(zhì):能夠的致病物質(zhì):細(xì)胞毒素,包括細(xì)胞致死性腫脹毒素,志賀樣毒素細(xì)胞毒素,包括細(xì)胞致死性腫脹毒素,志賀樣毒素和溶血毒素等。和溶血毒素等。腸毒素腸毒素內(nèi)毒素內(nèi)毒素致病部位及表現(xiàn):致病部位及表現(xiàn):感染部位通常在空腸、回腸粘摸上皮細(xì)胞,也可致感染部位通常在空腸、回腸粘摸上皮細(xì)胞,也可致結(jié)腸感染。主要以其鞭毛和特異性外膜蛋白與
5、空、結(jié)腸感染。主要以其鞭毛和特異性外膜蛋白與空、回腸上皮細(xì)胞結(jié)合、生長(zhǎng)繁衍、產(chǎn)生毒素致病?;啬c上皮細(xì)胞結(jié)合、生長(zhǎng)繁衍、產(chǎn)生毒素致病。腹瀉大多為水樣便,小部分為膿血黏液便。腹瀉大多為水樣便,小部分為膿血黏液便。生物學(xué)特性形狀染色形狀染色培育培育生化特性生化特性抗原性抗原性 革蘭氏染色陰性菌革蘭氏染色陰性菌 形狀細(xì)長(zhǎng),呈弧形、形狀細(xì)長(zhǎng),呈弧形、S S型或海鷗展翅形型或海鷗展翅形 一端或兩端有鞭毛,一端或兩端有鞭毛,運(yùn)動(dòng)活潑運(yùn)動(dòng)活潑 投鏢樣或螺旋樣前投鏢樣或螺旋樣前進(jìn)進(jìn) 無(wú)芽胞和莢膜無(wú)芽胞和莢膜 空腸彎曲菌革蘭染色空腸彎曲菌革蘭染色空腸彎曲菌鞭毛掃描電鏡 胎兒彎曲菌單鞭毛生物學(xué)特性形狀染色形狀染色培
6、育特性培育特性生化特性生化特性抗原性抗原性 微需氧菌微需氧菌 氣體:氣體:5%O25%O2、10%CO210%CO2、85%N285%N2 生長(zhǎng)溫度:生長(zhǎng)溫度: 一切菌株均能在一切菌株均能在3737生長(zhǎng)生長(zhǎng) 胎兒彎曲菌為胎兒彎曲菌為25253737 空腸、大腸、海鷗彎曲菌空腸、大腸、海鷗彎曲菌42434243生長(zhǎng)生長(zhǎng) 營(yíng)養(yǎng)要求高:常用布氏肉湯增菌,布氏血營(yíng)養(yǎng)要求高:常用布氏肉湯增菌,布氏血平板培育平板培育 生長(zhǎng)緩慢生長(zhǎng)緩慢48h48h培育以上培育以上生物學(xué)特性生物學(xué)特性形狀染色形狀染色培育特性培育特性生化特性生化特性抗原性抗原性 改良改良Camp-BAPCamp-BAP培育基,培育基,Skir
7、rowSkirrow氏氏培育基,同一培育基上可見(jiàn)兩種:培育基,同一培育基上可見(jiàn)兩種: 第一種菌落第一種菌落: :不溶血,灰白色、扁不溶血,灰白色、扁平、潮濕、有光澤,看上去像水滴,平、潮濕、有光澤,看上去像水滴,邊緣不整的蔓延生長(zhǎng)的菌落。邊緣不整的蔓延生長(zhǎng)的菌落。 第二種菌落第二種菌落: :不溶血,常呈圓形、不溶血,常呈圓形、凸起、半透明、有光澤、單個(gè)菌落凸起、半透明、有光澤、單個(gè)菌落( (直徑為直徑為1 12mm)2mm),邊緣完好小菌落。,邊緣完好小菌落??漳c彎曲菌在巧克力平板上的菌落生物學(xué)特性形狀染色培育生化特性抗原性 氧化酶陽(yáng)性、觸酶陽(yáng)性 硝酸鹽復(fù)原+ 脲酶- ,硫化氫- 不能氧化和發(fā)
8、酵糖類(lèi)生物學(xué)性狀形狀染色培育生化特性抗原性 菌體O抗原血清分型的根底 熱不穩(wěn)定抗原 heatlabile antigen, H L 鞭毛抗原H生物學(xué)特性生物學(xué)特性抵抗力:抵抗力:對(duì)外環(huán)境抵抗力不強(qiáng);對(duì)外環(huán)境抵抗力不強(qiáng);不耐枯燥,對(duì)熱和巴氏消毒敏感;不耐枯燥,對(duì)熱和巴氏消毒敏感;對(duì)酸性環(huán)境和消毒劑敏感對(duì)酸性環(huán)境和消毒劑敏感,對(duì)氧也非常敏感。對(duì)氧也非常敏感。微生物學(xué)檢測(cè) 1、標(biāo)本采集、標(biāo)本采集采取新穎糞便與肛拭子、血液、腦脊采取新穎糞便與肛拭子、血液、腦脊液等立刻送檢。液等立刻送檢。如不能及時(shí)送檢應(yīng)種入如不能及時(shí)送檢應(yīng)種入Cary-Blair運(yùn)運(yùn)送培育基,放送培育基,放4冰箱保管。冰箱保管。 微生
9、物學(xué)檢測(cè)程序2 2、檢驗(yàn)程序、檢驗(yàn)程序血液血液 糞便糞便 、肛拭子、肛拭子 直接鏡檢直接鏡檢增菌培育布氏肉湯增菌培育布氏肉湯 直接鏡檢直接鏡檢 PCR PCR 分別培育布分別培育布氏平板動(dòng)力檢查氏平板動(dòng)力檢查 DNA DNA探針雜交探針雜交 25 37 42 25 37 42 微需氧微需氧 卡卡- -布運(yùn)送培育基布運(yùn)送培育基 24-72h 24-72h 可疑菌落可疑菌落 涂片染色鏡涂片染色鏡檢檢 純培純培育育 布氏血瓊脂布氏血瓊脂 鑒鑒定定 微生物學(xué)檢測(cè)3 3、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)方法 直接鏡直接鏡檢檢分別培育分別培育 鑒鑒 定定 革蘭染色,糞便與肛拭革蘭染色,糞便與肛拭子可直接鏡檢:特殊形子可直接
10、鏡檢:特殊形狀和運(yùn)動(dòng)。狀和運(yùn)動(dòng)。PCR方法直方法直接檢測(cè)糞便標(biāo)本中的彎接檢測(cè)糞便標(biāo)本中的彎曲菌核酸。曲菌核酸。 暗視野或相差顯微鏡暗視野或相差顯微鏡 觀動(dòng)力觀動(dòng)力微生物學(xué)檢測(cè)微生物學(xué)檢測(cè)3 3、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)方法 直接鏡檢直接鏡檢 分別培育分別培育 鑒鑒 定定1糞便或肛拭標(biāo)本:直接接種改良糞便或肛拭標(biāo)本:直接接種改良Campy- BAP選擇平板、選擇平板、 Skirrow氏培育基。氏培育基。血、腦脊液標(biāo)本:布氏肉湯增菌后轉(zhuǎn)種分血、腦脊液標(biāo)本:布氏肉湯增菌后轉(zhuǎn)種分離培育基布氏平板。離培育基布氏平板。 2培育溫度:培育溫度: 37 、42 3微需氧條件微需氧條件 厭氧罐厭氧罐 氣袋法氣袋法 雙平板
11、法雙平板法 蠟燭缸法蠟燭缸法 微生物學(xué)檢測(cè)微生物學(xué)檢測(cè)3 3、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)方法 直接鏡直接鏡檢檢 分別培育分別培育 鑒鑒 定定菌屬鑒定菌屬鑒定 菌落生長(zhǎng)特征菌落生長(zhǎng)特征菌體形狀特點(diǎn)染色性、動(dòng)力菌體形狀特點(diǎn)染色性、動(dòng)力氧化酶陽(yáng)性、觸酶陽(yáng)性氧化酶陽(yáng)性、觸酶陽(yáng)性硝酸鹽復(fù)原實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性硝酸鹽復(fù)原實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性脲酶陰性脲酶陰性 微生物學(xué)檢測(cè)微生物學(xué)檢測(cè)3 3、檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)方法 直接鏡檢直接鏡檢 分別培育分別培育 鑒鑒 定定菌種鑒定菌種鑒定 42空、大和空、大和25胎兒生胎兒生長(zhǎng)長(zhǎng)馬尿酸鈉水解實(shí)驗(yàn):馬尿酸鈉水解實(shí)驗(yàn): 空腸彎曲菌空腸彎曲菌(+) 醋酸吲哚水解實(shí)驗(yàn)醋酸吲哚水解實(shí)驗(yàn) 空腸彎曲菌空腸彎曲菌(+) 胎兒彎曲菌胎兒彎曲菌 (-) 萘啶酸、頭孢噻吩敏感實(shí)驗(yàn):萘啶酸、頭孢噻吩敏感實(shí)驗(yàn): 萘啶酸萘啶酸 頭孢噻吩頭孢噻吩空腸彎曲空腸彎曲 + -胎兒彎曲菌胎兒彎曲菌 - + 彎曲菌屬溫度生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)菌種432537空腸彎曲菌+-+大腸彎曲菌+-+胎兒彎曲菌-+簡(jiǎn)明彎曲菌-+馬尿酸鈉水解實(shí)驗(yàn): 培育物 馬尿酸鈉培育基 42培育48h 離心
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