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文檔簡介
1、7500熒光定量PCR儀使用說明注意事項:實驗過程必須戴干凈的一次性乳膠手套 進(jìn)行操作。PCR反應(yīng)所用的96孔板、8聯(lián)管或單管必須為ABI7500專用,凸蓋PCR管禁止使用。 使用8聯(lián)管兩側(cè)需用空管支撐,使用單管四角需用空管支撐,以防止板槽受力不均。實驗數(shù)據(jù)用光盤刻錄,禁止U盤拷取,數(shù)據(jù)可暫存于本機(jī)電腦硬盤中,各實驗室D盤中有指定 文件夾,中心外部人員數(shù)據(jù)存于FUWU文件夾下的子文件夾中。操作步驟?開機(jī)依次打開電腦顯示屏、主機(jī),輸入開機(jī)密碼“ 7500”待電腦啟動穩(wěn)定后,按壓7500儀器電源按扭,等待儀 器啟動(約30 s)。當(dāng)儀器只顯示Power狀態(tài)指 示燈時,方可按壓托盤以打 開它。放入反
2、應(yīng)板按壓此處注:關(guān)閉儀器托盤時,應(yīng)按一個角度推壓托盤的右側(cè)。(以下過程按字母順序a-q進(jìn)行操作)?創(chuàng)建反應(yīng)板文件雙擊電腦桌面上SDS軟件圖標(biāo)打開SDS軟件;在對話框中選擇 Create New Document,或選擇菜單欄 File > New; c.單擊 Nextb.為反應(yīng)板文件命名a.從 Assay下拉列表中選擇反應(yīng)板類型1.Relative Quantification (ddCt) Plate(相對定卓里)2.Absolute Quantification (Standard對定量標(biāo)準(zhǔn)曲線)Curve)(絕3.Allelic Discrimination (等位基因鑒別)4.P
3、lus/Minus (陽性/陰性實驗)反應(yīng)板文件類型有以下幾種f. 單擊Nextd.選擇要添加到反應(yīng)板 文件的探針(引物),單擊 Add添加選中探針e.如果在列表中未列出 所需探針,請單擊NewDetector創(chuàng)建新探針?為每個反應(yīng)孔指定探針與任務(wù)?為反應(yīng)孔設(shè)置樣品名g. 選取探針相同的反應(yīng)孔h. 點擊反應(yīng)孔對應(yīng)的探針。i. 單擊Task欄的下邊指定探 針任務(wù)。j. 選擇Use (使用)。k. 單擊Finish (完成)。BWPIIT 加 XCUE1/PlateEspon 川I Tc 兀叭igimrHnM yslem- p jte ' jr J C:-14乩 船 閔.亠 匕-JB.JL
4、 lh F!2innru-rtA- |L1»_iq占金屜百區(qū)1 r n縞甩g := 川屮 Tools-AMljfsisWindowti-dpFswirt Tom*卩和",刊岡n JPF.J.1二 駅 |進(jìn)行修改)l. 選取反應(yīng)孔,直接輸入相 應(yīng)樣品名(也可右鍵,調(diào) 出反 Well Inspector 對話 框,在 Sample Name 中MH Q-iarflap陽 dyiDilscoiMectedII iw 胡?設(shè)定PCR循環(huán)參數(shù)、運行程序J tiM t J'lJBtrnlZJL醫(yī)E卿¥InstSvkgft-rnrt stnrtg> 750C SymteF S XftBE - PlalsL 洛lardedp 日1令 過力薩 工gk Jnstrjrnnt Anlyis Wndow HlpELiltM TLlwm. 選擇 Instrument 選項卡,默認(rèn)條件下顯示標(biāo)準(zhǔn)PCR條件,可跟據(jù)實 驗具體情況修改;n. 單擊 Add DissociationStage添加溶解曲線循 環(huán);o. 修改PCR反應(yīng)體積;p. 將反應(yīng)板文件保存至 指定路徑。q. 點擊Start運行程序?結(jié)束實驗1. 實驗結(jié)束后關(guān)閉軟件。(確認(rèn)反應(yīng)板文件數(shù)據(jù)已保存)2. 打開拖盤,將反應(yīng)板取出,關(guān)閉拖盤。3. 按下7500儀器電源開關(guān)
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